14-3-3η介导的辣椒素抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的机制研究

发布时间：2023-05-14 02:33

　　目的:辣椒素(Cap)是从辣椒植物中提取,具有刺激性气味的生物碱。近来研究已报道了心血管疾病中辣椒素的保护作用。线粒体被认为是细胞凋亡的控制中心,在凋亡信号通路中起着非常重要的作用。14-3-3η可能作为心肌细胞I/R损伤的保护因子,参与稳定线粒体膜电位,防止线粒体通透性转换孔(mPTP)的开放,从而最终减少细胞凋亡。本实验构建细胞水平的A/R模型,旨在确定辣椒素预处理对抗A/R损伤保护心肌细胞的作用是否涉及线粒体凋亡通路,并进一步探讨辣椒素保护心肌细胞的可能机制。方法:在本研究采用H9c2心肌细胞株,建立急性心肌A/R损伤模型,将状态良好的H9c2心肌细胞随机分为6组:(1)正常对照组(Control);(2)缺氧/复氧组(A/R);(3)10μM辣椒素预处理组(Cap+A/R);(4)10μM辣椒素+AD-14-3-3ηRNAi预处理组(Cap+AD-14-3-3ηRNAi+A/R);(5)10μM辣椒素+ADscrRNAi预处理组(Cap+ADscrRNAi+A/R);(6)10μM辣椒素+2μM ABT-737预处理组(Cap+ABT-737+A/R)。MTS比色法检测细胞存活...

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩写及全称和中文对照表
第1章引言
第2章 材料与方法
    2.1 主要材料及试剂
    2.2 实验主要仪器和设备
    2.3 实验方法
        2.3.1 重组腺病毒表达载体
        2.3.2 H9c2心肌细胞的培养
        2.3.3 腺病毒感染H9c2细胞
        2.3.4 H9c2心肌细胞体外缺氧复氧（A/R）损伤模型的构建
        2.3.5 实验分组及处理
        2.3.6 MTS法检测H9c2心肌细胞存活率
        2.3.7 测定乳酸脱氢酶（LDH）的活性
        2.3.8 Western blotting（免疫印迹）法检测H9c2心肌细胞中蛋白的表达
        3.9 检测线粒体通透性转换孔（mPTP）的开放程度
        2.3.10 测定Caspase-3 的活力
        2.3.12 Annexin V-FITC和PI双染色法检测H9c2心肌细胞凋亡的程度
    2.4 数据处理
第3章 结果
    3.1 辣椒素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后细胞存活率和乳酸脱氢酶的影响
    3.2 辣椒素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后的 1433η 蛋白表达的影响20
    3.3 辣椒素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后的细胞活性氧ROS水平的影响
    3.4 辣椒素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后的mPTP开放的影响
    3.5 辣椒素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后Caspase-3 活力的影响
    3.6 辣椒素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后细胞凋亡水平的影响
    3.7 辣椒素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后Bcl-2 和Bax蛋白表达的影响
第4章 讨论
第5章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
致谢
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3817007