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基于免疫层析技术的中药活性成分体内外快速检测方法的研究

发布时间:2022-12-10 18:35
  以早早孕试纸为代表的免疫层析快速检测技术具有廉价、即时、简便、自助操作等特点,不需要大型仪器和专业人员,可进行现场检测,十分适合快速获取中药成分的含量信息,从而实现中药采收、加工、生产、销售全过程的质量检测。本研究基于之前的结果,根据不同的检测需求,建立了多种基于不同技术策略的免疫层析试纸。目的:将免疫层析技术应用于中药质量控制,以柴胡皂苷D、葛根素、大黄酸等几种代表性成分为模式对象,建立针对中药指标性成分的免疫层析方法,实现自助、即时、快速检测中药中的有效成分,为开发新的中药质量控制及物质基础研究方法提供参考。方法:一、单克隆抗体(mabs)的生产与纯化采用本课题组前期工作中制备的阳性单克隆细胞株。冻存的杂交瘤细胞复苏后,接种于小鼠腹腔诱导其产生腹水,采集腹水,使用辛酸硫酸铵法从腹水中提取杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体,并用蛋白G柱纯化抗体,这些单克隆抗体即作为试纸特异性检测探针。二、制备柴胡皂苷D(SSD)胶体金免疫层析试纸1.不同粒径胶体金的制备与表征:采用柠檬酸氧化氯金酸法制备不同粒径胶体金,选择合适粒径作为抗体标记物。2.制备胶体金-抗体复合物:采用静电吸附法使标记物胶体金与单抗... 

【文章页数】:144 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
英文缩略词表
文献综述
    1. 现有中药成分的检测方法
    2. 免疫层析技术
    3. 胶体金免疫层析技术
    4. 新型标记材料在免疫层析方面的应用
    5. 量子点荧光材料的特点
    6. 量子点免疫亲和层析方法的优点
    7. 量子点免疫层析试纸的改进:使用IgY作为探针
    8. 基于免疫层析试纸的中药质量控制方法展望
    9. 选题的意义及思路
    参考文献
实验一 单克隆抗体的生产与纯化
    1. 前言
    2. 材料
    3. 方法
    4. 结果
    小结
    讨论
实验二 柴胡皂苷D胶体金免疫层析试纸的制备
    1. 前言
    2. 材料
    3. 方法
    4. 结果
    小结
    讨论
实验三 葛根素量子点荧光免疫层析试纸的制备
    1. 前言
    2. 材料
    3. 方法
    4. 结果
    小结
    讨论
实验四 基于IgY的大黄酸量子点免疫层析试纸的制备
    1. 前言
    2. 材料
    3. 方法
    4. 结果
    小结
    讨论
实验五 中药活性成分体内检测方法的探索
    1. 前言
    2. 材料
    3 方法
    4. 结果
    小结
    讨论
结语
参考文献
致谢
在学期间研究成果
个人简历


【参考文献】:
期刊论文
[1]荧光标记免疫层析技术在食品安全检测中的应用研究进展[J]. 汤轶伟,张宏,崔芷萌,焦雪晴,刘欢,钟克利,刘秀英,高子媛,徐志祥,丁浩宸,励建荣.  食品工业科技. 2018(02)
[2]疟原虫胶体碳试纸条的研制[J]. 何卓,李正祥,庄世锋,唐阳,王郭清.  热带医学杂志. 2017(03)
[3]荧光免疫层析技术在儿童甲型流感诊断中的临床价值[J]. 郭纯,钟礼立,易红玲,陈敏.  中国当代儿科杂志. 2016(12)
[4]蛋鸡首免乙型脑炎病毒后卵黄抗体变化规律的研究[J]. 王超群,方旭,宋子域,黄岩,庞洁,赵建国.  中国畜牧兽医. 2016(10)
[5]中药质量检测体系建设的思考与对策[J]. 张德伟,阳文武,封海霞,朱泽兵.  中国药业. 2016(16)
[6]基于谱效整合指纹谱技术的中药质量评价模式的发展探究[J]. 梁云飞.  轻工科技. 2016(08)
[7]纳米金免疫层析试条定量检测的研究[J]. 曾念寅,李玉榕,杜民.  生物医学工程研究. 2015(04)
[8]免疫层析技术的研究进展[J]. 李阳,王云龙.  中国卫生检验杂志. 2015(22)
[9]胶体金制备技术的改进与优化[J]. 刘颖沙,李建科,张琳,刘美慧.  食品与发酵工业. 2015(11)
[10]柴胡皂苷d药理与毒理作用研究进展[J]. 李晓宇,窦立雯,孙佳惠,孙蓉.  中国药物警戒. 2015(04)

博士论文
[1]农产品中四种常见真菌毒素免疫检测技术研究[D]. 章先.浙江大学 2016
[2]基于现代色谱技术的植物提取物活性成分的质量标准及在拟生命体液中热力学性质的研究[D]. 李大伟.浙江大学 2016
[3]检测肿瘤标志物的量子点免疫层析平台的构建[D]. 李雪.天津大学 2014
[4]基于荧光纳米颗粒标记的盐酸克伦特罗荧光免疫层析试纸的研究[D]. 宋春美.江南大学 2013
[5]纳米免疫微球的制备、表征及在免疫层析检测中的应用研究[D]. 彭运平.华南理工大学 2013
[6]睾酮时间分辨荧光免疫检测试剂及降钙素原胶体金半定量免疫层析检测试剂的研究[D]. 郝芬.南方医科大学 2013
[7]基于生物毒价检测和化学成分分析的毒性中药附子质量评控研究[D]. 温瑞卿.成都中医药大学 2013
[8]有机磷农药单残留及多残留免疫分析方法的建立与应用[D]. 华修德.南京农业大学 2012
[9]改进的侧流免疫层析法在检测心肌梗死早期标志物中的应用研究[D]. 祝继敏.复旦大学 2012

硕士论文
[1]盐酸克伦特罗和大肠杆菌O157:H7免疫层析检测方法的研究[D]. 罗凯.南昌大学 2017
[2]免疫层析定量检测氟苯尼考和莱克多巴胺的研究[D]. 胡莉明.南昌大学 2017
[3]改进型免疫侧向层析三聚氰胺检测方法研究[D]. 钟友好.合肥工业大学 2017
[4]磁性微球的制备及其用于免疫层析检测中的研究[D]. 陈艳华.东南大学 2016
[5]抗重金属Hg2+单抗制备及ELISA检测方法的建立[D]. 秦保亮.河南科技学院 2016
[6]盐酸克伦特罗胶体金免疫层析试纸条制备与应用[D]. 马静.集美大学 2015
[7]量子点免疫层析试纸条同步定量检测血液传染病三种指标的研究[D]. 侯飞.电子科技大学 2014
[8]基于胶体金和量子点免疫层析技术的研究及应用[D]. 李淑群.苏州大学 2013
[9]鸡卵黄免疫球蛋白的分离纯化、mPEG修饰及其稳定性研究[D]. 王丽英.华中农业大学 2012
[10]乙型肝炎表面抗原胶体金免疫层析法血清快速测定的性能评估[D]. 朱宇清.复旦大学 2012



本文编号:3717306

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