葆菁口服液对黑素合成及黑素小体转运的影响及机制

发布时间：2023-03-21 19:52

　　实验目的本课题运用血清药理学方法,观察葆菁口服液含药血清对体外培养人正常黑素细胞体系中黑素合成,及其对黑素细胞与角质形成细胞共培养体系中黑素小体转运的影响,并探讨其作用机制,为葆菁口服液改善黄褐斑症状提供理论依据。实验方法血清药理学方法制备中药含药血清。建立人正常黑素细胞体外培养体系,分别采用MTT比色法、酪氨酸酶多速率氧化法、NaOH裂解法测定黑素细胞增殖、酪氨酸酶活性、黑素含量,RT-PCR测定酪氨酸酶mRNA表达量;建立体外黑素细胞与角质形成细胞共培养体系,pull-down法检测黑素细胞RhoA及Rac1蛋白的表达情况、应用流式细胞术检测黑素小体转运的情况。以维生素C作为对照组。应用SPSS16.0软件对实验数据进行统计学分析。实验结果1MTT法测定黑素细胞增殖,与生理盐水组相比较,葆菁口服液组、维生素C组对黑素细胞的增殖的影响无明显差异,组间差异无统计学意义(P>0.05)。NaOH裂解法测定黑素含量,与生理盐水组比较,葆菁口服液、维生素C含药血清可降低黑素合成量,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。多巴氧化法对酪氨酸酶活性进行测定,与生理盐水组比较,葆菁口服...

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
第一章 理论研究
    1. 中医学对黄褐斑的认识
        1.1 黄褐斑病名的历史沿革
        1.2 黄褐斑的病因
        1.3 黄褐斑的病机
        1.4 黄褐斑的中医治疗
    2. 西医对黄褐斑的认识
        2.1 西医对黄褐斑病因及发病机制的研究
        2.2 西医对黄褐斑治疗方法的研究
    3. 当归芍药散治疗黄褐斑的研究
        3.1 当归芍药散治疗黄褐斑的临床研究
        3.2 当归芍药散治疗黄褐斑的基础研究
        3.3 当归芍药散所涉及单味中药的研究
第二章 实验研究
    第一部分 葆菁口服液含药血清对黑素合成的影响
        1 实验材料
            1.1 实验动物
            1.2 药物和试剂
            1.3 主要仪器
        2 实验方法
            2.1 中药含药血清的制备
            2.2 黑素细胞的培养
            2.3 细胞含药血清处理及数据测定
        3 统计学处理
        4 结果
            4.1 黑素细胞鉴定
            4.2 葆菁口服液含药血清对黑素细胞增殖的影响
            4.3 葆菁口服液含药血清对黑素含量的影响
            4.4 葆菁口服液含药血清对TYR活性及TYRmRNA表达的影响
    第二部分 葆菁口服液含药血清对黑素转运的影响
        1 实验材料
            1.1 实验试剂
            1.2 实验仪器
        2 实验方法
            2.1 含药血清的制备、细胞原代培养、黑素细胞培养
            2.2 角质形成细胞培养
            2.3 角质形成细胞的鉴定
            2.4 显微镜下观察黑素细胞树突生成的情况
            2.5 Pull-down法检黑素细胞RhoA和Rac1蛋白的表达
            2.6 流式细胞术检测共培养细胞体系中黑素转运的情况
        3 统计
        4 结果
            4.1 角质形成细胞鉴定
            4.2 葆菁口服液对黑素细胞形态的影响
            4.3 葆菁口服液含药血清对RhoA、Rac1蛋白表达的影响
            4.4 葆菁口服液含药血清对黑素转运的影响
第三章 讨论
    1. 导师对黄褐斑的病机认识及特色治疗
        1.1 整体观念、注重肝脾
        1.2 肝脾同治、气血同调
    2. 葆菁口服液组方特色
        2.1 配伍意义
        2.2 复方特色
    3. 研究结果分析
        3.1 葆菁口服液含药血清对黑素细胞增殖、黑素合成、酪氨酸酶活性及其mRNA表达的影响
        3.2 葆菁口服液含药血清对树突形态、RhoA、Rac1蛋白表达及黑素小体转运的影响
    4. 不足与展望
参考文献
附录
攻读硕士学位期间取得的学术成果
致谢



本文编号：3767191