参麦注射液原料红参炮制工艺优化及体外活性研究

发布时间：2023-03-31 18:33

　　目的:建立一套稳定的红参炮制工艺,为参麦注射液提供优质稳定的红参原料。方法:1.红参的炮制工艺研究(1)正交试验法考察困参浸润、蒸制时间、干燥温度、干燥时间等因素,以困参浸润效果、总皂苷含量为指标,确定红参炮制工艺。(2)高效液相色谱法比较自制红参和市售红参Rg1、Re、Rb1单体皂苷的含量。(3)采用Bradford法比较红参蛋白含量。2.参麦注射液原料药红参对心肌细胞氧化损伤的保护作用过氧化氢(H₂O₂)诱导H9c2大鼠心肌细胞建立体外心肌细胞氧化应激损伤模型;MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测细胞因子LDH释放、SOD活性和MDA含量;流式细胞术检测ROS、细胞凋亡;Western Blot法检测细胞凋亡相关蛋白表达。结果:1.红参炮制工艺为困参3d,润参20min,蒸制时间3h;烘干温度60℃;烘干时间10h。2.炮制后的红参与市售红参对比,皂苷含量稳定均一,且蛋白质的含量相对较低。3.与Control组比较,H₂O₂能够明显降低细胞存活率,红参有效成分预处理后,心肌细胞存活率显著提高,减轻...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
引言
文献综述
第一章 参麦注射液原料红参炮制工艺研究
    1 仪器与试剂
        1.1 实验药材
        1.2 实验仪器
    2 实验方法
        2.1 红参加工前处理对外在质量的影响研究
        2.2 紫外分光光度计测总皂苷含量
        2.3 红参炮制方法的优化
        2.4 红参理化性质测定
        2.5 高效液相法测单体皂苷含量
        2.6 炮制红参与市售红参蛋白含量比较
    3 实验结果
        3.1 红参加工前处理对外在质量的影响研究
        3.2 人参总皂苷含量测定
        3.3 红参炮制工艺
        3.4 红参的水分、总灰分、水浸物、醇浸物含量测定
        3.5 高效液相法比较红参单体皂苷含量
        3.6 炮制红参与市售红参蛋白含量比较
    4 讨论
    5 小结
第二章 红参的体外活性研究
    1 仪器与试剂
        1.1 实验材料
        1.2 实验仪器
        1.3 实验试剂及配置
    2 实验方法
        2.1 大鼠心肌细胞H9c2 的培养技术和方法
        2.2 MTT法检测细胞活力
        2.3 试剂盒检测LDH释放
        2.4 试剂盒检测SOD活性
        2.5 试剂盒检测MDA含量
        2.6 流式细胞仪检测细胞内ROS
        2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡的影响
        2.8 Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白
        2.9 统计学分析
    3 实验结果
        3.1 建立H₂O₂诱导的大鼠心肌细胞损伤模型
        3.2 红参对H₂O₂诱导的大鼠心肌细胞损伤的影响
        3.3 红参总提物对H₂O₂诱导的H9c2 细胞总SOD活性和MDA含量的影响
        3.4 红参总提物对H₂O₂诱导的H9c2 细胞ROS水平的影响
        3.5 红参总提物对H₂O₂ 诱导的H9c2 细胞凋亡率的影响
        3.6 红参总提物H₂O₂诱导的H9c2 细胞中凋亡相关蛋白表达的影响
    4 讨论
    5 小结
结论
本文创新点
参考文献
附录
致谢
在学期间主要研究成果
个人简介



本文编号：3775585