蒲公英萜醇对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用及机制研究

发布时间：2024-02-15 23:40

　　目的:体外研究蒲公英萜醇(Taraxerol)对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用,并探讨可能的分子机制。方法:采用噻唑蓝实验检测蒲公英萜醇对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231增殖能力的影响,筛选出对药物敏感的细胞以及合适的浓度和时间进行后续实验;应用平板克隆实验检测蒲公英萜醇对细胞的集落形成能力影响；采用DCFH-DA荧光染色法观察细胞内活性氧生成量变化;利用Hoechst荧光染色检测在蒲公英萜醇的作用下,乳腺癌细胞凋亡的形态学变化；通过流式细胞术检测细胞凋亡率;应用吖啶橙染色、透射电镜、免疫荧光染色观察蒲公英萜醇处理后细胞发生自噬的情况;利用Western blot实验检测蒲公英萜醇用药后细胞凋亡和自噬相关蛋白表达以及相关信号通路的变化情况。结果:MTT结果显示蒲公英萜醇对MDA-MB-231细胞没有明显影响,MCF-7细胞的增殖能力受到显著抑制且呈浓度依赖性;显微镜下观察用药后MCF-7细胞数量减少;平板克隆实验结果显示蒲公英萜醇可显著抑制MCF-7细胞克隆形成能力;DCFH-DA染色结果显示,用药组细胞内ROS水平升高;Hoechst实验结果表明,蒲公英萜醇用药组细胞出现凋...

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．不同途径的凋亡通路示意图??（摘自?Ｔｈｅ?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ?ｏｆ?ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：?ｔｈｅｒｅ?ｉｓ?ｍｏｒｅ?ｔｏ?ｌｉｆｅ?ｔｈａｎ?Ｂｄ２．０ｎｃｏｇｅｎｅ．２００３?Ｎｏｖ?２４；?２２??（５３）：８５６８－８０．）??

图１．不同途径的凋亡通路示意图???ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ?ｏｆ?ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：?ｔｈｅｒｅ?ｉｓ?ｍｏｒｅ?ｔｏ?ｌｉｆｅ?ｔｈａｎ?Ｂｄ２．０ｎｃｏｇｅｎｅ．２００３（５３）：８５６８－８０．）??现代生命科学在细胞凋亡研究后的又一较热门的研宄领域。学家Ｃ．ｄｅ?Ｄｕｖｅ....

图２．哺乳动物细胞内３种主要自噬形式??（摘自?Ａｕｔｏｐｈａｇｙ?ａｎｄ?ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ?ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ：?Ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ?ＭＨＣ?ｃｌａｓｓ?ｌｌ?ａｎｔｉｇｅｎ?ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ?ｗｉｔｈ??ｓｔｒｅｓｓ．Ｐｒｏｃ?Ｎａｔｌ?Ａｃａｄ?Ｓｃｉ?Ｕ?Ｓ?Ａ．２００５?Ｍａｙ?３１?；ｌ０２（２２）：７７７９－８０．）??

延边大学硕士学位论自嗤（ｃｈａｐｅｒｏｎｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄＡｕｔｏｐｈａｇｙ，ＣＭＡ）?［２义巨自嗤是指非溶酶体来源的膜结构的自噬泡，将细胞质中的可溶性蛋白和变性受损的细胞器进行包裹，自与溶酶体发生融合，进而将待降解的物质底物运输至溶酶体进行降解加工。其负责降解细胞中稳定存在的....

图３．?ＭＴＴ法检测蒲公英萜醇对乳腺癌细胞ＭＤＡ－ＭＢ－２３１和ＭＣＦ－７增殖的影响??

（１２．５、２５、５０、１００和?２００＾ｌｍｏｌ／Ｌ）分别处理乳腺癌细胞ＭＣＦ－７和ＭＤＡ－ＭＢ－２３１??一定时间后（２４，?４８和７２ｈ），结果显示，给药４８ｈ后，蒲公英萜醇对ＭＣＦ－７细胞??显示出明显的抑制作用，且呈剂量依赖性（图３）。当蒲公英萜醇浓度为１００?ｐｍｏｌ....

图４．显微镜观察蒲公英？ｇ醇对ＭＣＦ－７细胞形态变化的影响（２００Ｘ）??

Ｃｏｎｔｒｏｌ组细胞成团生长，连接紧密，形态饱满。用药组细胞的数量减少，且??形态发生了一定变化：细胞连接逐渐分散，形态不规则，贴壁能力降低。提示蒲公??英萜醇处理细胞后对ＭＣＦ－７细胞造成了一定损伤（图４）。??Ｔａｒａｘｅｒｏｌ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?５０｜ｊＩＶＩ?１００｜ｊＭ....

本文编号：3900440