白头翁皂苷B4通过Notch通路对肝癌的抑制作用及其机制研究

发布时间：2024-03-10 09:20

　　目的:通过建立HepG2和Huh-7肝癌细胞模型与裸鼠异种移植肿瘤模型,从体外和体内实验探讨白头翁皂苷B4(Anemoside B4,AB4)抑制肝癌的作用,并从Notch通路的角度探究其可能的作用机制。方法:1.将肝癌细胞随机分组为对照组、AB4给药组、阳性对照组(DAPT组),采用MTT及克隆形成实验检测AB4对肝癌细胞的抑制作用,AnnexinV-FITC/PI染色检测AB4给药后肝癌细胞的凋亡情况,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测AB4给药后肝癌细胞凋亡相关蛋白的表达。2.建立荷瘤裸鼠异种移植模型,随机分组为对照组、AB4给药组、阳性对照组(DAPT组),探究AB4对荷瘤裸鼠肿瘤的抑制作用;制作荷瘤裸鼠肿瘤组织病理切片,采用HE染色观察AB4给药后组织病理形态;运用免疫组化检测AB4给药后肿瘤组织Ki67的表达,以探究肿瘤组织中肝癌细胞的增殖情况。3.运用Western blot检测AB4作用后肝癌细胞Notch通路相关蛋白的表达情况,运用免疫组化检测AB4给药后荷瘤裸鼠肿瘤组织Notch相关蛋白的表达情况。结果:1.MTT实验中,AB4在一定范围内以浓度依赖性的...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
第一部分 体外实验探究AB4对肝癌细胞的抑制效果
    实验材料与方法
        1 实验材料
            1.1 药品与试剂
            1.2 仪器与设备
            1.3 细胞
        2 实验方法
            2.1 药物溶液的配制
            2.2 细胞培养
            2.3 细胞复苏
            2.4 细胞传代
            2.5 细胞冻存
            2.6 MTT实验
            2.7 克隆形成实验
            2.8 Annexin V-FITC/PI染色
            2.9 蛋白免疫印迹法(Western Blot)
            2.10 统计学分析
    实验结果
        1 AB4对肝癌细胞的抑制作用
            1.1 MTT实验检测AB4 对肝癌细胞增殖率的影响
            1.2 克隆形成实验检测AB4 对肝癌细胞的长期抑制效果
        2 AB4 诱导肝癌细胞发生凋亡
            2.1 Annexin V-FITC/PI染色检测肝癌细胞凋亡情况
            2.2 Western Blot实验检测肝癌细胞凋亡相关蛋白的表达
    讨论
第二部分 体内实验探究AB4对荷瘤裸鼠的抑制作用
    实验材料与方法
        1 实验材料
            1.1 药品与试剂
            1.2 仪器与设备
            1.3 细胞与实验动物
        2 实验方法
            2.1 药物溶液的配制
            2.2 实验动物饲养
            2.3 荷瘤裸鼠模型的制备
            2.4 随机分组与给药
            2.5 HE染色
            2.6 统计学分析
    实验结果
        1 AB4 给药后荷瘤裸鼠成瘤情况
        2 AB4 给药后对荷瘤裸鼠肿瘤组织形态学的影响
        3 AB4 给药后对荷瘤裸鼠肿瘤组织Ki67 表达的影响
    讨论
第三部分 AB4 对肝癌的抑制作用与Notch通路的关系
    实验材料与方法
        1 实验材料
            1.1 药品与试剂
            1.2 仪器与设备
            1.3 细胞
        2 实验方法
            2.1 Western Blot实验
            2.2 免疫组织化学实验(Immunohistochemistry)
            2.3 统计学分析
    实验结果
        1 Western Blot实验检测肝癌细胞Notch通路相关蛋白的表达
        2 Immunohistochemistry实验检测荷瘤裸鼠肿瘤组织Notch通路相关蛋白的表达
    讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢



本文编号：3924577