钩吻素子对星形胶质细胞活化的抑制作用及其与自噬功能调节的关系

发布时间：2023-10-15 15:00

　　脊髓背角是神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)的重要调控部位,而脊髓胶质细胞主要是星形胶质细胞的活化在NP维持中的作用日益被重视,脊髓胶质细胞活化进而释放一系列致炎细胞因子等活性物质,其为痛敏发生的重要机制之一,成为近几年国内外研究的热点。钩吻素子(koumine,KM)是传统药用植物钩吻中吲哚类生物碱成分之一,含量高且毒性较低。课题组前期工作提示KM有抗NP的作用,其作用可能与抑制脊髓背角星形胶质细胞活化有关,但其作用机制有待于进一步探索。有研究发现在NP发生过程中脊髓自噬受阻(自噬囊泡的堆积)。本文拟在坐骨神经慢性束缚损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠模型上,明确钩吻素子抗NP及抑制脊髓星形胶质细胞活化的作用。在这个基础上,一方面利用动物模型,检测NP发生时脊髓星形胶质细胞自噬活性的变化以及钩吻素子对它的影响;并在原代星形胶质细胞活化模型上,探讨钩吻素子抑制星形胶质细胞活化的作用是否与自噬有关。主要研究内容如下:1 KM对NP脊髓星形胶质细胞活化的抑制作用1.1钩吻素子对CCI模型大鼠的镇痛作用及对脊髓星形胶质细胞活化的影...

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前言
材料和方法
    1. 材料
        1.1 实验动物
        1.2 星形胶质细胞
        1.3 药品和试剂
        1.4 主要仪器和耗材
    2. 方法
        2.1 SD大鼠CCI神经病理性疼痛模型
        2.2 大鼠后足机械痛阈测定
        2.3 免疫荧光组织化学法
        2.4 原代星形胶质细胞的分离培养及鉴定
        2.5 MTT法
        2.6 总蛋白提取及BCA法测定蛋白浓度
        2.7 蛋白分子印迹法（Western Blot法）
        2.8 酶联免疫吸附法（ELISA）
        2.9 统计学处理
结果
    1. 钩吻素子抗NP作用与其对脊髓星形胶质细胞活化的影响
        1.1 钩吻素子对CCI模型大鼠的镇痛作用及对脊髓星形胶质细胞活化的影响
        1.2 钩吻素子对LPS诱导星形胶质细胞活化的抑制作用
    2. 钩吻素子对星形胶质细胞自噬功能的影响
        2.1 钩吻素子对CCI大鼠脊髓星形胶质细胞自噬的调节作用
        2.2 钩吻素子对LPS诱导的星形胶质细胞自噬功能的影响
    3. 钩吻素子抑制星形胶质细胞活化的作用与自噬的关系
        3.1 自噬抑制剂氯喹对原代星形胶质细胞存活率的影响
        3.2 氯喹（自噬抑制剂）翻转钩吻素子对LPS诱导的星形胶质细胞活化的影响
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3854128