基于引经理论探讨麝香促进骨髓间充质干细胞迁移的信号通路研究

发布时间：2023-03-05 16:39

　　目的:通过麝香含药血清干预骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs),拟从信号通路入手进行研究,探讨信号通路与干细胞迁移学说及中医引经理论的相关性,为研究引经药提供了新思路,为其迁移机制提供理论依据。方法:通过给大鼠灌服高、中、低剂量的麝香并制备不同浓度含药血清,以灌服等体积生理盐水制备的血清作为空白对照组。采用贴壁筛选法体外培养大鼠BMSCs,培养至第三代,用流式细胞仪检测细胞表面抗原,经过成骨成脂诱导鉴定认为培养BMSCs成功后,利用制备的不同浓度麝香含药血清的5%浓度含药血清干预第三代BMSCs,利用MTT法检测BMSCs增殖情况,成骨诱导后进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)定性、定量检测,I-型胶原免疫荧光染色,测定钙化结节数。通过加入不同信号通路阻断剂利用Transwell小室检测BMSCs细胞迁移率变化,比较不同时间段各组间、组内差异,进行统计学分析,从而探讨不同浓度麝香对大鼠BMSCs增殖、成骨分化等的影响,同时探讨不同浓度麝香介导信号通路对BMSCs迁移影响。结果:采用全骨髓贴壁法分离培养的大鼠...

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词表
前言
一、立题依据
    1、研究背景
    2、研究内容
    3、研究意义
二、实验研究
    技术路线图
    1、实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验药物
        1.3 实验试剂
        1.4 实验设备
        1.5 实验主要试剂配备
    2、实验方法
        2.1 实验动物分组
        2.2 实验动物给药
        2.3 含药血清制备
        2.4 体外培养骨髓间充质干细胞
        2.5 骨髓间充质干细胞的鉴定
        2.6 含药血清对BMSCs增殖、分化影响
        2.7 不同浓度麝香对BMSCs迁移影响
        2.8 信号通路阻断剂对BMSCs迁移影响
        2.9 统计学分析
    3、实验结果
        3.1 BMSCs形态学特点
        3.2 细胞表型鉴定
        3.3 BMSCs成骨、成脂诱导分化结果
        3.4 含药血清对BMSCs增殖影响结果
        3.5 含药血清对BMSCs成骨诱导分化结果
        3.6 不同浓度麝香对BMSCs迁移影响
        3.7 含药血清在信号通路阻断剂干预下对BMSCs迁移影响
三、分析与讨论
    1、BMSCs在骨科疾病中的应用价值
    2、MAPK/ERK1/2、PKC、PI3K/AKT信号通路与BMSCs的相关研究
    3、麝香促外源性BMSCs迁移机制初探
    4、中医引经理论探讨
四、结语
    1、结论
    2、存在问题与展望
        2.1 创新点
        2.2 存在问题
        2.3 展望
参考文献
综述
    参考文献
致谢
科研课题及学术论文
    1、科研课题
    2、参加学术会议交流
    3、获奖情况
    4、论文发表
附录
    1、实验动物证明
    2、实验图片



本文编号：3756553