白及醇提物对PM 2.5 诱导J774a.1细胞损伤的保护作用
发布时间:2023-03-05 13:54
目的:研究白及醇提物对PM2.5所致J774a.1细胞损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用MTS检测不同浓度PM2.5(0、25、50、100、200、400μg/mL)和不同浓度白及醇提物(0、1.25、2.5、5、10、20μg/mL)对J774a.1细胞活力的影响,确定合适的造模浓度和给药浓度。以PM2.5诱导J774a.1细胞损伤,将细胞分为空白对照组、模型组及白及醇提物组物低、中、高浓度组,采用DCFH-DA荧光探针检测活性氧水平;NO试剂盒检测NO的表达量;实时荧光定量PCR法测定促炎介质iNOS、IL-18 mRNA水平;流式细胞术检测炎症因子TNF-α、IL-6水平;Western blot检测TLR4、COX2蛋白表达及NF-κBp65蛋白磷酸化水平。结果:PM2.5浓度为200μg/mL,白及醇提物浓度为5~20μg/mL时,未见明显细胞毒性。与模型组比较,各浓度白及醇提物均可显著降低细胞上清中NO、IL-6、TNF-α释放量及细胞内活性氧水平(P<0.01),5、...
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
1 材料与仪器
1.1 细胞株
1.2 药物与试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 白及醇提物的制备
2.2 PM2.5的采集与制备
2.3 细胞培养及传代
2.4 MTS检测细胞增殖
2.5 细胞内活性氧(ROS)水平检测
2.6 上清中NO含量检测
2.7 iNOS、IL-18 mRNA表达的检测
2.8 炎性细胞因子检测
2.9 Western blot检测相关蛋白表达
2.10 统计学处理
3 结果
3.1 MTS检测PM2.5和白及醇提物对J774a.1细胞增殖的影响
3.2 白及醇提物对PM2.5损伤J774a.1细胞内活性氧(ROS)水平的影响
3.3 白及醇提物对PM2.5损伤J774a.1细胞NO、IL-6、TNF-α释放量的影响
3.4 白及醇提物对PM2.5损伤J774a.1细胞iNOS、IL-18mRNA表达的影响
3.5 白及醇提物对PM2.5损伤J774a.1细胞TLR4/NF-κB通路相关蛋白表达的影响
4 讨论
本文编号:3756316
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1 材料与仪器
1.1 细胞株
1.2 药物与试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 白及醇提物的制备
2.2 PM2.5的采集与制备
2.3 细胞培养及传代
2.4 MTS检测细胞增殖
2.5 细胞内活性氧(ROS)水平检测
2.6 上清中NO含量检测
2.7 iNOS、IL-18 mRNA表达的检测
2.8 炎性细胞因子检测
2.9 Western blot检测相关蛋白表达
2.10 统计学处理
3 结果
3.1 MTS检测PM2.5和白及醇提物对J774a.1细胞增殖的影响
3.2 白及醇提物对PM2.5损伤J774a.1细胞内活性氧(ROS)水平的影响
3.3 白及醇提物对PM2.5损伤J774a.1细胞NO、IL-6、TNF-α释放量的影响
3.4 白及醇提物对PM2.5损伤J774a.1细胞iNOS、IL-18mRNA表达的影响
3.5 白及醇提物对PM2.5损伤J774a.1细胞TLR4/NF-κB通路相关蛋白表达的影响
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本文编号:3756316
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