肠复方及拆方对肠癌MDSCs细胞iNOS、ARG1表达的影响

发布时间：2023-10-21 12:35

　　目的:探讨肠复方及拆方对肠癌髓源抑制性细胞(MDSCs)诱导型一氧化氮合酶(i NOS)及精氨酸酶1(ARG1)表达的影响。方法:采用不同浓度的肠复方干预肠癌CT26细胞,运用MTT法检测增殖情况,并探索肠复方最佳浓度及时间。建立小鼠结肠癌皮下移植瘤模型,21 d后取荷瘤小鼠脾脏,免疫磁珠法提取和流式细胞术检测MDSCs细胞。结合MTT试验筛选出抑制效果最佳的肠复方浓度,将20只大鼠,随机分为肠复方全方组、香菇多糖组、模型组、拆方Ⅰ组(健脾益气扶正)及拆方Ⅱ组(祛湿化瘀解毒),每组4只,制备含药血清,分组干预MDSCs细胞。运用Western blotting和RT-PCR法检测5组MDSCs细胞i NOS及ARG1的表达。结果:MTT检测显示肠复方全方对CT26细胞增殖有明显的抑制作用,且含药血清干预72 h较干预24、48 h增殖抑制作用更强,与时间呈正相关(P<0.05),肠复方中剂量组在不同干预时间段对细胞增殖的抑制作用均明显强于高、低剂量组(P<0.05)。通过流式细胞术检测小鼠脾脏MDSCs细胞为活性90%,纯度86.65%,Real-time PCR结果显示:...

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【文章目录】：
1 实验材料
    1.1 细胞株
    1.2 实验动物
    1.3药物
    1.4 试剂
    1.5 主要仪器
2 实验方法
    2.1 细胞培养
    2.2 肠复方含药血清制备与分组
    2.3 MTT法检测细胞增殖抑制试验
    2.4 建立皮下移植瘤模型
    2.5 脾脏细胞分离
    2.6 免疫磁珠法分离小鼠脾脏MDSCs细胞
    2.7 Real-time PCR法检测MDSCs中iNOS
    2.8 Western blotting检测MDSCs中iNOS、ARG1蛋白表达
    2.9 统计学方法
3 结果
    3.1 各组含药血清对肠癌CT26细胞增殖抑制的影响
    3.2 流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏MDSCs的活性及纯度
    3.3各组含药血清对MDSCs细胞i NOS mRNA、ARG1 mRNA表达的影响
    3.4 Western blotting检测含药血清对MDSCs细胞iNOS、ARG1蛋白表达的影响
4讨论



本文编号：3855842