欧亚旋覆花总黄酮对衰老骨髓间充质干细胞的保护作用

发布时间：2024-04-20 01:17

　　第一部分大鼠原代骨髓间充质干细胞的培养及鉴定目的:大鼠BMSCs体外分离、培养、纯化,观察细胞形态、鉴定细胞表面标志物及细胞多向分化能力。方法:在体外通过全骨髓贴壁法培养大鼠BMSCs,并进行形态学观察,流式细胞仪检测细胞表面标记物及细胞周期分布,分别向成脂、成骨方向诱导分化。结果:大鼠BMSCs是呈放射状排列的梭形细胞集落,可连续稳定传代3代以上。第3代BMSCs的表面标志物CD29、CD44、CD90均呈阳性表达,而CD11b呈阴性表达。成脂、成骨诱导分化好,油红O染色和茜素红染色均呈阳性。细胞周期分析显示BMSCs符合正常细胞生长特征且生长活跃。结论:全骨髓贴壁法培养大鼠BMSCs较易分离、纯化、扩增细胞,所获细胞对实验研究具有重大意义。第二部分探索D-半乳糖诱导骨髓间充质干细胞衰老的最佳作用浓度目的:探索构建D-gal诱导BMSCs衰老的最佳作用浓度。方法:实验分组如下:正常对照组(Control组);低浓度组(L组,BMSCs+10g/L D-gal);中浓度组(M组,BMSCs+20g/L D-gal);高浓度组(H组,BMSCs+40g/L D-gal)。CCK-8法检测...

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【部分图文】：

图1.1大鼠BMSCs形态学观察（×100）

加入1ml碘化丙碇（PI）4℃条件下避光染色30min，流式细胞仪检测分析细胞周期。2结果2.1BMSCs的形态学观察原代提取的BMSCs在24h后开始贴壁，细胞开始伸展，呈现梭形、椭圆形或多角形（图1.1A）；48h后贴壁细胞增多，有细胞集落形成；....

图1.2大鼠BMSCs表面标志物的表达

重庆医科大学硕士研究生学位论文注：A原代BMSCs24h首次换液；B原代BMSCs生长5d的细胞形态；C原代BMSCs传至第3代的细胞形态2.2BMSCs表面标志物鉴定及成骨、成脂分化能力2.2.1BMSCs表面标志物的鉴定流式细胞仪分析结果示....

图1.3大鼠BMSCs多向分化能力的鉴定

图1.2大鼠BMSCs表面标志物的表达Figure1.2SurfacemarkersexpressionofratBMSCs注：ACD29,99.7%；BCD44,99.75%；CCD90,98.09%；DCD11b,2.87%2.2.2BMSCs....

图1.4第3代大鼠BMSCs周期分布

图1.4第3代大鼠BMSCs周期分布Figure1.4Cellcycleofthe3rdpassagera/G1期：65.59%，G2/M期：11.16%，S期：23由于其自我更新和多向分化潜能在机体损伤修骨或软骨及肌细胞方向分化[2,3]....

本文编号：3958658