中药甘草提取物对UVB损伤皮肤屏障功能的防护作用及机制研究

发布时间：2023-02-11 13:54

　　目的:研究外用甘草乳膏对UVB辐射引起的BALB/C小鼠皮肤光损伤的干预作用及对皮肤角蛋白17(CK-17)、转谷酰胺酶(TGase)的基因和蛋白表达水平影响,探讨甘草乳膏对UVB辐射BALB/C小鼠皮肤屏障损伤的防御作用及对皮肤角蛋白17(CK-17)、转谷酰胺酶(TGase)基因和蛋白表达水平的影响,探讨甘草乳膏对UVB辐射BALB/C小鼠皮肤屏障的保护作用及可能机制,为验证甘草乳膏防护阳毒外袭的有效性及将甘草开发成防护紫外线外用制剂奠定理论基础。方法:将BALB/C小鼠随机分为4组:空白对照组(K)、模型组(M)、基质乳膏组(J)、及甘草乳膏组(H),实验前将背毛剃净并在剃毛处皮肤给予相应处理(J组涂抹基质乳膏,H组涂抹5%甘草乳膏,K组及M组不给药)20分钟后除空白对照组,其余各组分别给予500mJ/cm2的UVB辐射,1次/日,连续30天,肉眼观察各组小鼠皮肤一般形态改变,并拍照及文字描述双重记录;之后,颈椎脱臼处死实验小鼠,手术切取照射部位皮肤组织分为三部分:(1)HE染色法观察皮肤组织形态学改变,(2)用qRT-PCR法检测小鼠皮肤组织中的角蛋白17(CK-17)、转谷酰...

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
符号说明
前言
立题依据
技术路线
实验一 甘草对BALB/C小鼠皮肤的UVB辐射损伤保护作用
    1. 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验试剂
        1.3 实验仪器
    2. 实验方法
        2.1 基质乳膏、甘草乳膏制备:
        2.2 动物分组及模型的建立
        2.3 组织病理学变化
    3. 结果
        3.1 实验组织一般形态学观察
        3.2 组织形态学观察
    4. 小结
    5. 附图
实验二 甘草对UVB诱导小鼠皮肤CK-17和TG的mRNA水平影响
    1. 材料与方法
        1.1 实验动物
        1.2 实验用药
        1.3 主要试剂和仪器
        1.4 实验分组及处理
        1.5 用TaKaRa RNAiso Reagent提取细胞总RNA
        1.6 RNA纯度鉴定
        1.7 cDNA合成
        1.8 逆转录PCR
    2. 统计学分析
    3. 结果
    4. 小结
实验三 Western-bolt检测CK-17及TGase蛋白表达
    1. 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验试剂
        1.3 实验仪器
    2. 实验方法
        2.1 动物处理
        2.2 总蛋白提取
        2.3 SDS-PAGE凝胶电泳液的配置
        2.4 制胶
        2.5 上样及电泳
        2.6 转膜
        2.7 丽春红的染色
        2.8 封闭
        2.9 孵育一抗
        2.10 二抗孵育
        2.11 ECL检测
    3. 统计学分析
    4. 结果
    5. 小结
讨论
    1. 实验讨论
    2. 本课题的创新之处
    3. 不足与展望
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3740508