蒙古口蘑胞外多糖提

发布时间：2023-11-08 19:40

　　蒙古口蘑(Tricholoma mongolicum Imai)是一种药食同源的大型真菌,口感良好营养丰富,多糖是其主要的活性物质之一,具有十分重要的研究价值。本研究通过发酵液醇沉法提取蒙古口蘑菌丝体胞外多糖,酶法去蛋白、凝胶柱和离子交换柱分离纯化蒙古口蘑胞外多糖,并结合UV-Vis、GPC、GC-MS、FTIR进行结构鉴定。确定了醇沉最佳工艺为:醇沉温度8℃,醇沉时间36h,乙醇浓度85%;确定最佳去蛋白条件为:酶添加量0.31%,pH 7.0,49.0℃保温1.40h。多糖保留率为80.81%,蛋白质脱除率为80.52%。分离得到分子量分别为273816D、86656D的两个蒙古口蘑胞外多糖组分TMMEP-1及TMMEP-2。并分析了TMMEP-2的单糖组成,TMMEP-2是由核糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,其摩尔比为0.23:0.41:1.88:1.84:1.47:3.64。对其抗氧化性、降血糖活性及抑菌性进行初步研究,得到如下结果:TMMEP-2具有较强的羟基自由基和DPPH自由基的清除能力,最大分别达到了71.02%和45.01%,而TMMEP-2的还原力不...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACTE
缩略词表
一、绪论
    1.1 引言
    1.2 蒙古口蘑的研究进展
        1.2.1 蒙古口蘑的形态特征与分布
        1.2.2 蒙古口蘑活性成分的研究
    1.3 多糖研究进展
        1.3.1 多糖提取纯化方法
        1.3.2 多糖的生物活性
        1.3.3 应用领域
    1.4 本课题研究内容和意义
二、材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 原辅材料
        2.1.2 酶制剂和标准品
        2.1.3 主要试剂及其他
        2.1.4 仪器设备
    2.2 方法
        2.2.1 多糖和蛋白含量的测定
        2.2.2 蒙古口蘑胞外多糖的制备
        2.2.3 蒙古口蘑胞外多糖提取工艺优化
        2.2.4 中性蛋白酶去蛋白
        2.2.5 Sepharose CL-6B凝胶柱纯化
        2.2.6 DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱纯化
        2.2.7 紫外光谱法测定纯度
        2.2.8 分子量测定和单糖组成分析
        2.2.9 红外色谱法
        2.2.10 抗氧化活性测定
        2.2.11 降血糖活性测定
        2.2.12 抑菌活性测定
三、结果与分析
    3.1 标准曲线
        3.1.1 葡萄糖标准曲线
        3.1.2 蛋白质标准曲线
    3.2 蒙古口蘑胞外多糖提取工艺优化结果
        3.2.1 醇沉单因素试验结果
        3.2.2 醇沉响应面工艺优化
    3.3 中性蛋白酶去蛋白条件确定
        3.3.1 中性蛋白酶去蛋白单因素试验结果
        3.3.2 中性蛋白酶去蛋白响应面试验结果
    3.4 凝胶层析纯化结果
        3.4.1 Sepharose CL-6B凝胶柱纯化结果
        3.4.2 DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱纯化结果
    3.5 紫外纯度分析
    3.6 基本结构分析
        3.6.1 GPC 分子量测定
        3.6.2 单糖组成分析
        3.6.3 红外结果
    3.7 TMMEP-2 的抗氧化活性
        3.7.1 对·OH清除作用
        3.7.2 对DPPH·的清除作用
        3.7.3 还原力测定
        3.7.4 蒙古口蘑胞外多糖与Vc在0.16mg/mL时在不同体系中的活性比较
    3.8 TMMEP-2 降血糖活性
        3.8.1 对血糖的影响
        3.8.2糖耐量实验
        3.8.3 对体重,脏器指数的影响
    3.9 TMMEP-2 抑菌活性
四、结论与展望
    4.1 结论
    4.2 展望
参考文献
致谢
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本文编号：3861618