茵陈篙中去乙酰氧母菊素基于P2x7受体调控巨噬细胞的炎症反应和酒精暴露肝细胞的脂质蓄积的机制

发布时间：2024-03-15 02:24

　　目的:去乙酰氧母菊素(leucodin)是一种倍半萜内酯,分离于茵陈蒿的地上部分。研究发现茵陈蒿具有一定的抗炎和保肝活性,但仍未确定来自茵陈蒿的生物活性成分leucodin是否能改善乙醇诱导的肝细胞损伤并伴有炎症。本研究采用了脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)联合刺激几种类型的巨噬细胞,以及肝细胞暴露于乙醇的模型,以研究leucodin如何通过嘌呤受体P2X配体门控性离子通道7(purinergic receptor P2Xligand-gated ion channel 7,P2X7R)途径抑制巨噬细胞中的炎症反应,并减轻乙醇诱导的肝细胞中的脂质蓄积。方法:采用小鼠腹腔巨噬细胞,小鼠骨髓来源的巨噬细胞和人巨噬细胞THP-1细胞等若干种类巨噬细胞,用不同浓度leucodin(1μM和5μM)预处理1小时,然后用LPS和ATP刺激。通过蛋白印迹分析IL-1β、P2x7R和NLRP3的蛋白表达水平。将对数生长期的HepG2细胞暴露于乙醇以诱导脂质沉积。在此之前用不同浓度的leucodin(1μM和5μM...

【文章页数】：39 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 实验材料和方法
    1.1 实验仪器与试剂
        1.1.1 主要实验器材
        1.1.2 主要实验试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离
        1.2.2 小鼠骨髓源巨噬细胞的分离
        1.2.3 细胞培养
        1.2.4 细胞存活率测定
        1.2.5 一氧化氮(NO)的测定
        1.2.6 蛋白质印迹分析
        1.2.7 免疫细胞化学染色
        1.2.8 酶联免疫吸附试验(ELISA)
        1.2.9 统计分析
第二章 实验结果
    2.1 LPS/ATP刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放成熟IL-1β
    2.2 去乙酰氧母菊素在小鼠腹腔巨噬细胞中通过P2x7R抑制炎症反应
    2.3 去乙酰氧母菊素通过P2x7R-NLRP3轴抑制THP-1巨噬细胞中LPS/ATP诱导的IL-1β裂解
    2.4 去乙酰氧母菊素通过P2x7R-NLRP3轴抑制小鼠BMDMs中LPS/ATP诱导的IL-1β裂解
    2.5 去乙酰氧母菊素抑制乙醇暴露的脂肪肝细胞中的脂质沉积
第三章 讨论
第四章 结论
参考文献
致谢



本文编号：3928408