清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤BDNF、MKK7表达的影响

发布时间：2022-11-03 19:13

　　目的:研究清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤后BDNF、MKK7表达的影响,探讨清脑益元汤保护脑缺血损伤的可能作用机制。方法:将192只雄性SD大鼠,体重250±30g,按随机数字表法分为4组:空白组（n=12只）、假手术组（n=60只）、模型组（n=60只）、清脑益元汤组（n=60只）。假手术组、模型组及清脑益元组按缺血损伤后1d、3d、7d、14d、28d五个取材时间点分为5个亚组（n=12只）。并分别作如下处理:空白组正常饲养,灌胃等体积蒸馏水;假手术组仅插线0.8cm,术后正常饲养,灌胃等体积蒸馏水;模型组行MCAO术,制成大鼠急性脑缺血损伤模型,术后灌胃等体积蒸馏水至各取材时间点;清脑益元汤组灌胃等体积清脑益元汤7d后行MCAO术,制成大鼠急性脑缺血损伤模型,术后灌胃等体积清脑益元汤至各取材时间点。模型大鼠参考Longa的5分制法对大鼠进行神经功能缺损评分,并按各时间点进行标本采集。取材后,免疫组织化学法检测大鼠缺血侧皮质区BDNF免疫阳性细胞数;RT-qPCR检测大鼠缺血侧皮质区BDNFmRNA表达水平;蛋白质印迹（Western blotting）法检测大鼠脑缺血侧皮质区MKK7... 

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
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引言
1 实验材料
    1.1 实验动物及饲养条件
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 实验动物饲养条件
    1.2 实验动物和给药方法
        1.2.1 实验动物
    1.3 实验主要试剂、仪器及器材
        1.3.1 主要试剂
        1.3.2 主要液体及配制方法
        1.3.3 主要仪器
2 实验方法
    2.1 实验动物分组及给药
    2.2 模型制备
        2.2.1 线栓准备
        2.2.2 手术操作
    2.3 模型制备成功的评定标准
    2.4 脑组织病理标本制作
    2.5 指标检测
        2.5.1 免疫组化法检测缺血侧皮质区BDNF免疫阳性细胞
        2.5.2 大鼠脑缺血侧皮质区BDNFmRNA的表达(Quantitative Real-timePCR)
        2.5.3 大鼠脑缺血侧皮质区MKK7的表达(Western blotting)
    2.6 统计处理
3 实验结果
    3.1 实验动物观察
    3.2 动物造模结果
    3.3 神经功能缺损评分结果
    3.4 免疫组化检测大鼠脑缺血侧皮质区BDNF阳性细胞表达的实验结果
    3.5 RT-qPCR检测大鼠脑组织缺血侧皮质区BDNFmRNA的实验结果
    3.6 大鼠脑缺血侧皮质区MKK7蛋白表达(蛋白印迹法检测)
4 讨论
    4.1 中医对中风病因病机的探究
        4.1.1 历代医籍记载详述中风病不同病名
        4.1.2 历代医家不断探究中风病之复杂病机
        4.1.3 古今医家不断探究中风病之关键病位
    4.2 西医对卒中病理机制的研究
        4.2.1 脑缺血损伤的相关机制与信号通路
        4.2.2 BDNF与脑缺血损伤的关系
        4.2.3 MKK7与脑缺血损伤的关系
    4.3 清脑益元汤防治缺血性中风的思路
        4.3.1 肾虚痰瘀、脑络失养将诱发缺血性中风
        4.3.2 痰瘀互结、毒邪伤髓则导致缺血性中风
        4.3.3 清热祛瘀,补肾益元可治疗缺血性中风
        4.3.4 清脑益元汤组方思路及用药原理
    4.4 实验结果分析
        4.4.1 实验方法的选择
        4.4.2 清脑益元汤对BDNF与 MKK7 的影响
5 问题与展望
结论
参考文献
附录
主要缩略词表
综述 自噬与缺血性脑损伤的关系及中医药干预的研究概述
    参考文献
致谢
个人简历及攻读学位期间获得的科研成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]益肾化瘀方治疗脑卒中后认知功能障碍疗效及对炎症因子水平的影响[J]. 钟建威,汤小青,文海中.  当代医学. 2018(36)
[2]制首乌药理作用研究进展[J]. 张飘,戚进.  海峡药学. 2018(11)
[3]辛芍组方中灯盏细辛、赤芍单方对脑缺血再灌注损伤大鼠的作用及机制[J]. 陆定艳,李靖,董莉,刘宗炎,王爱民,刘亭,林昌虎.  贵州医科大学学报. 2018(10)
[4]红景天苷对大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤的保护作用[J]. 周林甫,石亚军,焦亚楠,李仓霞,井艳丽,赵钢,王凤玲.  神经解剖学杂志. 2018(05)
[5]黄角颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠JAK2/STAT3信号通路的影响[J]. 潘宋斌,万琳,邵卫,唐坤,姚汉云.  中国病理生理杂志. 2018(09)
[6]缺血后处理联合水蛭注射液对脑缺血损伤大鼠PI3K表达的影响[J]. 胡跃强,兰鹏,秦红玲,苏锦勋,覃琴.  中西医结合心脑血管病杂志. 2018(02)
[7]电针神庭、百会对脑缺血再灌注大鼠认知功能及Beclin-1表达的影响[J]. 冯晓东,史景,湾明月,刘承梅.  中国康复理论与实践. 2018(01)
[8]红景天药理作用研究进展[J]. 孙许涛,柳颖,姜德友,陈飞,解颖,孙阳.  中医药学报. 2017(06)
[9]黄角颗粒通过刺激PI3K/AKT/mTOR信号通路减轻脑缺血再灌注大鼠的脑损伤[J]. 潘宋斌,万琳,邵卫,唐坤,姚汉云.  细胞与分子免疫学杂志. 2017(12)
[10]黄芪甲苷通过AKT-mTOR信号通路促进脑缺血的自噬改善脑缺血再灌注损伤[J]. 史楠,张燕,李晋峰,金磊,赵玫,张婷,刘康永,刘建仁.  中国临床神经科学. 2017(06)



本文编号：3700470