藤茶中二氢杨梅素的提取及其金属配合物制备、生物活性研究
发布时间:2023-10-22 11:42
藤茶,学名显齿蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata),广泛分布于我国南方。由于其广泛的生物学活性而备受关注,在其茎叶中含有的主要黄酮是二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DMY)。DMY具有清除氧自由基、消炎、抑菌、降脂、抗肿瘤等生理活性,其化学结构具有很高的超离域度和大π键共轭体系,能与金属离子形成稳定的配合物。本文探讨了藤茶中DMY的提取及优化工艺,设计合成了钒、锌和铬等系列二氢杨梅素金属配合物。此外,初步测试了这些金属配合物与DNA的相互作用、抗氧化性和抗肿瘤作用。主要的研究内容如下:1.对提取溶剂进行初筛后,再通过正交设计实验优化了DMY的提取工艺。实验显示,乙酸乙酯为所选中的最佳提取溶剂。当提取时间50 min、提取温度50℃、料液比1:20时,DMY的提取率可达14.28%左右。方差分析结果显示,影响DMY提取率的几种因素的大小顺序为:料液比>提取温度>提取时间。2.为了考察相关二氢杨梅素金属配合物的生物活性,合成了Zn-DMY、Cr-DMY和VO-DMY,以元素分析、IR、ESI-MS和1H NMR对化合物进行了结构表征。采用紫外...
【文章页数】:66 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 绪论
1.1 民间藤茶药用概况
1.2 藤茶化学成分研究进展
1.2.1 黄酮类
1.2.2 低聚芪类、酚类及蹂质
1.3 药理作用研究进展
1.3.1 抗炎和镇痛作用
1.3.2 抗氧化作用
1.3.3 免疫调节作用
1.3.4 抗菌作用
1.3.5 降血糖、降血脂及降压作用
1.3.6 抗肿瘤作用
1.4 二氢杨梅素-金属配合物的研究
1.5 选题意义
第二章 藤茶中二氢杨梅素的提取及工艺优化
2.1 仪器试剂
2.1.1 主要仪器
2.1.2 实验材料与试剂
2.2 实验方法
2.2.1 DMY对照品溶液的制备
2.2.2 HPLC操作方法的确定
2.2.3 线性关系考察
2.2.4 样品处理方法
2.2.5 单因素考察
2.2.6 正交实验设计
2.3 结果与讨论
2.3.1 HPLC测定DMY含量
2.3.2 单因素实验
2.3.3 正交试验
2.4 本章小结
第三章 二氢杨梅素金属配合物的合成及其与DNA的相互作用
3.1 实验部分
3.1.1 仪器与试剂
3.1.2 缓冲溶液的配制
3.1.3 配合物溶液以及DNA溶液的配制
3.1.4 金属配合物与DNA相互作用的研究方法
3.1.5 金属配合物与DNA作用流体力学实验
3.1.6 琼脂糖凝胶电泳分析实验
3.1.7 金属配合物的合成
3.2 结果与讨论
3.2.1 配合物结构表征
3.2.2 质谱与氢谱
3.2.3 配合物与DNA作用的电子吸收光谱
3.2.4 配合物与DNA作用的荧光淬灭实验
3.2.5 配合物与DNA相互作用的粘度测定
3.2.6 琼脂糖凝胶电泳分析实验
3.3 本章小结
第四章 二氢杨梅素配合物抗肝癌活性的研究
4.1 实验仪器与试剂
4.2 实验方法与步骤
4.2.1 无菌操作
4.2.2 细胞操作及试剂配制
4.2.3 MTT实验
4.2.4 Annexin V- FITC/PI细胞凋亡检测
4.2.5 PI单染检测细胞周期
4.2.6 统计分析
4.2.7 抗氧化性实验
4.3 结果与讨论
4.3.1 MTT法检测细胞毒性
4.3.2 细胞凋亡率
4.3.3 细胞周期检测
4.3.4 抗氧化性实验
4.4 本章小结
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文
致谢
附录 化合物的部分表征图谱
本文编号:3856449
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【学位级别】:硕士
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摘要
Abstract
第一章 绪论
1.1 民间藤茶药用概况
1.2 藤茶化学成分研究进展
1.2.1 黄酮类
1.2.2 低聚芪类、酚类及蹂质
1.3 药理作用研究进展
1.3.1 抗炎和镇痛作用
1.3.2 抗氧化作用
1.3.3 免疫调节作用
1.3.4 抗菌作用
1.3.5 降血糖、降血脂及降压作用
1.3.6 抗肿瘤作用
1.4 二氢杨梅素-金属配合物的研究
1.5 选题意义
第二章 藤茶中二氢杨梅素的提取及工艺优化
2.1 仪器试剂
2.1.1 主要仪器
2.1.2 实验材料与试剂
2.2 实验方法
2.2.1 DMY对照品溶液的制备
2.2.2 HPLC操作方法的确定
2.2.3 线性关系考察
2.2.4 样品处理方法
2.2.5 单因素考察
2.2.6 正交实验设计
2.3 结果与讨论
2.3.1 HPLC测定DMY含量
2.3.2 单因素实验
2.3.3 正交试验
2.4 本章小结
第三章 二氢杨梅素金属配合物的合成及其与DNA的相互作用
3.1 实验部分
3.1.1 仪器与试剂
3.1.2 缓冲溶液的配制
3.1.3 配合物溶液以及DNA溶液的配制
3.1.4 金属配合物与DNA相互作用的研究方法
3.1.5 金属配合物与DNA作用流体力学实验
3.1.6 琼脂糖凝胶电泳分析实验
3.1.7 金属配合物的合成
3.2 结果与讨论
3.2.1 配合物结构表征
3.2.2 质谱与氢谱
3.2.3 配合物与DNA作用的电子吸收光谱
3.2.4 配合物与DNA作用的荧光淬灭实验
3.2.5 配合物与DNA相互作用的粘度测定
3.2.6 琼脂糖凝胶电泳分析实验
3.3 本章小结
第四章 二氢杨梅素配合物抗肝癌活性的研究
4.1 实验仪器与试剂
4.2 实验方法与步骤
4.2.1 无菌操作
4.2.2 细胞操作及试剂配制
4.2.3 MTT实验
4.2.4 Annexin V- FITC/PI细胞凋亡检测
4.2.5 PI单染检测细胞周期
4.2.6 统计分析
4.2.7 抗氧化性实验
4.3 结果与讨论
4.3.1 MTT法检测细胞毒性
4.3.2 细胞凋亡率
4.3.3 细胞周期检测
4.3.4 抗氧化性实验
4.4 本章小结
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文
致谢
附录 化合物的部分表征图谱
本文编号:3856449
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