基于JAK1/STAT6通路探讨安肠愈疡汤对HT-29细胞炎症模型的影响及机制研究

发布时间：2023-05-10 19:38

　　[目的]观察安肠愈疡汤对脂多糖(LPS)诱导的HT-29细胞炎症模型蛋白酪氨酸激酶1(JAK1)/信号转导和转录活化因子6(STAT6)通路的影响,并探讨其作用机制。[方法]实验分为6组,空白组、模型组、安肠愈疡汤低、中、高浓度组(0.1、1、10 mg/mL)、美沙拉秦组(1 mg/L),空白组不做任何处理,模型组给予LPS诱导,其余各组在LPS诱导后分别给予相应药物干预。干预24 h后分别应用酶联免疫吸附(ELISA)法、免疫荧光技术检测各组白细胞介素(IL)-13、肠三叶因子3(TFF3)的表达,分别应用实时荧光定量聚合酶链反应(Q-RT-PCR)技术、蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测各组IL-13、JAK1、STAT6、TFF3 mRNA及蛋白的表达。[结果]与空白组比较,模型组IL-8水平上调(P<0.01),IL-13水平下调(P<0.01),提示炎症模型构建成功,模型组JAK1、STAT6、TFF3的水平也不同程度降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各用药组IL-13、TFF3分泌水平增加、荧光强度增强(P<0.0...

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【文章目录】：
1 材料
    1.1 细胞
    1.2 药物制备
    1.3 试剂
    1.4 仪器
2 方法
    2.1 HT-29细胞炎症模型建立
    2.2 安肠愈疡汤浓度的筛选
    2.3 分组及干预
    2.4 应用ELISA法检测各组IL-13、TFF3的分泌水平
    2.5 应用免疫荧光检测各组IL-13、TFF3的荧光强度
    2.6 Q-RT-PCR检测各组IL-13、JAK1、STAT6、TFF3mRNA的表达
    2.7 应用蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测IL-13、JAK1、STAT6、TFF3蛋白的表达
    2.8 统计学方法
3 结果
    3.1 HT-29细胞炎症模型的建立
    3.2 不同浓度安肠愈疡汤对HT-29细胞活力的影响
    3.3 安肠愈疡汤对LPS诱导的HT-29细胞IL-13、TFF3分泌水平的影响
    3.4安肠愈疡汤对LPS诱导HT-29细胞IL-13、TFF3荧光强度的影响
    3.5 安肠愈疡汤对LPS诱导的HT-29细胞IL-13、JAK1、STAT6、TFF3 mRNA和蛋白表达的影响
4 讨论



本文编号：3813380