蝉花多糖JCH-1理化性质及其对RAW264.7细胞免疫调节机制研究

发布时间：2023-01-09 14:17

　　蝉花广泛分布于我国江浙地区及西南一带,在民间已有数千年的食用及药用历史。其生物活性广泛且资源丰富,因此合理开发利用蝉花资源具有十分深远的意义。多糖是蝉花的主要活性成分,虽然已有关于蝉花多糖理化性质及免疫调节活性研究的报道,但是仍不够系统和深入。因此,本文以从蝉花粗多糖中分离纯化得到的均一组分多糖JCH-1为研究对象,探究其基本理化性质。同时,以小鼠巨噬细胞RAW264.7为靶细胞,系统评估其免疫调节活性,并阐明其作用机制,以期为蝉花药用资源及其相关健康产品的综合开发与利用奠定基础。目的:1.测定JCH-1单糖组成及总糖、蛋白质、硫酸基与糖醛酸的含量,探究其基本理化性质。2.考察JCH-1对RAW264.7细胞形态、增殖能力、吞噬能力及免疫活性物质（NO、TNF-α及IL-6）释放量的影响,评估JCH-1免疫调节活性。3.考察JCH-1对RAW264.7细胞TLR4-MAPK-NF-KB信号通路的影响,探究JCH-1免疫调节机制。方法:1.JCH-1基本理化性研究采用糖腈酸酯衍生化法测定JCH-1的单糖组成;分别采用苯酚-浓硫酸法、考马斯亮蓝法、硫酸-咔唑法及氯化钡-明胶法测定JCH-1... 

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【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文献综述
    1 蝉花研究概况
        1.1 蝉花来源及考证
        1.2 蝉花化学成分研究
    2 中药多糖免疫调节功能研究进展
        2.1 中药多糖对免疫器官的作用
        2.2 中药多糖对免疫细胞的作用
        2.3 中药多糖对免疫物质的作用
    3 中药多糖对巨噬细胞免疫调节分子机制研究进展
        3.1 TLR2/4介导的信号通路
        3.2 甘露糖受体介导的信号通路
        3.3 Dectin-1介导的信号通路
        3.4 其他受体介导的信号通路
    4 小结
第二章 蝉花多糖JCH-1基本理化性质研究
    1 实验材料
        1.1 原料
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器
    2 实验方法
        2.1 JCH-1总糖含量测定
        2.2 JCH-1蛋白质含量测定
        2.3 JCH-1糖醛酸含量测定
        2.4 JCH-1硫酸基含量测定
        2.5 JCH-1傅里叶红外光谱分析
        2.6 JCH-1紫外光谱扫描
        2.7 JCH-1单糖组成分析
    3 实验结果
        3.1 总糖含量
        3.2 蛋白质含量
        3.3 糖醛酸含量
        3.4 硫酸基含量
        3.5 红外光谱扫描
        3.6 紫外光谱扫描
        3.7 单糖组成
    4 小结与讨论
第三章 蝉花多糖JCH-1对RAW264.7细胞免疫调节作用研究
    1 实验材料
        1.1 实验细胞
        1.2 实验原料
        1.3 实验试剂
        1.4 实验仪器
    2 实验方法
        2.1 实验细胞培养
        2.2 实验分组与给药
        2.3 检测指标及方法
        2.4 JCH-1样品内源性脂多糖干扰排除
        2.5 数据分析与处理
    3 实验结果
        3.1 JCH-1对RAW264.7细胞增殖的影响
        3.2 JCH-1对RAW264.7细胞形态的影响
        3.3 JCH-1对RAW264.7细胞吞噬能力的影响
        3.4 JCH-1对RAW264.7细胞NO分泌能力的影响
        3.5 JCH-1对RAW264.7细胞分泌TNF-α及IL-6能力影响
        3.6 JCH-1内源性脂多糖干扰排除
    4 小结与讨论
第四章 蝉花多糖JCH-1对RAW264.7细胞免疫调节分子机制研究
    1 实验材料
        1.1 实验细胞
        1.2 实验原料
        1.3 主要实验试剂
        1.4 主要实验仪器
    2 实验方法
        2.1 实验细胞培养
        2.2 实验分组与给药
        2.3 检测指标及方法
        2.4 数据分析与处理
    3 实验结果
        3.1 JCH-1促进RAW264.7细胞iNOS、TNF-α及IL-6 mRNA的表达
        3.2 TLR4介导JCH-1对RAW264.7细胞的免疫调节作用
        3.3 NF-κB信号通路介导JCH-1对RAW264.7细胞的免疫调节作用
        3.4 MAPK信号通路介导JCH-1对RAW264.7细胞的免疫调节作用
        3.5 TLR4介导JCH-1激活NF-κB与MAPK信号通路的过程
        3.6 MAPK信号通路介导JCH-1激活NF-κB的过程
        3.7 NF-κB通路抑制剂对JCH-1激活MAPK信号通路无影响
    4 小结与讨论
结语
参考文献
附录Ⅰ
附录Ⅱ
附录Ⅲ
在校期间发表论文情况及参与课题
致谢
附件


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]黑灵芝多糖的免疫调节活性及其作用机制[D]. 余强.南昌大学 2014
[2]银耳多糖和党参多糖及其硫酸化产物的抗病毒和增强免疫活性的研究[D]. 赵晓娜.南京农业大学 2011
[3]硫酸化枸杞多糖和硫酸化当归多糖抗病毒和增强免疫活性的研究[D]. 王君敏.南京农业大学 2011

硕士论文
[1]基于甘露糖受体的黑灵芝多糖免疫调节作用及机制研究[D]. 帅小雪.南昌大学 2015
[2]岩藻多糖硫酸酯的抗肿瘤活性筛选和初步机理研究[D]. 杨柳.山东大学 2012
[3]白术多糖及其硫酸化衍生物的抗病毒和增强免疫活性的比较[D]. 姜瑜.南京农业大学 2011
[4]多糖的分子修饰与抗凝血活性[D]. 贺珍俊.内蒙古大学 2004



本文编号：3729332