剪接因子SRSF3在雷公藤甲素诱导肝细胞癌细胞凋亡的机制研究

发布时间：2023-06-08 19:25

　　目的探讨在雷公藤甲素(Triptolide,TPL)诱导肝细胞癌细胞株Hep G2凋亡过程中剪接因子Serine/arginine splicing factor 3(SRSF3)基因转录和翻译的变化,探讨SRSF3在肝细胞癌凋亡机制所发挥的作用。方法分组:肝正常细胞株L02细胞;肝细胞癌细胞株Hep G2未处理组;肝细胞癌细胞株Hep G2TPL处理组。Western Blot检测SRSF3蛋白表达量的变化;流式细胞仪(FCM)Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率的变化;荧光定量PCR测定SRSF3基因表达量的变化。结果TPL对人肝细胞癌细胞HepG2细胞有明显的抑制增殖作用,且有明显的剂量效应关系。TPL对Hep G2细胞作用72h的IC50为3.85±1.24ng/ml。流式细胞术检测结果示TPL诱导Hep G2细胞凋亡,且在一定范围内有剂量效应关系。Western blot结果显示人正常肝细胞L02细胞内的SRSF3蛋白表达量相对较低,而人肝细胞癌Hep G2细胞则有较高的SRSF3蛋白表达,当用不同浓度的TPL处理肝细胞癌Hep G2细胞72h后,Hep G2细胞内S...

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中英文对照表
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
    1. 实验材料
        1.1 细胞株
        1.2 主要实验试剂
        1.3 实验仪器和设备
    2. 实验方法
        2.1 细胞培养与传代
        2.2 MTT细胞增殖实验
        2.3 流式细胞仪检测TPL处理72h后HepG2细胞凋亡率的变化
        2.4 Western blot检测不同浓度TPL对肝癌细胞株HepG2细胞内SRSF3蛋白表达的影响
        2.5 荧光定量PCR检测不同浓度TPL对HepG2细胞mRNA表达水平的影响
    3. 统计学分析
结果
    1. 显微镜下观察不同浓度TPL处理72h后HepG2细胞形态的变化
    2. MTT检测不同浓度TPL处理72h后HepG2细胞生长抑制率的变化
    3. 流式细胞仪检测不同浓度TPL处理HepG2细胞72h后细胞凋亡率的变化
    4. Westernblot检测不同浓度TPL处理细胞72h后细胞内SRSF3蛋白的表达变化
    5. 荧光定量PCR检测不同浓度TPL处理细胞后细胞内SRSF3 mRNA表达量的变化
讨论
结论
参考文献
致谢
综述 SRSF3:人类疾病中扮演着重要角色
    参考文献



本文编号：3832342