三物白散干预恶性腹水研究

发布时间：2023-04-11 00:56

　　【目的】本研究选择肝癌H22恶性腹水模型为研究对象,观察三物白散对小鼠恶性腹水中H22细胞的生存率、细胞凋亡、细胞周期、Bcl-2蛋白表达情况的影响,从而观察三物白散干预小鼠肝癌H22细胞恶性腹水的效果,并初步探讨其作用机制。【方法】1.H22腹水瘤小鼠模型的建立:于小鼠的右下腹部腹腔注射0.1mL肝癌H22腹水瘤细胞悬液(含H22腹水瘤细胞1×10⁶个),观察小鼠的一般情况、体重增长情况、腹部增大情况,当腹部明显变大时,实验者用手指轻轻晃动小鼠腹部,能够感觉的细微波动感即为造模成功。2.三物白散干预恶性腹水研究:将造模成功的60只KM小鼠在造模48h后,随机分为5个组分别为模型组、阳性组、三物白散高剂量组、三物白散中剂量组、三物白散低剂量组,每组12只。分组后开始药物干预,连续用药干预7天,末次给药之后称取体重,用随机麻醉处死每组小鼠半数(每组6只),无菌条件下开腹取腹水,测量腹水量及用台盼蓝计数方法测量H22肝癌细胞数量。绘制小鼠体重变化曲线、腹水形成箱状图,计算H22肝癌细胞生存率。每组余下的6只小鼠继续饲养直至死亡,记录生存期并绘制生存期箱状图。3.三物白...

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
ABSTRACT
缩略词表
引言
实验一 H22腹水瘤小鼠模型的建立
    1.实验材料
        1.1 细胞
        1.2 实验动物
        1.3 实验药品及主要试剂
        1.4 主要试剂配置方法
        1.5 实验主要仪器
    2.实验方法
        2.1 细胞培养
        2.2 分组方法
        2.3 造模方法
        2.4 观察指标与方法
    3.统计方法
    4.结果
        4.1 一般情况观察
        4.2 小鼠的腹水生成情况
        4.3 小鼠体重变化曲线
    5.小结
实验二 三物白散干预恶性腹水研究
    1.实验材料
        1.1 细胞
        1.2 实验动物
        1.3 实验药品及主要试剂
        1.4 主要试剂配置方法
        1.5 药液制备与剂量计算
        1.6 主要实验仪器
        1.7 主要耗材
    2.实验方法
        2.1 造模方法
        2.2 分组方法与给药方法
        2.3 观察指标与方法
    3.统计方法
    4.结果
        4.1 一般情况观察
        4.2 恶性腹水形成情况观察
        4.3 小鼠体重变化情况
        4.4 小鼠生存期观察
        4.5 台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞生存率
实验三 三物白散干预恶性腹水与细胞凋亡、周期及BCL-2蛋白表达的关系
    1.实验材料
        1.1 细胞
        1.2 实验动物
        1.3 实验药品及主要试剂
        1.4 主要抗体
        1.5 主要试剂的配置方法
        1.6 药液制备与剂量计算
        1.7 主要实验仪器
        1.8 主要耗材
    2.实验方法
        2.1 造模方法
        2.2 分组方法与给药方法
        2.3 FCM检测细胞周期
        2.4 FCM检测细胞凋亡
        2.5 Western Blot检测H22细胞中Bcl-2蛋白表达
    3.统计方法
    4.结果
        4.1 FCM检测腹水肿瘤细胞周期
        4.2 FCM检测腹水肿瘤细胞凋亡
        4.3 WB检测腹水瘤细胞bcl-2蛋白
讨论
    1.关于恶性腹水模型
    2.关于阳性干预药物的选择
    3.三物白散干预恶性腹水的学理
        3.1 恶性腹水的中医认识
        3.2 三物白散的功效
        3.3 三物白散干预恶性腹水的学理
    4.三物白散干预恶性腹水的有效性
        4.1 三物白散灌胃H22小鼠可以抑制其恶性腹水的产生并且可以改善其生存质量
        4.2 三物白散灌胃荷H22小鼠可以延长其生存期
        4.3 三物白散可以降低小鼠腹水中H22细胞的生存率
    5.三物白散抑制H22荷瘤小鼠恶性腹水生成的机制
        5.1 三物白散对肝癌H22细胞周期的影响
        5.2 三物白散诱导肝癌H22细胞凋亡
        5.3 三物白散调控H22细胞中Bcl-2的表达
结论
创新性与特色
问题与展望
致谢
参考文献
附件一：综述
    参考文献
附件二：在校期间公开发表的学术论文、专著及科研成果



本文编号：3789036