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白及多糖对乙醇型胃黏膜损伤保护作用的研究

发布时间:2023-05-21 22:24
  近年来,胃病发病率逐年升高,而许多胃病都与胃黏膜损伤有关。大量或长期酗酒是引起胃肠道疾病的主要原因之一,因此,建立乙醇型胃黏膜损伤模型很有意义。植物多糖毒副作用小,具有保护胃黏膜的功效。白及多糖(BSP)是植物多糖的一种,已有研究表明,白及多糖对小鼠醋酸型和应激型胃溃疡具有良好的保护和治疗作用,但对于乙醇型胃黏膜损伤模型的研究较少,其作用机制也有待进一步的研究。且BSP在细胞上的作用也未见报道。本实验室前期已经对白及资源现状进行了分析,并对白及多糖的结构做了鉴定。在此基础上,本课题从体内、体外两方面建立乙醇型胃黏膜损伤模型,研究白及多糖对胃黏膜的保护作用,并对机制做进一步研究。本研究以期开发白及多糖作为保健性药品,并在饮酒的人群中得以应用提供了实验依据。主要研究内容及结果如下:1.白及多糖的制取采用水提醇沉的方法提取白及粗多糖,经过脱脂、反复冻融法除蛋白、透析得到白及粗多糖。进一步经DEAE-52纤维素柱层析、葡聚糖凝胶G-150柱层析分离纯化,筛选超纯水作为洗脱剂,得到分子量均一的中性多糖,苯酚-浓硫酸法检测BSP含量为92.7%。2.BSP对乙醇诱导的人胃黏膜上皮细胞株(GES-1...

【文章页数】:72 页

【学位级别】:硕士

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摘要
Abstract
缩略词汇表
第1章 绪论
    1.1 白及的研究概况
        1.1.1 白及简介
        1.1.2 白及的化学成分
        1.1.3 白及的药理作用
    1.2 白及多糖的研究进展
        1.2.1 白及多糖的提取
        1.2.2 白及多糖除杂
        1.2.3 白及多糖纯化
        1.2.4 白及多糖的药理作用
    1.3 胃黏膜损伤模型的建立
    1.4 胃黏膜损伤与氧化应激
    1.5 多糖保护胃黏膜损伤的研究
    1.6 研究目的及意义
第2章 白及多糖的提取、分离及纯化
    2.1 材料与试剂
        2.1.1 材料
        2.1.2 试剂
        2.1.3 仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 白及多糖的提取
        2.2.2 白及粗多糖的分离、纯化
        2.2.3 白及多糖含量测定
    2.3 结果与分析
        2.3.1 白及粗多糖提取得率
        2.3.2 白及多糖柱层析纯化结果
        2.3.3 白及多糖含量测定
    2.4 讨论
第3章 白及多糖对乙醇诱导的人胃黏膜上皮细胞株(GES-1)的保护作用研究
    3.1 材料与试剂
        3.1.1 材料
        3.1.2 试剂
        3.1.3 仪器
        3.1.4 试剂配制
    3.2 实验方法
        3.2.1 乙醇对GES-1细胞损伤模型的建立
        3.2.2 白及多糖对GES-1细胞毒性的影响
        3.2.3 检测白及多糖对GES-1细胞的增殖作用
        3.2.4 白及多糖对GES-1细胞保护作用的研究
        3.2.5 数据处理
    3.3 结果与分析
        3.3.1 乙醇对GES-1细胞损伤模型的建立
        3.3.2 LDH检测BSP对细胞毒性的结果
        3.3.3 白及多糖对GES-1细胞增殖作用的影响
        3.3.4 白及多糖对细胞保护作用的研究
    3.4 讨论
第4章 白及多糖对小鼠急性胃黏膜损伤的保护作用研究
    4.1 材料与试剂
        4.1.1 材料
        4.1.2 实验动物
        4.1.3 试剂
        4.1.4 仪器
    4.2 实验方法
        4.2.1 乙醇型急性胃黏膜损伤模型的建立
        4.2.2 胃黏膜损伤指数的测定
        4.2.3 病理学检查(胃组织H&E染色)
        4.2.4 BCA法测定样本蛋白含量
        4.2.5 胃蛋白酶含量测定
        4.2.6 白及多糖对胃黏膜保护作用的抗氧化能力测定
        4.2.7 白及多糖对乙醇型胃黏膜损伤小鼠胃黏膜细胞凋亡的影响
        4.2.8 小鼠胃组织中PGC-1α、HO-1、Bcl-2、Bax、NF-κB mRNA的表达
    4.3 结果与分析
        4.3.1 白及多糖对小鼠乙醇性胃黏膜损伤保护作用的形态学观察
        4.3.2 白及多糖对小鼠胃黏膜损伤指数的影响
        4.3.3 H&E染色结果
        4.3.4 胃黏膜蛋白含量测定结果
        4.3.5 胃蛋白酶含量测定结果
        4.3.6 氧化指标测定
        4.3.7 Tunel染色测定胃黏膜细胞凋亡结果
        4.3.8 小鼠胃组织中PGC-1α、HO-1、Bcl-2、Bax、NF-κB mRNA的表达结果
    4.4 讨论
第5章 实验结论
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间研究成果



本文编号:3821536

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