舒郁胶囊对PMS肝气郁证大鼠关键脑区Glu-GABA代谢通路中GAD、GABA-T、GAT-1变化的影响

发布时间：2022-12-10 15:47

　　目的:研究经前期综合征（Premenstrual syndrome,PMS）肝气郁证大鼠模型在接受期（Receptive phases/R）和非接受期（Non-Receptive phases/NR）关键脑区中γ-氨基丁酸转氨酶（GABA transaminase,GABA-T）、谷氨酸脱羧酶（Glutamate decarboxylase,GAD）、γ-氨基丁酸转运体（GABA transporter,GAT-1）变化和调肝方药舒郁胶囊对其干预作用,探讨舒郁胶囊治疗PMS肝气郁证的作用机制。方法:1.以阴道涂片法筛选动情周期规律的雌性大鼠,据体质量、旷场总路程将大鼠随机分为正常对照组、模型组、模型+舒郁胶囊组（SY组）、模型+氟西汀组（FXT组）。以改进优化的慢性束缚应激法制备PMS肝气郁证大鼠模型,造模时间为两个动情周期。造模及药物干预结束后,采集大鼠体质量,旷场总路程和强迫游泳悬浮不动时间等行为学指标,分别于接受期和非接受期采集外周血以及中枢关键脑区海马、额叶、顶区、下丘脑,存于-70℃待检测。2.ELISA法分别检测接受期、非接受期各组大鼠外周血清中谷氨酸（glutamate,... 

【文章页数】：95 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
提要
abstract
引言
    一、目前PMS肝气郁证的主要研究现状
    二、舒郁胶囊治疗PMS肝气郁证的相关性研究
    三、Glu-GABA代谢通路与PMS肝气郁证
    四、PMS肝气郁证相关脑区的研究进展
缩略词表
第一章 PMS肝气郁证大鼠模型制备以及行为学检测
    实验一 PMS肝气郁证大鼠模型制备
        1 实验材料
            1.1 实验动物
            1.2 实验药品
            1.3 主要仪器
        2 实验方法
            2.1 PMS肝气郁证大鼠模型制备
                2.1.2 大鼠初筛
                2.1.3 动物的分组及模型的制备
                2.1.4 给药
    实验二 PMS肝气郁证模型大鼠的评价
        1 体质量（Body Weight）
        2 行为学实验
            2.1 强迫游泳（FST）
            2.2 旷场实验（OFT）
            2.3 统计分析
        3 实验结果
            3.1 大鼠体质量增加量（Body Weight Gain）
            3.2 旷场实验结果（Total distance）
            3.3 强迫游泳实验结果（Immobility time）
        4 讨论
            4.1PMS肝气郁证大鼠模型研究概况
            4.2 PMS肝气郁证大鼠模型评价
            4.3 慢性束缚应激法诱导PMS肝气郁证大鼠模型
第二章 舒郁胶囊对PMS肝气郁证大鼠关键脑区Glu-GABA代谢通路中GAD、GABA-T、GAT-1 变化的影响
    实验一 舒郁胶囊对接受期、非接受期各组大鼠血清中Glu、GABA含量变化的影响
        1 实验材料与仪器
            1.1 材料与试剂
            1.2 试剂配置
        2 实验方法（以Glu为例）
        3 统计方法
        4 实验结果
            4.1 接受期与非接受期各组大鼠Glu的浓度
            4.2 接受期与非接受期各组大鼠GABA的浓度
            4.3 接受期与非接受期各组大鼠Glu/GABA的比值
    实验二 舒郁胶囊对接受期、非接受期各组大鼠各脑区GABA-T、GAD活性变化的影响
        1 实验材料与方法
            1.1 试剂与仪器
            1.2 试剂配制
        2 实验方法
        3 实验结果
            3.1 接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GABA-T活性的表达
            3.2 接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAD活性的表达
            3.3 非接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GABA-T活性的表达
            3.4 非接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAD活性的表达
    实验三 舒郁胶囊对接受期、非接受期各组大鼠各脑区GABA-T、GAD、GAT-1 mRNA表达水平的影响
        1 实验材料与仪器
            1.1 实验材料与试剂
            1.2 实验仪器
        2 实验方法
        3 实验结果
            3.1 接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GABA-T mRNA表达水平
            3.2 接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAD65 mRNA表达水平
            3.3 接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAD67 mRNA表达水平
            3.4 接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAT-1 mRNA表达水平
            3.5 非接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GABA-T mRNA表达水平
            3.6 非接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAD65 mRNA表达水平
            3.7 非接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAD67 mRNA表达水平
            3.8 非接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAT-1 mRNA表达水平
    实验四 舒郁胶囊对接受期、非接受期各组大鼠各脑区GABA-T、GAD、GAT-1 蛋白表达水平的影响
        1 实验材料与仪器
        2 实验方法
            2.1 样品准备
            2.2 组织样品全蛋白提取
            2.3 SDS-PAGE电泳
            2.4 蛋白杂交反应
            2.5 数据处理分析
        3 实验结果
            3.1 接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GABA-T蛋白表达水平
            3.2 接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAD65蛋白表达水平
            3.3 接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAD67蛋白表达水平
            3.4 接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAT-1 蛋白表达水平
            3.5 非接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GABA-T蛋白表达水平
            3.6 非接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAD65蛋白表达水平
            3.7 非接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAD67蛋白表达水平
            3.8 非接受期海马、下丘脑、额叶、顶区的GAT-1 蛋白表达水平
        4 讨论
            4.1 PMS肝气郁证模型大鼠GABA、Glu含量异常改变
                4.1.1 γ-氨基丁酸与PMS
                4.1.2 谷氨酸与PMS
                4.1.3 Glu/GABA的平衡被打破可能是PMS产生的重要原因
            4.2 PMS肝气郁证模型大鼠R期和NR期关键酶的活性并未发生显著性差异
            4.3 PMS肝气郁证模型大鼠Glu-GABA代谢通路中各关键酶发生异常变化
            4.4 PMS肝气郁证模型大鼠顶区GABA-T、GAT-1 关键基因和蛋白表达情况与其他脑区不同
            4.5 舒郁胶囊通过调节Glu-GABA代谢通路中关键酶的异常变化从而治疗疾病
研究特色与不足
结语
参考文献
附录
致谢
附件


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
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[3]前额皮层和后顶叶皮层神经元在识别记忆中的放电特征[D]. 代淑芬.首都师范大学 2013
[4]PMS肝气逆大鼠脑区GAD、GABA-T、GAT-1表达的变化及药物干预影响[D]. 房芳芳.山东中医药大学 2013
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[6]苯巴比妥对大鼠额叶、顶叶、小脑神经元及神经胶质细胞凋亡的影响[D]. 李净兵.河北医科大学 2011
[7]中药新药治疗经前期综合征（肝气郁结、脾运失调证）临床研究[D]. 谢琪.北京中医药大学 2004



本文编号：3717038