硫酸软骨素及黄连素诱导小鼠肠菌失调及多系统病变的机理研究
发布时间：2023-03-05 12:03
目的:随着研究的不断深入,肠道菌群对人类健康之间的联系与影响已经获得了科学界的共识,但是由于肠道菌群种类繁多,组成复杂,并且有个体化的差异,所以肠道菌群与人体互相的作用尚有很多未知需要解决。肉食中包含的成分硫酸软骨素作为保健品一直被用于骨关节损伤的辅助治疗,然而有研究称硫酸软骨素做培养基有滋养细菌的作用。根据硫酸软骨素能促进某些肠道细菌过度生长的文献报道,本研究拟采用灌胃硫酸软骨素的方法造成小鼠肠道菌群失调的模型诱导炎症反应甚至炎症性疾病,证实其对身体的间接影响,并且采用抗菌抗炎药物,对肠道菌群失调模型的治疗作用做出分析评估,为找出肠道菌群造成的不利因素和解决问题的方案提供实验依据。方法:通过给小鼠灌胃适量硫酸软骨素造成肠道失调模型,预期小鼠肠道硫酸酯酶分泌细菌与硫酸还原菌增多,硫化氢分泌过量导致肠道损伤。通过16SrRNA测序法分析小鼠肠道菌群组成、丰度和分类,结合测定炎症指标(LPS、TNFα、TLR4、CCL2、TNFR1、iNOS),阿茨海默症指标(Aβ、PS1),缺氧指标(HIF-1α、VEGF、EPO、CYCS),肿瘤标记物指标(Cyclin D1、p21),肠道细菌酶的表...
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文献综述
1.1 肠道微生物简介
1.2 MAMPs的促炎机制
1.3 肠道屏障构成及功能
1.4 肠道细菌及硫酸软骨素
1.4.1 硫酸酯酶分泌菌与硫酸还原菌
1.4.2 硫酸软骨素简介
1.4.3 食物的其他影响
1.5 肥胖与非酒精性脂肪肝
1.6 阿茨海默症
第二章 硫酸软骨素诱导的小鼠肠道菌群失调模型
2.1 实验材料
2.1.1 实验动物来源
2.1.2 实验动物饲料
2.1.3 实验试剂和药品
2.1.4 实验仪器
2.2 实验动物实验环境
2.3 实验动物分组
2.4 实验方法
2.4.1 实验动物造模方法及样本处理
2.4.2 小鼠粪便细菌16S rRNA测序分析
2.5 结果
2.5.1 小鼠粪便中细菌相对丰度
2.5.2 细菌物种丰度聚类分析
2.5.3 特定物种分类树
2.5.4 SSB和SRB相对丰度
2.6 讨论
第三章 硫酸软骨素诱发小鼠类风湿性关节炎与神经炎症AD样病变
3.1 实验材料
3.1.1 实验动物
3.1.2 实验试剂及药品
3.1.3 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 样本处理
3.2.2 酶联免疫反应(ELISA)的操作:
3.2.3 统计学分析
3.3 实验结果
3.3.1 小鼠炎症指标的比较
3.3.2 小鼠大脑炎症指标及AD病变指标
3.4 讨论
第四章 硫酸软骨素诱导不同器官的抗炎/促炎反应
4.1 实验材料
4.1.1 实验动物
4.1.2 实验试剂及药品
4.1.3 实验仪器
4.2 实验方法
4.2.1 样本处理
4.2.2 酶联免疫反应(ELISA)的操作:
4.2.3 统计学方法
4.3 结果
4.4 讨论
第五章 硫酸软骨素诱导的硫酸酯酶分泌和粘液蛋白降解
5.1 实验材料
5.1.1 实验动物
5.1.2 实验动物饲料
5.1.3 实验试剂及药品
5.1.4 实验仪器
5.2 实验动物实验环境
5.3 实验动物分组
5.4 实验方法
5.4.1 实验动物造模方法及样本处理
5.4.2 Slpi免疫组化方法
5.4.2.1 石蜡切片制作方法
5.4.2.2 免疫组化方法
5.4.3 RealTime PCR引物
5.4.4 蛋白质免疫印迹(Western blotting)方法
5.5 结果
5.5.1 SSB与SRB的sulfatase和ATP sulfurylase表达量
5.5.2 Slpi免疫组化结果
5.5.3 MUC1和MUC4的免疫印迹(WB)实验
5.6 讨论
第六章 硫酸软骨素诱导小鼠肿瘤样增生及肿瘤标记物表达上升
6.1 实验材料
6.1.1 实验动物
6.1.2 实验药品与试剂
6.1.3 实验仪器
6.2 实验方法
6.2.1 ELISA实验方法
6.2.2 Westernblotting实验方法
6.2.3 RT-PCR引物
6.2.4 统计学分析
6.3 结果
6.3.1 肿瘤与肿瘤标记物
6.3.2 炎症指标与细胞增生指标
6.4 讨论
第七章 硫酸软骨素诱导脂肪肝样病变
7.1 实验材料
7.1.1 实验动物
7.1.2 实验药品与试剂
7.1.3 实验仪器
7.2 实验方法
7.2.1 油红O染色方法
7.3 结果
7.3.1 小鼠肝脏油红O染色
7.4 讨论
第八章 黄连素与抗生素对肠道菌群失调模型的疗效探究
8.1 实验材料
8.1.1 实验动物
8.1.2 实验动物饲料
8.1.3 实验试剂及药品
8.1.4 实验仪器
8.2 实验方法
8.2.1 小鼠造模与治疗处理与分组
8.2.2 Slpi免疫组化方法
8.2.3 红油O染色方法
8.2.4 小鼠粪便细菌16S rRNA测序分析
8.3 结果
8.3.1 细菌物种丰度聚类分析
8.3.2 肝脏油红O染色
8.3.3 小鼠结肠Slpi免疫组化
8.4 讨论
结语
参考文献
附录
致谢
统计学审核证明
本文编号：3756158
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文献综述
1.1 肠道微生物简介
1.2 MAMPs的促炎机制
1.3 肠道屏障构成及功能
1.4 肠道细菌及硫酸软骨素
1.4.1 硫酸酯酶分泌菌与硫酸还原菌
1.4.2 硫酸软骨素简介
1.4.3 食物的其他影响
1.5 肥胖与非酒精性脂肪肝
1.6 阿茨海默症
第二章 硫酸软骨素诱导的小鼠肠道菌群失调模型
2.1 实验材料
2.1.1 实验动物来源
2.1.2 实验动物饲料
2.1.3 实验试剂和药品
2.1.4 实验仪器
2.2 实验动物实验环境
2.3 实验动物分组
2.4 实验方法
2.4.1 实验动物造模方法及样本处理
2.4.2 小鼠粪便细菌16S rRNA测序分析
2.5 结果
2.5.1 小鼠粪便中细菌相对丰度
2.5.2 细菌物种丰度聚类分析
2.5.3 特定物种分类树
2.5.4 SSB和SRB相对丰度
2.6 讨论
第三章 硫酸软骨素诱发小鼠类风湿性关节炎与神经炎症AD样病变
3.1 实验材料
3.1.1 实验动物
3.1.2 实验试剂及药品
3.1.3 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 样本处理
3.2.2 酶联免疫反应(ELISA)的操作:
3.2.3 统计学分析
3.3 实验结果
3.3.1 小鼠炎症指标的比较
3.3.2 小鼠大脑炎症指标及AD病变指标
3.4 讨论
第四章 硫酸软骨素诱导不同器官的抗炎/促炎反应
4.1 实验材料
4.1.1 实验动物
4.1.2 实验试剂及药品
4.1.3 实验仪器
4.2 实验方法
4.2.1 样本处理
4.2.2 酶联免疫反应(ELISA)的操作:
4.2.3 统计学方法
4.3 结果
4.4 讨论
第五章 硫酸软骨素诱导的硫酸酯酶分泌和粘液蛋白降解
5.1 实验材料
5.1.1 实验动物
5.1.2 实验动物饲料
5.1.3 实验试剂及药品
5.1.4 实验仪器
5.2 实验动物实验环境
5.3 实验动物分组
5.4 实验方法
5.4.1 实验动物造模方法及样本处理
5.4.2 Slpi免疫组化方法
5.4.2.1 石蜡切片制作方法
5.4.2.2 免疫组化方法
5.4.3 RealTime PCR引物
5.4.4 蛋白质免疫印迹(Western blotting)方法
5.5 结果
5.5.1 SSB与SRB的sulfatase和ATP sulfurylase表达量
5.5.2 Slpi免疫组化结果
5.5.3 MUC1和MUC4的免疫印迹(WB)实验
5.6 讨论
第六章 硫酸软骨素诱导小鼠肿瘤样增生及肿瘤标记物表达上升
6.1 实验材料
6.1.1 实验动物
6.1.2 实验药品与试剂
6.1.3 实验仪器
6.2 实验方法
6.2.1 ELISA实验方法
6.2.2 Westernblotting实验方法
6.2.3 RT-PCR引物
6.2.4 统计学分析
6.3 结果
6.3.1 肿瘤与肿瘤标记物
6.3.2 炎症指标与细胞增生指标
6.4 讨论
第七章 硫酸软骨素诱导脂肪肝样病变
7.1 实验材料
7.1.1 实验动物
7.1.2 实验药品与试剂
7.1.3 实验仪器
7.2 实验方法
7.2.1 油红O染色方法
7.3 结果
7.3.1 小鼠肝脏油红O染色
7.4 讨论
第八章 黄连素与抗生素对肠道菌群失调模型的疗效探究
8.1 实验材料
8.1.1 实验动物
8.1.2 实验动物饲料
8.1.3 实验试剂及药品
8.1.4 实验仪器
8.2 实验方法
8.2.1 小鼠造模与治疗处理与分组
8.2.2 Slpi免疫组化方法
8.2.3 红油O染色方法
8.2.4 小鼠粪便细菌16S rRNA测序分析
8.3 结果
8.3.1 细菌物种丰度聚类分析
8.3.2 肝脏油红O染色
8.3.3 小鼠结肠Slpi免疫组化
8.4 讨论
结语
参考文献
附录
致谢
统计学审核证明
本文编号：3756158
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/3756158.html
最近更新
教材专著
