龙胆苦苷基于P2x7受体-NLRP3炎症小体调控改善酒精性脂肪蓄积的机制研究

发布时间：2022-08-02 16:17

　　目的:龙胆苦苷（Gentiopicroside,GPS）,来源于龙胆属植物龙胆的干燥根及根茎,具有多种药理活性。由于用小分子抑制剂调节P2x7R-NLRP3炎症小体的激活可能是治疗和预防酒精性肝病的潜在治疗方法,因此,我们研究了这个过程是否会被GPS调节。方法:通过用酒精（5g/kg）灌胃建立小鼠急性酒精性脂肪肝的体内模型。然后通过用50mM乙醇处理HepG2细胞或用LPS处理RAW264.7巨噬细胞和小鼠骨髓来源的巨噬细胞（bone marrow-derived macrophages,BMDM）,随后用 3mM ATP刺激,建立体外模型。结果:在小鼠急性酒精性脂肪肝模型中,GPS显著降低谷丙转氨酶（Alanine Amino transferase,ALT）、谷草转氨酶（Aspartatetransaminase,AST）和积累的甘油三酯（Triglyceride,TG）的含量。GPS能够升高LKB1/AMPK的水平,而且与胆固醇调节元件结合蛋白-1（Sterol Regulatory Element-binding Protein-1,SREBP-1）和乙酰辅酶a羧化酶（Acet... 

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 实验材料和方法
    1.1 实验材料
    1.2 实验方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 动物实验过程
        1.2.3 生化指标测定
        1.2.4 肝组织学分析
        1.2.5 HepG2细胞油红O染色
        1.2.6 免疫组化实验
        1.2.7 免疫荧光实验
        1.2.8 小鼠原代骨髓巨噬细胞分离及体外培养
        1.2.9 实时PCR实验
        1.2.10 蛋白印迹分析实验
        1.2.11 Caspase-1活性检测实验
        1.2.12 酶联免疫吸附试验(ELISA)
        1.2.13 SiRNA转染实验
        1.2.14 统计学分析
第二章 实验结果
    2.1 龙胆苦苷改善酒精引起的肝脏脂肪变性
    2.2 龙胆苦苷通过减少脂肪生成和促进脂质氧化来缓解酒精引起的脂肪沉积
    2.3 龙胆苦苷在由酒精引起的小鼠肝脏脂肪变性中通过阻断P2x7R抑制NLRP3炎症小体的活化
    2.4 龙胆苦苷通过调节P2x7R-NLRP3炎症小体的激活改善酒精引起的肝细胞脂质沉积
    2.5 P2x7R激活是酒精诱导肝细胞脂质沉积的上游关键受体
    2.6 龙胆苦苷基于P2x7R阻断炎症小体活化所致的巨噬细胞IL-1 β释放
第三章 讨论
第四章 结论
参考文献
致谢



本文编号：3668842