鱼藤素联用L-肌肽的增效减毒作用研究

发布时间：2022-12-07 01:56

　　鱼藤素是一种天然的鱼藤酮类化合物,其抗瘤谱广泛,对肺癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、前列腺癌、头颈癌等多种肿瘤具有良好的抗肿瘤效应。目前鱼藤素的应用受限于其帕金森样神经毒性,然而目前针对鱼藤素神经毒性的研究较少,因此,对鱼藤素的神经毒性进行研究,寻找合适的降低鱼藤素神经毒性的方法尤为迫切。L-肌肽是一种内源性二肽,其抗氧化作用和抑制α-突触核蛋白（α-synuclein,α-SYN）聚集的作用能有效保护神经元细胞,对延缓帕金森病（Parkinson’s disease,PD）进程具有重要意义。近年来多项体内外研究报道L-肌肽具有抗肿瘤作用,因此,联合应用L-肌肽和鱼藤素,可能起到协同抗肿瘤作用以及降低鱼藤素神经毒性的作用。本文的研究内容如下:（1）CCK-8法测定鱼藤素对SH-SY5Y细胞的增殖的抑制作用;采用流式细胞术检测处理后各组细胞内的凋亡率和活性氧（Reactive oxygen species,ROS）水平,验证鱼藤素是否通过氧化应激诱导细胞凋亡:采用分光光度法测定caspase-3活化程度,进一步验证鱼藤素对SH-SY5Y细胞凋亡的诱导作用。（2）检测不同浓度L-肌肽对SH-S... 

【文章页数】：85 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 鱼藤素研究概述
        1.1.1 鱼藤素的抗肿瘤活性概述
        1.1.2 鱼藤素的毒性及其解决方案研究进展
    1.2 L-肌肽的药理活性概述
        1.2.1 L—肌肽的抗肿瘤活性概述
        1.2.2 L-肌肽和帕金森病
        1.2.3 肌肽对肿瘤放化疗损伤的保护作用
    1.3 主要研究内容和研究意义
第二章 鱼藤素对SH-SY5Y细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用研究
    2.1 前言
    2.2 材料和仪器
        2.2.1 主要试剂
        2.2.2 主要仪器
        2.2.3 细胞株
    2.3 实验方法
        2.3.1 药液配制
        2.3.2 细胞复苏及培养方法
        2.3.3 CCK-8实验
        2.3.4 AO/EB实验
        2.3.5 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率
        2.3.6 DCFH-DA染色流式细胞术检测细胞ROS水平
        2.3.7 分光光度法检测caspase-3活化水平
        2.3.8 统计学分析
    2.4 结果
        2.4.1 CCK-8实验
        2.4.2 AO/EB实验
        2.4.3 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率
        2.4.4 DCFH-DA染色流式细胞术检测细胞ROS水平
        2.4.5 分光光度法检测caspase-3活化水平
    2.5 讨论
第三章 L-肌肽对鱼藤素诱导的神经毒性的保护作用
    3.1 前言
    3.2 材料和仪器
        3.2.1 主要试剂
        3.2.2 主要仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 药液配制
        3.3.2 CCK-8实验
        3.3.3 AO/EB实验
        3.3.4 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率
        3.3.5 DCFH-DA染色流式细胞术检测细胞ROS水平
        3.3.6 统计学分析
    3.4 结果
        3.4.1 CCK-8实验
        3.4.2 AO/EB实验
        3.4.3 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率
        3.4.4 DCFH-DA染色流式细胞术检测细胞ROS水平
    3.5 讨论
第四章 鱼藤素和L-肌肽对α -SYN和parkin表达的影响
    4.1 前言
    4.2 材料和仪器
        4.2.1 主要试剂
        4.2.2 主要仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 Western-blot实验
        4.3.2 Q-PCR实验
        4.3.3 统计学分析
    4.4 结果
        4.4.1 Western-blot实验
        4.4.2 Q-PCR实验
    4.5 讨论
第五章 鱼藤素和L-肌肽联合应用的抗肿瘤效应
    5.1 前言
    5.2 材料和仪器
        5.2.1 主要试剂
        5.2.2 主要仪器
        5.2.3 细胞株
    5.3 实验方法
        5.3.1 鱼藤素单药对H1299细胞增殖的影响
        5.3.2 L-肌肽单药对H1299细胞增殖的影响
        5.3.3 固定比例联合应用鱼藤素和L-肌肽对H1299细胞增殖的影响
        5.3.4 鱼藤素和30 mmol/L L-肌肽以非固定比例联合应用对H1299细胞增殖的影响
        5.3.5 统计学分析
    5.4 实验结果
        5.4.1 鱼藤素单药对H1299细胞增殖的影响
        5.4.2 L-肌肽单药对H1299细胞增殖的影响
        5.4.3 固定比例联合应用鱼藤素和L-肌肽对H1299细胞增殖的影响
        5.4.4 鱼藤素和30 mmol/L L-肌肽以非固定比例联合应用对H1299细胞增殖的影响
    5.5 讨论
全文小结与展望
参考文献
攻读学位期间成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[3]帕金森病氧化应激机制及抗氧化药物治疗进展[J]. 孟凛冽,李峰,伞勇智,马翊竑.  现代生物医学进展. 2015(02)
[4]肺癌的流行病学及治疗现状[J]. 姚晓军,刘伦旭.  现代肿瘤医学. 2014(08)
[5]多巴胺能神经元线粒体的氧化损伤与帕金森病[J]. 王光辉.  生命的化学. 2014(02)
[6]肌肽药理活性研究新进展[J]. 臧皓,李晓东,李丽,赵好东,宋利,张辉.  吉林中医药. 2014(03)
[7]肌肽对C57小鼠放射性肺损伤保护作用的机理研究[J]. 林白桦,贾勇士,詹文明,毕爱红,李国栋.  肿瘤学杂志. 2013(12)
[8]肌肽对高糖诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用[J]. 李宗泽,杨清俊,朱艳凌,刘影,杨菁,李敏.  中国药理学与毒理学杂志. 2013(05)
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[10]帕金森病发病机制的研究[J]. 关婷,鲍远程,余元勋,方长水,陈丽娟.  现代中西医结合杂志. 2009(34)



本文编号：3712028