浒苔提取物降血糖及调节肠道菌群作用研究
发布时间：2023-07-27 07:33
糖尿病是由于体内胰岛素相对分泌不足或缺乏而导致无法有效利用葡萄糖,使机体血糖异常偏高的一种慢性代谢异常疾病。糖尿病患病人数多、发病率高,且呈上升趋势,是威胁人类健康的第三大慢性病。2型糖尿病的患病人数占全部糖尿病的9095%,胰岛素抵抗是其主要的致病原因。现有降糖药物作用方式较为单一,长期服用兼具不同程度的副作用。因此,从天然产物中提取和开发辅助降血糖的功能性成分是非常值得的研究方向。海藻种类繁多,具有丰富的功能活性物质,且易于获得。绿藻浒苔(Enteromorpha prolifera)属绿藻门绿藻纲石莼目石莼科,广泛分布于我国沿海潮间带,含有丰富的营养功能物质,作为食药同源植物食用已有很长的历史。本文主要研究了浒苔水提取物和醇提取物降血糖及调节肠道菌群的效果与作用机制。研究结果如下:浒苔水提取物是取水提醇沉上清液的物质(EPW)及其中分子量小于3000 Da的组分(EPW3)为研究对象,利用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)技术鉴定出EPW3的主要化学组分为eriodictyol-O-glucuronide、kaempferol、O-glucuroni...
【文章页数】：90 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
1.1 糖尿病简介
1.1.1 糖尿病以病因学为基准的分类
1.1.2 糖尿病的发病机制
1.1.3 对糖尿病的用药
1.2 浒苔概况和海藻活性物质研究
1.2.1 海藻水提取物的降血糖功效研究
1.2.2 海藻醇提取物的降血糖功效研究
1.3 肠道菌群与2型糖尿病
1.4 立题意义
1.5 技术路线
第二章 浒苔水提取物的降血糖活性研究
2.1 引言
2.2 试验材料、试剂与仪器
2.2.1 试验材料
2.2.2 试验试剂
2.2.3 试验仪器
2.3 试验方法
2.3.1 制备浒苔水提活性物质
2.3.2 超滤
2.3.3 基于α-葡萄糖苷酶抑制活性的初步筛选
2.3.4 液相色谱-质谱联用方法鉴定
2.3.5 试验动物及饲料和药物配置
2.3.6 糖尿病小鼠模型的建立
2.3.7 小鼠血糖和体重的测定
2.3.8 小鼠口服糖耐量的测定
2.3.9 肝脏和肾脏组织切片形态学观察
2.3.10 荧光定量法测定IRS1/PI3K/AKT信号通路靶基因mRNA表达
2.3.11 蛋白免疫印迹法测定IRS1/PI3K/AKT信号通路靶蛋白表达
2.3.12 基于16S rDNA扩增子测序技术的小鼠肠道菌群变化分析
2.3.13 实验数据处理及图形分析
2.4 结果与分析
2.4.1 α-葡萄糖苷酶活性初步抑制率
2.4.2 EPW3 中的植物化学成分分析
2.4.3 小鼠状态变化观察
2.4.4 EPW及 EPW3对2 型糖尿病小鼠体重和空腹血糖值的影响
2.4.5 EPW及 EPW3对2 型糖尿病小鼠口服糖耐量的影响
2.4.6 EPW及 EPW3 对糖尿病小鼠肝脏及肾脏组织病理观察
2.4.7 EPW及 EPW3对IRS1/PI3K/AKT信号通路表达水平的影响
2.4.8 EPW及 EPW3 给药对小鼠肠道菌群的影响
2.5 讨论与小结
第三章 浒苔醇提取物的降血糖活性研究
3.1 引言
3.2 试验材料、试剂与仪器
3.2.1 试验材料
3.2.2 试验试剂
3.2.3 试验仪器
3.3 试验方法
3.3.1 浒苔55%醇提物制备
3.3.2 超滤
3.3.3 基于α-葡萄糖苷酶抑制活性的初步筛选
3.3.4 液相色谱-质谱联用方法成分
3.3.5 试验动物及饲料和药物配置
3.3.6 糖尿病小鼠模型的建立
3.3.7 小鼠血糖和体重的测定
3.3.8 小鼠糖口服耐量的测定
3.3.9 肝脏和肾脏组织切片形态学观察
3.3.10 荧光定量法测定靶基因PI3K/JNK1的mRNA表达
3.3.11 蛋白免疫印迹法测定靶基因PI3K/JNK1 的蛋白表达
3.3.12 基于16S rDNA扩增子测序技术的小鼠肠道菌群变化分析
3.4 结果与分析
3.4.1 α-葡萄糖苷酶活性初步抑制率
3.4.2 EPE中的植物化学成分分析
3.4.3 EPE对2 型糖尿病小鼠体重和空腹血糖值的影响
3.4.4 EPE对2 型糖尿病小鼠口服糖耐量的影响
3.4.5 EPE对糖尿病小鼠肝脏及肾脏组织病理观察
3.4.6 EPE对胰岛素信号通路靶基因mRNA和蛋白表达水平的影响
3.4.7 EPE给药对小鼠肠道菌群的影响
3.4.8 生化指标、基因表达水平与肠道微生物的相关性分析
3.4.9 浒苔醇提取物和水提取物降血糖和调节肠道菌群的功效比较
3.5 讨论与小结
第四章 浒苔寡糖的降血糖活性初步研究
4.1 引言
4.2 试验材料、仪器与试剂
4.2.1 试验材料
4.2.2 试验试剂
4.2.3 试验仪器
4.3 试验方法
4.3.1 浒苔多糖制备
4.3.2 寡糖酸解法制备及分离纯化
4.3.3 红外光谱测定
4.3.4 电喷雾质谱测定寡糖分子质量
4.3.5 气相色谱测定单糖组成
4.4 结果与分析
4.4.1 寡糖制备与分离纯化
4.4.2 浒苔寡糖的红外光谱
4.4.3 浒苔寡糖的单糖组成分析
4.4.4 质谱分析
4.4.5 α-葡萄糖苷酶体外活性抑制效果
4.5 讨论与小结
总结与展望
1 本文总结
2 展望
参考文献
攻读学位期间的学术论文与研究成果
致谢
本文编号：3837601
【文章页数】：90 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
1.1 糖尿病简介
1.1.1 糖尿病以病因学为基准的分类
1.1.2 糖尿病的发病机制
1.1.3 对糖尿病的用药
1.2 浒苔概况和海藻活性物质研究
1.2.1 海藻水提取物的降血糖功效研究
1.2.2 海藻醇提取物的降血糖功效研究
1.3 肠道菌群与2型糖尿病
1.4 立题意义
1.5 技术路线
第二章 浒苔水提取物的降血糖活性研究
2.1 引言
2.2 试验材料、试剂与仪器
2.2.1 试验材料
2.2.2 试验试剂
2.2.3 试验仪器
2.3 试验方法
2.3.1 制备浒苔水提活性物质
2.3.2 超滤
2.3.3 基于α-葡萄糖苷酶抑制活性的初步筛选
2.3.4 液相色谱-质谱联用方法鉴定
2.3.5 试验动物及饲料和药物配置
2.3.6 糖尿病小鼠模型的建立
2.3.7 小鼠血糖和体重的测定
2.3.8 小鼠口服糖耐量的测定
2.3.9 肝脏和肾脏组织切片形态学观察
2.3.10 荧光定量法测定IRS1/PI3K/AKT信号通路靶基因mRNA表达
2.3.11 蛋白免疫印迹法测定IRS1/PI3K/AKT信号通路靶蛋白表达
2.3.12 基于16S rDNA扩增子测序技术的小鼠肠道菌群变化分析
2.3.13 实验数据处理及图形分析
2.4 结果与分析
2.4.1 α-葡萄糖苷酶活性初步抑制率
2.4.2 EPW3 中的植物化学成分分析
2.4.3 小鼠状态变化观察
2.4.4 EPW及 EPW3对2 型糖尿病小鼠体重和空腹血糖值的影响
2.4.5 EPW及 EPW3对2 型糖尿病小鼠口服糖耐量的影响
2.4.6 EPW及 EPW3 对糖尿病小鼠肝脏及肾脏组织病理观察
2.4.7 EPW及 EPW3对IRS1/PI3K/AKT信号通路表达水平的影响
2.4.8 EPW及 EPW3 给药对小鼠肠道菌群的影响
2.5 讨论与小结
第三章 浒苔醇提取物的降血糖活性研究
3.1 引言
3.2 试验材料、试剂与仪器
3.2.1 试验材料
3.2.2 试验试剂
3.2.3 试验仪器
3.3 试验方法
3.3.1 浒苔55%醇提物制备
3.3.2 超滤
3.3.3 基于α-葡萄糖苷酶抑制活性的初步筛选
3.3.4 液相色谱-质谱联用方法成分
3.3.5 试验动物及饲料和药物配置
3.3.6 糖尿病小鼠模型的建立
3.3.7 小鼠血糖和体重的测定
3.3.8 小鼠糖口服耐量的测定
3.3.9 肝脏和肾脏组织切片形态学观察
3.3.10 荧光定量法测定靶基因PI3K/JNK1的mRNA表达
3.3.11 蛋白免疫印迹法测定靶基因PI3K/JNK1 的蛋白表达
3.3.12 基于16S rDNA扩增子测序技术的小鼠肠道菌群变化分析
3.4 结果与分析
3.4.1 α-葡萄糖苷酶活性初步抑制率
3.4.2 EPE中的植物化学成分分析
3.4.3 EPE对2 型糖尿病小鼠体重和空腹血糖值的影响
3.4.4 EPE对2 型糖尿病小鼠口服糖耐量的影响
3.4.5 EPE对糖尿病小鼠肝脏及肾脏组织病理观察
3.4.6 EPE对胰岛素信号通路靶基因mRNA和蛋白表达水平的影响
3.4.7 EPE给药对小鼠肠道菌群的影响
3.4.8 生化指标、基因表达水平与肠道微生物的相关性分析
3.4.9 浒苔醇提取物和水提取物降血糖和调节肠道菌群的功效比较
3.5 讨论与小结
第四章 浒苔寡糖的降血糖活性初步研究
4.1 引言
4.2 试验材料、仪器与试剂
4.2.1 试验材料
4.2.2 试验试剂
4.2.3 试验仪器
4.3 试验方法
4.3.1 浒苔多糖制备
4.3.2 寡糖酸解法制备及分离纯化
4.3.3 红外光谱测定
4.3.4 电喷雾质谱测定寡糖分子质量
4.3.5 气相色谱测定单糖组成
4.4 结果与分析
4.4.1 寡糖制备与分离纯化
4.4.2 浒苔寡糖的红外光谱
4.4.3 浒苔寡糖的单糖组成分析
4.4.4 质谱分析
4.4.5 α-葡萄糖苷酶体外活性抑制效果
4.5 讨论与小结
总结与展望
1 本文总结
2 展望
参考文献
攻读学位期间的学术论文与研究成果
致谢
本文编号：3837601
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