β-榄香烯对人胃癌细胞的影响及其部分机制

发布时间：2023-06-04 02:05

　　胃癌是一种常见的恶性肿瘤,尤其在我国其发病率和死亡率位居全国第二[1]。胃癌临床治疗的模式以早期癌症的手术切除为主。但大量的胃癌患者被确诊时即进入了进展期。对于这些患者,通常采取全身化疗、放疗的方式治疗,但存在着严重的不良反应,且生存率低的问题。胃癌侵袭、转移是胃癌患者治愈率差主要原因。肿瘤转移的过程十分复杂,主要包括肿瘤细胞脱离原发部位,逐步浸润周边组织以及进入血液循环系统和淋巴循环系统,通过循环转移到远处靶器官和组织,形成转移灶。胃癌的侵袭、转移严重威胁着人类的健康,因此,探究抗胃癌的分子机制以及寻找天然的治疗胃癌的有效药物显得尤为迫切。榄香烯是从中医草本姜黄属莪术的根茎中分离出的化合物,作为化疗辅助药物广泛用于各种实体肿瘤的治疗。榄香烯抗肿瘤机制十分复杂,包括直接抑制杀伤肿瘤细胞、诱导肿瘤细胞凋亡分化、抗肿瘤细胞浸润和转移等。β-榄香烯是榄香烯的主要活性成分,作为一种新型的抗肿瘤单体化合物也已显现出其独特优势。β-榄香烯可以调控多条信号通路,参与多种激酶的磷酸化过程,如Ras/MARK/ERK和PI3K/Akt/m TOR通路。研究已证实了β-榄香烯能诱导肿瘤细胞凋亡和机体保护性...

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前言
实验
    实验一 β-榄香烯对人胃癌细胞的增殖、凋亡和周期的影响
        1 实验材料
            1.1 实验用细胞株
            1.2 实验药物
            1.3 实验试剂
            1.4 主要试剂配制
        2 仪器与设备
        3 实验方法
            3.1 细胞培养
                3.1.1 细胞复苏
                3.1.2 细胞换液
                3.1.3 细胞传代
                3.1.4 细胞冻存
            3.2 MTS法检测β-榄香烯对细胞的增殖抑制作用
            3.3 检测细胞凋亡
                3.3.1 Hoechst染色检测细胞凋亡
                3.3.2 流式细胞术检测细胞凋亡
            3.4 流式细胞术检测细胞周期
            3.5 统计学处理
        4 实验结果
            4.1 β-榄香烯对细胞的增殖抑制作用
                4.1.1 β-榄香烯对人胃癌细胞 SGC7901 细胞的增殖抑制作用
                4.1.2 β-榄香烯对人胃癌细胞 BGC823 细胞的增殖抑制作用
            4.2 β-榄香烯对胃癌细胞凋亡的影响
                4.2.1 Hoechst 33342 细胞染色法测定β-榄香烯对SGC7901、BGC823细胞凋亡的影响
                4.2.2 流式细胞仪检测β-榄香烯对人胃癌 SGC7901、BGC823 细胞凋亡的影响
            4.3 β-榄香烯对胃癌细胞周期的影响
                4.3.1 β-榄香烯对胃癌SGC7901细胞周期的影响
                4.3.2 β-榄香烯对胃癌BGC7901细胞周期的影响
    实验二 β-榄香烯抑制胃癌细胞的侵袭和迁移
        1 实验材料
            1.1 实验用细胞株
            1.2 实验药物
            1.3 实验试剂
            1.4 主要试剂配制
        2 仪器与设备
        3 实验方法
            3.1 细胞划痕实验
            3.2 Transwell细胞迁移实验
            3.3 Transwell体外侵袭实验
            3.4 统计学处理
        4 实验结果
            4.1 划痕实验测定β-榄香烯对SGC7901、BGC823迁移抑制作用
            4.2 Transwell实验测定β-榄香烯对SGC7901、BGC823迁移、侵袭抑制作用
    实验三 β-榄香烯对胃癌作用的的部分机制
        1 实验材料
            1.1 实验用细胞株
            1.2 实验药物
            1.3 实验试剂
            1.4 实验主要试剂配制
        2 仪器与设备
        3 实验方法
            3.1 LOX酶活性检测
            3.2 Western blot法检测LOX蛋白表达
                3.2.1 胃癌细胞系SGC7901的计数
                3.2.2 胃癌细胞系SGC7901的总蛋白提取
                3.2.3 BCA蛋白定量
                3.2.4 Western blot实验方法
            3.3 荧光定量PCR检测LOX mRNA
                3.3.1 RNA提取
                3.3.2 设计并合成引物
            3.4 统计学处理
        4 实验结果
            4.1 β-榄香烯抑制LOX酶活性
            4.2 Western blot分析β-榄香烯对SGC7901细胞LOX蛋白表达的影响
            4.3 β- 榄香烯对SGC7901细 胞integrinβ1、FAK、E-cadherin、N-cadherin表达的影响
            4.4 荧光定量PCR检测β-榄香烯对SGC7901细胞LOX mRNA的影响
讨论
结论
本研究的不足
附录
致谢
参考文献
综述 赖氨酰氧化酶家族与肿瘤微环境的研究进展
    参考文献



本文编号：3830473