丹栀复方从“肝”论治Graves病小鼠的量—效与时—效关系及机制研究

发布时间：2023-10-21 10:47

　　Graves病是以甲状腺激素分泌增多为特征的器官特异性自身免疫疾病,是导致甲状腺功能亢进最常见的原因,其发病率约占甲亢的80⁸5%。目前抗甲状腺药物(ATD)是该病最常用的治疗方法,但其治疗时间长,停药指征不明确,停药后复发率高,成为该病治疗存在的最大难题。因此,寻找更为可靠、有效的治疗方法,缩短疗程,改善预后,降低复发率是目前Graves病研究的热点。研究发现,Graves病患者体内促甲状腺激素受体抗体(TRAb)水平以及甲状腺的肿大程度与疾病的复发密切相关,而氧化应激是导致Graves病自身免疫紊乱、介导细胞凋亡并影响甲状腺肿大程度的重要因素之一。因此从氧化应激的角度探讨Graves病的防治具有较大的临床价值,本实验以氧化应激为切入点,在探讨丹栀复方治疗Graves病小鼠的量-效与时-效关系的同时运用现代分子生物学技术进一步对丹栀复方从“肝”论治法改善Graves病预后、降低复发的机制进行深入研究。目的:本研究以表达促甲状腺激素受体A亚单位的重组腺病毒(Ad-TSHR-289)构建Graves病小鼠模型,观察具有疏肝理气、清热滋阴作用的丹栀复方对Graves病...

【文章页数】：127 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略词表
引言
实验研究
    一.Graves病小鼠模型的建立及评价
        1.材料
            1.1 实验动物
            1.2 饲养环境及饲料
            1.3 造模药物
            1.4 主要仪器
            1.5 主要试剂及耗材
        2.Ad-TSHR-289的扩增、浓缩、纯化与滴度测定
            2.1 质粒制备
            2.2 AdCMV_TSHR289/Flag(Dsredexpress2)腺病毒包装、纯化与滴度检测
        3.随机分组及给药方法
            3.1 分组及给药方法
            3.2 病毒免疫方法
            3.3 免疫周期
        4.观察指标及方法
            4.1 标本采集和处理
            4.2 检测指标
        5.统计方法
        6.实验结果
            6.1 小鼠的一般情况比较
            6.2 造模期各组小鼠每周平均摄食量比较
            6.3 造模期各组小鼠每周平均饮水量比较
            6.4 造模期各组小鼠每周体重比较
            6.5 造模期各组小鼠每周体温比较
            6.6 造模期各组小鼠T3、T4、TRAb水平比较
            6.7 甲状腺病理结果
        讨论
            1.Graves病动物模型造模方法的探讨
                1.1 Ad-TSHR-289造模的干预模式探讨
                1.2 小鼠种系及性别的选择
            2.动物模型的评价
        小结
    二.丹栀复方治疗Graves病小鼠的量-效与时-效关系研究
        1.材料
            1.1 实验动物
            1.2 饲养的环境及饲料
            1.3 实验药品
            1.4 主要试剂及测试盒
            1.5 主要仪器和材料
        2.实验方法
            2.1 分组
            2.2 给药方法
        3.观测指标及检测
            3.1 小鼠的一般情况
            3.2 小鼠的饮食、饮水量
            3.3 小鼠的体温、体重
            3.4 小鼠甲状腺病理
            3.5 小鼠血清T3、T4、TSH、TRAb水平
            3.6 小鼠肝脏MDA、SOD、CAT水平
        4.统计方法
        5.结果
            5.1 各组小鼠一般情况比较
            5.2 小鼠血清检测结果
            5.3 小鼠肝脏氧化应激指标结果
            5.4 甲状腺病理结果
        讨论
            1.复发率高是Graves病治疗亟待解决的难题
            2.肝气郁滞是Graves病的病机关键
            3.肝与甲状腺的内在联系支持Graves病从“肝”论治的可行性
            4.从“肝”论治Graves病古有渊源,且临床疗效确切
            5.丹栀复方体现从“肝”论治思想
                5.1 丹栀复方的选方依据
                5.2 丹栀复方的前期临床观察
                5.3 丹栀复方的组方原理
                5.4 现代药理学的研究
            6.阳性对照药物的选择
        小结
    三、丹栀复方对肝脏Nrf-2/HO-1信号通路及甲状腺组织Bcl-2、Bax的影响
        1.材料
            1.1 实验动物
            1.2 实验药品
            1.3 主要试剂及测试盒
            1.4 主要仪器和材料
        2.给药方法
        3.观测指标及检测
            3.1 Real-TimePCR检测肝细胞中Nrf-2、HO-1基因表达
            3.2 WesternBlot法检测肝脏中Nrf-2、HO-1蛋白及甲状腺组织中Bcl-2、Bax的表达
        4.统计方法
        5.结果
            5.1 各组小鼠肝脏Nrf-2mRNA的表达水平比较
            5.2 各组小鼠肝脏HO-1mRNA的表达水平比较
            5.3 各组小鼠肝脏Nrf-2蛋白的表达水平比较
            5.4 各组小鼠肝脏HO-1蛋白的表达水平比较
            5.5 各组小鼠甲状腺组织中Bcl-2表达水平比较
            5.7 各组小鼠甲状腺组织中Bax含量比较
            5.8 TRAb与MDA、SOD、CAT的相关性分析
            5.9 MDA、SOD、CAT与Bcl-2、Bax的相关性分析
            5.10 MDA、SOD、CAT与Nrf-2/HO-1通路的相关性分析
        讨论
            1.TRAb与甲状腺大小是影响复发的重要危险因素
            2.氧化应激参与Graves病的发病过程
            3.氧化应激影响Graves病复发相关因素,参与疾病复发过程
                3.1 氧化应激参与Graves病的自身免疫紊乱及炎症反应过程
                3.2 氧化应激参与细胞凋亡的调节,从而影响甲状腺大小
            4.抗氧化治疗有益于Graves病的预后
            5.Nrf-2及其调控的下游基因在机体抗氧化中发挥重要作用
        小结
特色与创新
结论
问题与展望
致谢
参考文献
文献综述
    参考文献
在校期间公开发表的学术论文



本文编号：3855682