丁香及其主要成分对酪氨酸磷酸酶的抑制作用以及对胰岛素信号通路的影响

发布时间：2022-12-11 17:46

　　糖尿病（DM）是一类最常见的综合征,是由于代谢的紊乱而引起的,其特征主要为高血糖和血脂异常。糖尿病主要分为以下两种类型:1型糖尿病,它是胰岛素依赖型糖尿病,得病人群多为青少年;2型糖尿病,源于人体无法有效的利用胰岛素,即:非胰岛素依赖型糖尿病,得病人群多为成年人。截止到目前为止,大约有20万人以上被正式确认患有糖尿病,其中2型糖尿病的人数占80%-90%。目前为止,重要的治疗药物开发靶标是蛋白酪氨酸磷酸酶（PTPs）,将其作为治疗药物研发的目标。PTP的作用机制:通过去磷酸化催化机制调节细胞中的不同酶。大多数的的PTP与2型糖尿病有着密切的联系,例如SHP-1,PTP1B,在调节胰岛素信号传导中起着关键的抑制作用,因此备受关注。丁香（Clove）（桃金娘科蒲桃属植物丁香的花蕾）,是一味食药两用的中药,丁香可以起到杀菌、抗凝血的作用。在本论文中,首先我们分离纯化SHP-1的催化结构域△SHP-1及PTP1B的催化结构域△PTP1B,然后对160种中药进行筛选,筛选出对SHP-1、PTP1B的抑制率＞90%的中药--丁香。并且检测了丁香水提液对SHP-1、PTP1B的抑制效果,结果发现丁香... 

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 前言
    1.1 糖尿病概述
        1.1.1 糖尿病的现状
        1.1.2 糖尿病的定义
        1.1.3 糖尿病的类型
        1.1.4 糖尿病治疗
    1.2 蛋白质酪氨酸磷酸酶概述
        1.2.1 含SH2结构域的酪氨酸磷酸酶1(SHP-1)
        1.2.2 蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)
    1.3 SHP-1、PTP1B与2型糖尿病
    1.4 丁香
    1.5 超滤质谱
    1.6 本论文的研究目的与意义
第二章 丁香中SHP-1抑制剂的筛选
    2.1 实验用品
        2.1.1 实验试剂及材料
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 试剂的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 △SHP-1的表达及分离纯化
        2.2.2 △PTP1B的表达及分离纯化
        2.2.3 蛋白质浓度测定
        2.2.4 蛋白质纯度测定
        2.2.5 酶活力表征
        2.2.6 靶标酶中药抑制剂筛选
    2.3 实验结果
        2.3.1 PTP1B及SHP-1催化结构域的表达及分离纯化结果.
        2.3.2 靶标酶中药抑制剂筛选
        2.3.3 丁香水提液对胰岛素信号通路相关酪氨酸磷酸酶抑制效果的研究
        2.3.4 抑制类型的测定
    本章小结
第三章 具有协同作用多组分抑制率化合物的筛选
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验试剂
        3.1.2 实验仪器
    3.2 具有协同作用多组分抑制率化合物的筛选
    本章小结
第四章 单体A对SHP-1、PTP1B抑制效果的研究
    4.1 实验用品
        4.1.1 实验试剂及材料
    4.2 实验方法
        4.2.1 试剂的配制
        4.2.2 对PTP的半数抑制浓度(IC50)
    4.3 结果
        4.3.1 单体A对胰岛素信号通路中酪氨酸磷酸酶的抑制作用研究
        4.3.2 单体A对SHP-1、PTP1B抑制类型的评价
    本章小结
第五章 丁香及其主要成分单体A在细胞水平上对酪氨酸磷酸酶的磷酸化影响
    5.1 实验用品
        5.1.1 实验试剂及材料
    5.2 实验方法
        5.2.1 试剂的配制
        5.2.2 用单体A细胞培养和刺激
    5.3 结果
        5.3.1 蛋白质磷酸化水平
        5.3.2 单体A酪氨酸磷酸化水平对胰岛素信号通路关键蛋白的影响
    本章小结
第六章 结果与讨论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]东亚人群2型糖尿病易感基因的研究进展[J]. 高帆,韩睿,宋滇平.  中华临床医师杂志(电子版). 2015(06)
[2]Recent advances in the molecular genetics of type 2 diabetes mellitus[J]. Antonio Brunetti,Eusebio Chiefari,Daniela Foti.  World Journal of Diabetes. 2014(02)



本文编号：3719221