山茱萸新苷对过氧化氢诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

发布时间：2022-12-10 18:45

　　目的:探究中药山茱萸提取物山茱萸新苷对SH-SY5Y细胞生长的影响及对过氧化氢诱导SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用。方法:体外培养的SH-SY5Y细胞与山茱萸新苷（0.3、1、3μmol/L）作用2 h后,加入过氧化氢300μmol/L作用12 h诱导SH-SY5Y细胞产生氧化损伤。显微条件下观察细胞形态;CCK8法检测细胞存活率;分光光度计法测定LDH释放率;JC-1法检测线粒体膜电位;荧光显微镜检测胞内ROS水平;Hochest 33258和AO/EB染色法检测细胞凋亡情况;分光光度计检测胞内SOD活力、GSH水平和MDA含量。结果:山茱萸新苷在0.01μmol/L～30μmol/L条件下对正常SH-SY5Y细胞不产生毒性作用;与模型对照组相比,山茱萸新苷在0.3、1和3μmol/L条件下可呈浓度依赖性地提高细胞存活率,并明显改善细胞受损形态和凋亡水平;同时山茱萸新苷0.3、1、3μmol/L能降低LDH渗漏率并升高线粒体膜电位;此外,山茱萸新苷各浓度还能提高胞内抗氧化酶水平和GSH含量,减少丙二醛的产生,在浓度为1μmol/L时效果最佳,其抗氧化损伤效果与维生素E相当。结论:... 

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 试验药物
    1.2 细胞
    1.3 试剂
    1.4 仪器
    1.5 方法
        1.5.1 细胞培养
        1.5.2 山茱萸新苷储备液的配制
        1.5.3 CCK8法检测山茱萸新苷对正常SH-SY5Y的细胞毒作用
        1.5.4 CCK8法检测山茱萸新苷对过氧化氢损伤SH-SY5Y细胞的存活率
        1.5.5 显微条件下观察细胞形态
        1.5.6 培养上清液中LDH的含量测定
        1.5.7 ROS检测
        1.5.8 Hochest 33258染色法、AO/EB双染法检测SH-SY5Y细胞凋亡
        1.5.9 JC-1法检测线粒体膜电位
        1.5.10 GSH含量、SOD酶活性和MDA水平的测定
        1.5.11 统计学分析
2 结果
    2.1 山茱萸新苷对正常SH-SY5Y细胞活力的影响
    2.2 山茱萸新苷对过氧化氢损伤SH-SY5Y细胞的影响
    2.3 山茱萸新苷对过氧化氢损伤SH-SY5Y细胞形态的影响
    2.4 山茱萸新苷对过氧化氢损伤SH-SY5Y细胞培养上清液中LDH含量的影响
    2.5 山茱萸新苷对过氧化氢损伤SH-SY5Y细胞ROS和线粒体膜电位的影响
    2.6 山茱萸新苷对过氧化氢诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响
        2.6.1 Hochest 33258染色法
        2.6.2 AO/EB双染法
    2.7 山茱萸新苷对过氧化氢损伤的SH-SY5Y细胞抗氧化能力的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]山茱萸环烯醚萜苷对APP/PS1/Tau三转基因小鼠脑内病理变化的影响[J]. 杨翠翠,包训杰,张丽,李雅莉,李林,张兰.  首都医科大学学报. 2019(04)
[2]山茱萸环烯醚萜苷对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及脑组织病理变化的影响[J]. 孟敏,杨翠翠,张丽,李雅莉,张兰,李林.  中国中医药信息杂志. 2018(06)
[3]山茱萸新苷抑制EAE模型大鼠中枢神经系统免疫细胞浸润及VCAM-1表达的研究[J]. 张荣博,徐彬,朱敏姿,周未莹,吴忧,梁顺利,章水晶,李铮,袁强.  浙江中西医结合杂志. 2018(01)
[4]山茱萸环烯醚萜苷对D-GalN/TNF-α损伤肝细胞的保护作用研究[J]. 马艳霞,吴勉华,姜泽群,赵凤鸣,李黎,李沐涵,陆兔林,杭爱武.  中国药理学通报. 2018(01)
[5]山茱萸的化学成分研究[J]. 叶贤胜,赫军,张佳琳,庞晓斌,张蕾,乔灏祎,潘雪格,张佳,刘淑娜,张维库,续洁琨.  中国中药杂志. 2016(24)



本文编号：3717319