水母中引起炎症反应的毒素蛋白的筛选和鉴定

发布时间：2024-05-17 12:55

　　随着全球气候变暖和海洋污染物增多等因素的影响,水母暴发性增长,导致沿海地区水母蛰伤发病率逐年增加。水母属于刺胞动物门,在全世界海域分布广泛,当其受到外界刺激后会同时释放大量粘液和刺丝囊毒素作为防御措施。人类皮肤与这些物质接触后常见的症状为皮肤炎症反应如红肿、瘙痒等,严重者会导致全身中毒反应甚至死亡。水母蛰伤导致的皮肤症状在临床上称为水母皮炎,炎性反应伴随着水母皮炎的整个过程,严重影响人们的日常生活和身体健康。由于水母种类繁多、捕捞后易自溶,毒素量小易失活导致提取困难,毒素中的毒素蛋白和多肽难以鉴定等原因造成了目前缺乏治疗水母蛰伤导致的皮肤炎症反应的特效药。本文利用组学研究手段探究不同水母中引起皮肤炎症反应的蛋白,以期寻找在两种水母中起相同作用的关键蛋白。1、建立了海月水母粘液的收集方法。采用把水母从海水环境中去除的方法刺激分泌粘液,分别收集0-10 min、10-20 min、20-30 min、30-40 min、40-50 min、50-60 min这6个时间段分泌的粘液和水母组织液。结果显示海月水母粘液的量在前30 min内逐渐减少,在后30 min又逐渐升高。考虑到自溶和海水的...

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1BSA标准曲线

min用15mL离心管收集一次粘液，总用时60min。在4oC集上清液并分装储存于-80°C冰箱中，以备进一步实验使用织匀浆的制备双蒸水冲洗并用滤纸擦干表面后，将其置于50mL离心管中。在每个工作循环中，工作时间和休息时间分别为20s和6水母组织超....

图1.2海月水母（A.coerulea）应激诱导的粘液分泌和自溶（A）每隔10min粘液的分泌量；（B）每隔10min粘液的蛋白浓度；（C）每隔10min粘液的蛋白

所有数据均表示为平均值±标准差（SD）。通过单因素方差（one-wayANOVA）分析和多因素比较的图基检验（Tukeytest）确定两组之间的统计显著性差异。p0.05视为具有显著意义。1.3结果1.3.1粘液的时间-蛋白浓度变化通过将水母从海水中移除来刺激其粘液的分....

图1.3海月水母（A.coerulea）的组织液与不同时间段内分泌的粘液的SDS-PAGEFig.1.3SDS-PAGEofcollectedmucusandtissuehomogenateofAureliacoerulea.

g/kg）；（D）粘液在60min内的累积蛋白量（mg/kg）；（E）粘液在60min内的累积量（m据均表示为平均值±标准差（n=4），*p<0.05，**p<0.01表明与对照组相比有显著性Fig.1.2Stress-inducedmucusse....

图2.1粘液和组织液的蛋白质组学质量控制指标比较

3个蛋白上调、523个蛋白下调、267个蛋白不变（图2.1A）。由定量比值直方分布图（图2.1B）可知粘液组：组织液组的log2(FC)值分布在在6至+6之间，峰值位于2附近。尽管粘液的蛋白质数量远小于组织匀浆的蛋白质数量，但两组的氨基酸（AA）（图2.1E）....

本文编号：3975627