牛磺酸对高脂高糖所致INS-1细胞系内质网应激作用研究

发布时间：2023-09-13 21:53

　　2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)目前已经跨越了年龄限制,成为人类首屈一指的高发病之一,这与高甜度高脂肪的饮食习惯密不可分。机体超量摄入糖与脂肪会使胰岛β细胞功能受损以及胰岛素抵抗,继而引发2型糖尿病。内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)反应启动胰岛β细胞的凋亡程序与糖尿病的发生息息相关。本课题组前期实验结果表明,牛磺酸可通过抑制胰岛β细胞系INS-1细胞高脂高糖诱导的ERS介导的IRE1-caspase12凋亡相关信号通路中的关键作用蛋白表达来缓解应激,抑制胰岛β细胞凋亡。本试验以高脂高糖处理后的胰岛β细胞系INS-1细胞为研究对象,考察牛磺酸对ERS介导的CHOP凋亡相关信号通路与JNK凋亡相关信号通路关键蛋白表达,探讨牛磺酸发挥作用的机制。选择将INS-1细胞进行体外培养,分为四组,分别为空白对照组(C组,1640培养基)、牛磺酸对照组(T组,1640+牛磺酸)、高脂高糖组(H组,1640+高脂高糖)、高脂高糖牛磺酸组(HT组,1640+高脂高糖+牛磺酸)、分别培养12 h、24 h及48 h后进行检...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 前言
    1.1 ERS与糖尿病
        1.1.1 ERS与未折叠蛋白反应
        1.1.2 ERS的信号通路与细胞凋亡
        1.1.3 ERS与糖尿病
    1.2 INS-1 细胞系的概况
    1.3 牛磺酸
        1.3.1 牛磺酸概述
        1.3.2 牛磺酸与糖尿病
        1.3.3 牛磺酸与ERS
    1.4 本研究的目的及意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验试剂
        2.1.2 主要仪器设备
    2.2 试验方法
        2.2.1 INS-1 细胞培养
        2.2.2 棕榈酸溶液配制
        2.2.3 荧光单标试验
        2.2.4 蛋白表达量检测
3 结果与分析
    3.1 内质网应激启动上游因子ATF6、XBP1、IRE1 和凋亡相关因子p-eif2α荧光平均密度值
        3.1.1 ATF6 的荧光表达结果
        3.1.2 XBP1 的荧光表达结果
        3.1.3 IRE1 的荧光表达结果
        3.1.4 p-eif2α的荧光表达结果
    3.2 牛磺酸对CHOP凋亡信号通路及JNK凋亡信号通路蛋白表达的影响
        3.2.1 PERK与 p-PERK的蛋白表达量
        3.2.2 ATF6 的蛋白表达量
        3.2.3 XBP1 的蛋白表达量
        3.2.4 eif2α与 p-eif2α的蛋白表达量
        3.2.5 EDEM的蛋白表达量
        3.2.6 ASK1 的蛋白表达量
        3.2.7 CHOP与 p-CHOP的蛋白表达量
        3.2.8 BCL-2 的蛋白表达量
        3.2.9 JNK与 p-JNK的蛋白表达量
4 讨论
    4.1 牛磺酸对ERS启动因子蛋白表达的影响
    4.2 牛磺酸对JNK信号通路JNK、XBP1、EDEM、BCL-2、ASK1、p-JNK的蛋白表达的影响
    4.3 牛磺酸对CHOP通路中ATF6、PERK、P-PERK、p-eif2α、eif2α、CHOP、p-CHOP的蛋白表达的影响
5 结论
参考文献
附图
致谢
攻读硕士期间发表论文



本文编号：3845983