毛蕊花苷对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症模型的作用及其机制研究

发布时间：2023-10-31 18:44

　　目的采用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞的炎症模型,考察炎症相关指标,探讨毛蕊花苷的抗炎作用及其机制。方法用MTT比色法检测毛蕊花苷对RAW264.7细胞活性的影响;Griess法检测NO的含量;Westernblotting检测核转录因子-κB(NF-κB)通路相关蛋白的表达,ELISA试剂盒检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的释放,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)、Ca²⁺的释放情况。结果毛蕊花苷浓度为20、40、80μmol/L时对RAW264.7细胞没有毒性。不同浓度的毛蕊花苷对LPS诱导RAW264.7细胞导致的NO、TNF-α、IL-6的释放,细胞内ROS、NO、Ca²⁺释放的增加均有很好的抑制效果,对诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧化酶-2(COX-2)、p-IKKα/β、p-p65、p-IκBα蛋白的表达也有抑制作用。结论毛蕊花苷具有明显的抗炎作用,其作用机制是通过抑制NF-κB信号通路而发挥抗炎作用。

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料
    1.1 细胞、药物与试剂
    1.2 仪器
2 方法
    2.1 细胞培养
    2.2 毛蕊花苷的细胞毒性检测
    2.3 毛蕊花苷对NO释放的影响
    2.4 毛蕊花苷对TNF-α、IL-6炎症因子释放的影响
    2.5 毛蕊花苷对ROS/NO/Ca2+产生的影响
    2.6 毛蕊花苷对i NOS/COX-2蛋白表达的影响
    2.7 毛蕊花苷对核转录因子-κB(NF-κB）通路的影响
    2.8 统计学分析
3 结果
    3.1 细胞生长情况
    3.2 毛蕊花苷对RAW264.7细胞活性的影响
    3.3 毛蕊花苷对LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO的影响
    3.4 毛蕊花苷对LPS诱导的RAW264.7细胞释放ROS/Ca2+的影响
    3.5 ELISA检测毛蕊花苷对LPS诱导RAW264.7细胞分泌IL-6、TNF-α的影响
    3.6 毛蕊花苷对LPS诱导的RAW264.7细胞中i NOS、COX-2蛋白表达的影响
    3.7 毛蕊花苷对LPS诱导的RAW264.7细胞中NF-κB信号通路的影响
4 讨论



本文编号：3859274