逍遥散对非酒精性脂肪性肝炎大鼠Toll样受体4基因甲基化水平的调节作用

发布时间：2022-07-13 15:52

　　目的探讨逍遥散调节Toll样受体4（TLR4）基因甲基化水平治疗非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis,NASH）肝郁脾虚证大鼠的机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组及逍遥散组。正常组大鼠给予正常饮食28周,后4周注射生理盐水;模型组与逍遥散组大鼠饲喂高脂高糖饮食28周,并通过慢性应激束缚及饥饱失常刺激制备肝郁脾虚证模型,后4周分别注射生理盐水及逍遥散溶液。28周末收集3组大鼠尿液,取肝脏及海马组织,制作病理切片、采用实时荧光定量PCR（qPCR）、酶联免疫吸附实验（ELISA）、亚硫酸氢测序PCR（BSP）等方法检测相应指标。结果与模型组相比,逍遥散组大鼠肝郁脾虚证症状明显缓解,证候积分降低;肝细胞内的脂肪空泡及炎性细胞浸润程度显著减少;肝组织TLR4 mRNA含量下降,TLR4基因甲基化水平升高（P<0.05）。结论逍遥散可能通过上调非酒精性脂肪性肝炎肝郁脾虚证大鼠模型中TLR4基因甲基化水平,下调其TLR4 mRNA的表达,从而改善肝脏脂肪变性程度、炎症反应及肝郁脾虚症状,这可能是逍遥散治疗非酒精性脂肪性肝炎肝郁脾虚证... 

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试剂与药物
    1.2 仪器
    1.3 动物与分组
    1.4 伦理审查
    1.5 模型制备与取材
    1.6 D-木糖排泄率的检测
    1.7 去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)及5-羟色胺(Serotonin,5-HT)检测
    1.8 观察各组大鼠肝脏病理学改变
    1.9 TLR4 mRNA含量的表达
    1.10 DNA提取
    1.11 引物设计
    1.12 TLR4基因亚硫酸氢测序PCR(Bisulfite sequencing PCR,BSP)
    1.13 统计方法
2 结果
    2.1 一般行为学观察
    2.2 各组大鼠海马组织5-HT、NE含量和D-木糖排泄率比较
    2.3 肝脏HE及油红O染色结果
    2.4 实时荧光定量PCR结果
    2.5 TLR4基因甲基化分析
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]温肾方对乙肝肝硬化合并肝性脑病患者疗效及HMGB1,TLR4含量的影响[J]. 骆建兴,扈晓宇.  中国实验方剂学杂志. 2019(15)
[2]非酒精性脂肪肝中医证型及相关证候的临床分析[J]. 曾红丽,刘军楼,汪红.  环球中医药. 2018(05)
[3]大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝郁脾虚证模型的建立[J]. 苗宇船,刘杨,李若瑜,张冉冉,刘晋芳,徐慧超,陈浩,李明磊.  世界中西医结合杂志. 2018(04)
[4]非酒精性脂肪性肝病中西医结合诊疗共识意见（2017年）[J]. 李军祥,陈誩,王允亮.  中国中西医结合消化杂志. 2017(11)
[5]基于数据挖掘探讨非酒精性脂肪肝证型、证素的分布规律[J]. 连雅君,王庆国,程发峰,王雪茜,马重阳,穆杰,岳文超,杜欣.  中医药导报. 2017(05)
[6]大鼠脂肪肝肝郁脾虚证的模型[J]. 孙晓倩,孙蓉.  中国实验方剂学杂志. 2017(10)
[7]非酒精性脂肪肝中医证型客观化研究[J]. 徐亮,宓余强,李萍.  中华中医药杂志. 2015(07)
[8]非酒精性脂肪性肝病中医证候分布特点的研究[J]. 段娜,李志红,黄一茜,杨惠民.  北京中医药大学学报. 2012(12)



本文编号：3660325