牛至叶提取物的体外降糖活性及其作用机制研究

发布时间：2023-05-13 05:30

　　糖尿病是一种全球性的慢性疾病,随着生活水平的逐渐提高,糖尿病的发病率也逐渐上升。目前治疗糖尿病的药物,临床上主要有双胍类,磺酰脲类,α-糖苷酶抑制剂类等类型,但其均会产生一系列不良反应。目前尚无根治糖尿病的药物及方法,所以寻找低毒,高效的预防和治疗糖尿病的功能性食品或药物成为糖尿病研究的重要任务。牛至(Origanum vulgareL.)是一种药食两用的的传统中药,以全草入药。传统中医药理论认为其具有“清暑解表,利水消肿”的功效。牛至中化学成分主要有机酚酸、牛至苷类、黄酮、三萜与留醇等类代谢物,具有抗菌,抗氧化、抗黑色素沉积、抗癌等多种药理作用。本论文在体外活性筛选的指导下,用高相液相色谱和飞行时间质谱仪联用(HPLC-ESI-QTOF-MS)分析比较鉴定了不同采收期牛至叶提取物中的生物活性和主要化学成分,并进一步在HepG2细胞和HepG2-GFP-CYP2E1(CYP2E1过表达的HepG2细胞,E47细胞)细胞模型上,深入探讨了 10月份采收的牛至叶提取物的降糖活性及其作用机制,具体内容主要包括以下3个方面:1.采摘不同采收期(4月份-10月份)的牛至叶,晾干,粉碎过筛。采用乙...

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 糖尿病的概况
        1.1.1 糖尿病的流行及危害
        1.1.2 糖尿病的发病机制
        1.1.3 糖尿病药物的研究现状
    1.2 牛至的研究现状
        1.2.1 牛至的化学成分研究现状
        1.2.2 牛至的药理作用研究现状
    1.3 本论文的研究意义,目的和内容
        1.3.1 本论文的研究意义和目的
        1.3.2 本论文的研究内容
第2章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 细胞
        2.1.3 植物来源
    2.2 仪器设备
    2.3 溶液的配制
        2.3.1 DMEM培养基
        2.3.2 PBS溶液的配制
        2.3.3 细胞冻存液
        2.3.4 DEPC水的配制
        2.3.5 TAE电泳缓冲液
        2.3.6 过硫酸铵(APS)
        2.3.7 丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺
        2.3.8 SDS-PAGE电泳缓冲液
        2.3.9 电转缓冲液
        2.3.10 TBS缓冲液
        2.3.11 TBST缓冲溶液
        2.3.12 封闭液
    2.4 实验方法
        2.4.1 HepG2和E47细胞的培养
        2.4.2 牛至叶提取物的制备
        2.4.3 牛至叶提取物对细胞的增殖/毒性作用
        2.4.4 牛至叶提取物体外降糖活性研究
        2.4.5 牛至叶提取物体外抗氧化活性研究
        2.4.6 牛至叶提取物的主要成分分离与鉴定
        2.4.7 牛至叶提取物中总酚含量
        2.4.8 牛至叶提取物中总黄酮含量
        2.4.9 牛至叶提取物对氧化应激损伤的保护作用
        2.4.10 双荧光报告基因实验
        2.4.11 总RNA的提取和qRT-PCR检测
        2.4.12 总蛋白的提取及其检测
        2.4.13 数理统计
第3章 实验结果
    3.1 不同采收期牛至叶提取物活性及其化学成分比较
        3.1.1 不同采收期牛至叶提取物的细胞增殖/毒性作用
        3.1.2 不同采收期牛至叶提取物的体外降糖活性
        3.1.3 不同采收期牛至叶提取物体外抗氧化活性比较
        3.1.4 不同采收期牛至叶提取物主要化学成分及其总酚和总黄酮含量比较
    3.2 牛至叶提取物降糖活性研究
        3.2.1 牛至叶提取物对葡萄糖摄取的影响
        3.2.2 牛至叶提取物对糖基化的影响
        3.2.3 牛至叶提取物保护氧化应激损伤
    3.3 牛至叶提取物降糖作用机制研究
        3.3.1 牛至叶提取物对糖异生通路的影响
        3.3.2 牛至叶提取物对脂代谢通路的影响
        3.3.3 牛至叶提取物对氧化应激通路的影响
第4章 讨论
参考文献
附录
致谢



本文编号：3815401