丹皮酚对酒精性急性肝损伤保护作用研究
发布时间：2023-10-01 21:40
在我国,随着人们生活水平的极大提高,酒精类饮品的消耗量不断递增,酒精性肝病(ALD)的发生率也在逐年攀升。近年来,酒精性肝病受到越来越多的关注,酒精性肝病的发病机制也被广泛研究,但酒精性肝病的治疗手段并没有突破性进展,精确的发病机制有待进一步阐明。丹皮酚是从毛茛科植物牡丹的干燥根皮中提取出来的一种有效成分,学名是2’-羟基-4’-甲氧基苯乙酮,文献报道其具有镇痛、抗炎、解热和抑制变态反应等多种药理活性。本论文分别以HepG2细胞和C57BL/6小鼠为体外和体内模型探究丹皮酚对急性酒精性肝损伤的保护作用及初步分子机制。本文研究内容与结果如下:1.丹皮酚预处理对酒精诱导的HepG2细胞损伤具有保护作用。MTT试验结果显示300 mM的酒精没有明显降低HepG2细胞的生存率,但后续实验结果表明,300 mM的酒精使HepG2细胞内的ROS和炎症因子水平明显升高,这说明300 mM的酒精虽然不能大量杀死HepG2细胞,但已经破坏了细胞内的氧化还原平衡并引起炎症反应。丹皮酚(2、6、18 μM)预处理浓度依赖性抑制酒精引起的HepG2细胞内的ROS和炎症因子水平的提高。细胞形态学实验也表明丹皮酚...
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 酒精性肝病概况
1.1.1 酒精性肝病流行病学现状
1.1.2 酒精性肝损伤机制
1.1.3 酒精性肝病的治疗
1.2 丹皮酚的研究概况
1.2.1 简介
1.2.2 丹皮中有效成分
1.2.3 丹皮的主要药理活性
1.2.4 丹皮酚的药理活性分析
1.3 研究目的和意义
2 丹皮酚对酒精诱导HepG2细胞损伤的影响
2.1 引言
2.2 实验仪器和材料
2.3 实验方法与步骤
2.3.1 细胞的复苏
2.3.2 细胞的培养与传代
2.3.3 MTT法检测细胞生存率
2.3.4 MTT法检测丹皮酚对HepG2细胞生存率的影响
2.3.5 MTT法检测不同浓度酒精对HepG2细胞的影响
2.3.6 DPPH法筛选丹皮酚的最佳抗氧化浓度
2.3.7 细胞形态学观察丹皮酚对细胞的保护作用
2.3.8 检测细胞内ROS水平
2.3.9 检测细胞内炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β水平
2.3.10 检测细胞内NO水平
2.4 结果与讨论
2.4.1 MTT法检测丹皮酚对HepG2细胞生存率的影响
2.4.2 MTT法检测酒精对HepG2细胞生存率的影响
2.4.3 丹皮酚总抗氧化能力检测
2.4.4 细胞形态学观察丹皮酚对HepG2细胞的保护作用
2.4.5 丹皮酚对HepG2细胞内酒精诱导的ROS的影响
2.4.6 丹皮酚对酒精诱导HepG2细胞内炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β影响
2.4.7 丹皮酚对酒精诱导HepG2细胞NO水平的的影响
2.5 本章小结
3 丹皮酚拮抗酒精诱导HepG2细胞损伤的分子机制
3.1 引言
3.2 实验仪器与材料
3.3 实验方法与步骤
3.3.1 Western blotting检测细胞内氧化应激与炎症反应相关蛋白
3.4 结果与讨论
3.4.1 丹皮酚对SIRT1/Nrf2信号通路的影响
3.4.2 丹皮酚对SIRT1/NF-κB信号通路的影响
3.4.3 丹皮酚对GSH/GSSG比率的影响
3.4.4 丹皮酚对MDA水平的影响
3.5 本章小结
4 丹皮酚对C57BL/6小鼠急性酒精肝损伤保护作用研究
4.1 引言
4.2 实验仪器与材料
4.3 实验方法与步骤
4.3.1 小鼠急性酒精性肝损伤模型的建立
4.3.2 小鼠样本收集
4.3.3 小鼠血清中ALT、AST、GSH和TNF-α水平检测
4.3.4 小鼠肝脏组织病理学分析
4.3.5 小鼠肝脏匀浆中氧化还原与炎症反应相关蛋白检测
4.4 结果与讨论
4.4.1 丹皮酚对小鼠血清中ALT、AST、GSH和TNF-α水平的影响
4.4.2 小鼠肝脏组织病理学观察
4.4.3 丹皮酚对小鼠肝脏匀浆中SIRT1、Nrf2和NF-κB蛋白的影响
4.5 本章小结
结论
参考文献
攻读硕士期间发表的学术论文
致谢
本文编号：3849471
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 酒精性肝病概况
1.1.1 酒精性肝病流行病学现状
1.1.2 酒精性肝损伤机制
1.1.3 酒精性肝病的治疗
1.2 丹皮酚的研究概况
1.2.1 简介
1.2.2 丹皮中有效成分
1.2.3 丹皮的主要药理活性
1.2.4 丹皮酚的药理活性分析
1.3 研究目的和意义
2 丹皮酚对酒精诱导HepG2细胞损伤的影响
2.1 引言
2.2 实验仪器和材料
2.3 实验方法与步骤
2.3.1 细胞的复苏
2.3.2 细胞的培养与传代
2.3.3 MTT法检测细胞生存率
2.3.4 MTT法检测丹皮酚对HepG2细胞生存率的影响
2.3.5 MTT法检测不同浓度酒精对HepG2细胞的影响
2.3.6 DPPH法筛选丹皮酚的最佳抗氧化浓度
2.3.7 细胞形态学观察丹皮酚对细胞的保护作用
2.3.8 检测细胞内ROS水平
2.3.9 检测细胞内炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β水平
2.3.10 检测细胞内NO水平
2.4 结果与讨论
2.4.1 MTT法检测丹皮酚对HepG2细胞生存率的影响
2.4.2 MTT法检测酒精对HepG2细胞生存率的影响
2.4.3 丹皮酚总抗氧化能力检测
2.4.4 细胞形态学观察丹皮酚对HepG2细胞的保护作用
2.4.5 丹皮酚对HepG2细胞内酒精诱导的ROS的影响
2.4.6 丹皮酚对酒精诱导HepG2细胞内炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β影响
2.4.7 丹皮酚对酒精诱导HepG2细胞NO水平的的影响
2.5 本章小结
3 丹皮酚拮抗酒精诱导HepG2细胞损伤的分子机制
3.1 引言
3.2 实验仪器与材料
3.3 实验方法与步骤
3.3.1 Western blotting检测细胞内氧化应激与炎症反应相关蛋白
3.4 结果与讨论
3.4.1 丹皮酚对SIRT1/Nrf2信号通路的影响
3.4.2 丹皮酚对SIRT1/NF-κB信号通路的影响
3.4.3 丹皮酚对GSH/GSSG比率的影响
3.4.4 丹皮酚对MDA水平的影响
3.5 本章小结
4 丹皮酚对C57BL/6小鼠急性酒精肝损伤保护作用研究
4.1 引言
4.2 实验仪器与材料
4.3 实验方法与步骤
4.3.1 小鼠急性酒精性肝损伤模型的建立
4.3.2 小鼠样本收集
4.3.3 小鼠血清中ALT、AST、GSH和TNF-α水平检测
4.3.4 小鼠肝脏组织病理学分析
4.3.5 小鼠肝脏匀浆中氧化还原与炎症反应相关蛋白检测
4.4 结果与讨论
4.4.1 丹皮酚对小鼠血清中ALT、AST、GSH和TNF-α水平的影响
4.4.2 小鼠肝脏组织病理学观察
4.4.3 丹皮酚对小鼠肝脏匀浆中SIRT1、Nrf2和NF-κB蛋白的影响
4.5 本章小结
结论
参考文献
攻读硕士期间发表的学术论文
致谢
本文编号：3849471
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