当归补血汤对内皮祖细胞氧化应激损伤的保护作用

发布时间：2022-07-16 16:50

　　目的:研究当归补血汤（DBT）对过氧化氢（H2O2）诱导的小鼠骨髓来源内皮祖细胞（EPCs）氧化应激损伤的保护作用。方法:采用密度梯度离心法获取小鼠骨髓来源的单核细胞,通过特定培养基培养并鉴定获得EPCs,实验分为空白组,模型组,DBT组（100,200,400 mg·L-1）。采用噻唑蓝（MTT）比色法测定EPCs细胞存活率,构建H2O2诱导的细胞损伤模型;通过MTT,迁移小室（transwell）,Matrigel基质胶,超氧化物荧光阴离子探针（DHE）,分别检测EPCs增殖、迁移与体外血管形成能力,以及活性氧（ROS）水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞自噬相关蛋白泛素结合蛋白SQSTM1（p62）,微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型蛋白（LC3-Ⅱ）的蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组EPCs细胞增殖能力、迁移能力、成管腔数及小管分支长度均显著降低（P<0.01）,胞内ROS水平显著升高（P<0.01）,自噬标志性蛋白p62显著升高（P<0.01）,LC3-Ⅱ蛋白表达降低（P<0.01）;与模型组比较,DBT组能呈浓度依赖性地升高EPCs增殖... 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料
    1.1 动物
    1.2 药物与试剂
    1.3 仪器
2 方法
    2.1 EPCs的分离培养鉴定与细胞造模
    2.2 DBT培养液的制备与分组
    2.3 MTT比色法检测细胞增殖能力
    2.4 DHE法检测胞内ROS水平
    2.5 transwell迁移实验检测细胞迁移能力
    2.6 小管形成实验tube formation法检测细胞血管形成能力
    2.7 蛋白免疫印迹法（Western blot）检测自噬相关蛋白表达
    2.8 统计学分析
3 结果
    3.1 EPCs的培养与鉴定
    3.2 细胞损伤模型的构建
    3.3 对H2O2诱导的EPCs增殖能力的影响
    3.4 对H2O2诱导的EPCs迁移能力的影响
    3.5 对H2O2诱导的EPCs血管形成功能的影响
    3.6 对H2O2损伤的EPCs细胞胞内ROS水平的影响
    3.7 对H2O2损伤的EPCs自噬相关蛋白表达的影响
4 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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[6]益气活血类中药对血管生成影响的研究[J]. 殷沈华,唐德才.  时珍国医国药. 2013(01)
[7]当归补血汤对动脉粥样硬化兔内皮祖细胞及血清VEGF、SDF-1的影响[J]. 秦臻,黄水清.  中国病理生理杂志. 2012(02)



本文编号：3662890