杨芽黄素在LPS刺激的巨噬细胞中发挥抗炎作用的机制研究
发布时间：2024-05-25 07:59
巨噬细胞是由血液中的单核细胞迁移出血管进入组织和器官后分化形成,作为人体中吞噬作用最强的细胞,其通过其吞噬功能和免疫信息传递功能在人体的非特异性和特异性免疫过程中发挥重要作用。通过识别病原体的组分,巨噬细胞能够被活化,进而吞噬入侵的病原体,同时释放炎症相关的细胞因子。然而,过多的炎症因子分泌也会导致炎症反应的加剧,进而对临近的组织以及巨噬细胞自身造成损伤。杨芽黄素是一种黄酮类化合物,其存在于中药材如益智仁,以及一些药食同源的植物如小花山奈、或可食用的果实如文定果、山胡桃中。在蜂胶中,杨芽黄素是其主要具有活性的黄酮类成分之一。已有的研究表明,蜂胶提取物具有较好的抗炎活性,也有报道认为杨芽黄素可以在无细胞毒性的剂量下通过抑制LPS刺激的巨噬细胞中一氧化氮合酶(iNOS)的活性抑制炎症因子NO的分泌,提示其可能作为蜂胶中主要具有抗炎活性的成分之一。然而目前的研究却没有关于杨芽黄素抗炎作用的明确报道,更无相关研究阐明其发挥抗炎作用的机制和靶点。基于此,我们决定对杨芽黄素发挥抗炎作用的潜在机制展开研究。研究结果表明,在LPS刺激的RAW264.7细胞模型中,杨芽黄素能够显著抑制炎症相关蛋白iNO...
【文章页数】：152 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
第一章 引言
1. 非特异性免疫反应与炎症
2. 巨噬细胞在炎症反应中的作用
3. 巨噬细胞炎症模型及相关信号通路
4. 蜂胶抗炎活性研究进展
5. 本研究的切入点
6. 参考文献
实验流程图
第二章 杨芽黄素对巨噬细胞的毒性作用及安全剂量摸索
2.1 引言
2.2 实验材料和方法
2.2.1 主要试剂
2.2.2 溶液配制
2.2.3 细胞来源
2.2.4 主要仪器设备
2.2.5 实验方法
2.3 实验结果与分析
2.4 讨论
2.5 参考文献
第三章 杨芽黄素对LPS刺激的RAW264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞分泌炎症因子的作用
3.1 引言
3.2 实验材料与方法
3.2.1 主要试剂
3.2.2 溶液配制
3.2.3 实验动物来源及伦理许可
3.2.4 主要仪器设备
3.2.5 实验方法
3.3 实验结果与分析
3.3.1 杨芽黄素可抑制LPS刺激的巨噬细胞分泌NO,但不影响iNOS酶活性
3.3.2 杨芽黄素可抑制LPS刺激的巨噬细胞上清中TNF-α和IL-6的含量
3.4 讨论
3.5 参考文献
第四章 杨芽黄素对LPS刺激RAW264.7细胞iNOS,TNF-α,IL-6 mRNA水平的影响
4.1 引言
4.2 实验材料与方法
4.2.1 主要试剂
4.2.2 溶液配制
4.2.3 主要仪器设备
4.2.4 引物序列[4]
4.2.5 实验方法
4.3 实验结果与分析
4.4 讨论
4.5 参考文献
第五章 杨芽黄素对NF-κB和AP-1信号通路的影响
5.1 引言
5.2 实验材料和方法
5.2.1 主要试剂
5.2.2 溶液配制
5.2.3 主要仪器设备
5.2.4 实验方法
5.3 实验结果与分析
5.3.1 杨芽黄素对LPS刺激的NF-κB激活无明显抑制作用
5.3.2 杨芽黄素可抑制LPS刺激的ERK磷酸化水平
5.4 讨论
5.5 参考文献
第六章 杨芽黄素对MEK1/2磷酸化水平及酶活性的作用
6.1 引言
6.2 实验材料和方法
6.2.1 主要试剂
6.2.2 溶液配制
6.2.3 主要仪器设备
6.2.4 实验方法
6.3 实验结果与分析
6.3.1 Promega公司ADP-Glo试剂盒可以兼容SignalChem公司的激酶反应体系
6.3.2 ATP-ADP转化标准曲线的绘制
6.3.3 杨芽黄素对LPS刺激的MEK1/2磷酸化水平无明显影响
6.3.4 杨芽黄素抑制MEK1/2的活性
6.3.5 杨芽黄素与Human MEK1的分子对接模拟
6.4 讨论
6.5 参考文献
第七章 杨芽黄素对NO分泌的抑制作用的机制研究
7.1 引言
7.2 生物样本中尿素测定方法的摸索和建立
7.2.1 实验材料和方法
7.2.2 实验方法
7.2.3 实验结果与分析
7.3 杨芽黄素对精氨酸酶II表达的抑制作用源于其对NO分泌的抑制
7.3.1 实验材料和方法
7.3.2 实验方法
7.3.3 实验结果与分析
7.4 讨论
7.5 参考文献
第八章 杨芽黄素对LPS致小鼠内毒素血症的作用
8.1 引言
8.2 实验材料
8.2.1 主要试剂
8.2.2 溶液配制
8.2.3 实验动物来源及伦理许可
8.2.4 主要仪器设备
8.3 实验方法
8.3.1 小鼠内毒素血症模型
8.3.2 血清NO水平测定法
8.3.3 ELISA法测定血清与腹腔灌洗液中TNF-α,IL-6的水平
8.3.4 数据处理与分析
8.4 实验结果与分析
8.4.1 杨芽黄素可抑制LPS致内毒素血症小鼠血清中NO,TNF-α,IL-6的水平
8.4.2 杨芽黄素可抑制LPS致内毒素血症小鼠腹腔灌洗液中TNF-α、IL-6的水平
8.5 讨论
8.6 参考文献
第九章 总结
参考文献
本研究创新点
文献综述一: 杨芽黄素药理作用研究进展
参考文献
文献综述二: MEK-ERK信号通路研究进展
参考文献
致谢
参与发表的学术论文
个人简历
本文编号：3981902
【文章页数】：152 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
第一章 引言
1. 非特异性免疫反应与炎症
2. 巨噬细胞在炎症反应中的作用
3. 巨噬细胞炎症模型及相关信号通路
4. 蜂胶抗炎活性研究进展
5. 本研究的切入点
6. 参考文献
实验流程图
第二章 杨芽黄素对巨噬细胞的毒性作用及安全剂量摸索
2.1 引言
2.2 实验材料和方法
2.2.1 主要试剂
2.2.2 溶液配制
2.2.3 细胞来源
2.2.4 主要仪器设备
2.2.5 实验方法
2.3 实验结果与分析
2.4 讨论
2.5 参考文献
第三章 杨芽黄素对LPS刺激的RAW264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞分泌炎症因子的作用
3.1 引言
3.2 实验材料与方法
3.2.1 主要试剂
3.2.2 溶液配制
3.2.3 实验动物来源及伦理许可
3.2.4 主要仪器设备
3.2.5 实验方法
3.3 实验结果与分析
3.3.1 杨芽黄素可抑制LPS刺激的巨噬细胞分泌NO,但不影响iNOS酶活性
3.3.2 杨芽黄素可抑制LPS刺激的巨噬细胞上清中TNF-α和IL-6的含量
3.4 讨论
3.5 参考文献
第四章 杨芽黄素对LPS刺激RAW264.7细胞iNOS,TNF-α,IL-6 mRNA水平的影响
4.1 引言
4.2 实验材料与方法
4.2.1 主要试剂
4.2.2 溶液配制
4.2.3 主要仪器设备
4.2.4 引物序列[4]
4.2.5 实验方法
4.3 实验结果与分析
4.4 讨论
4.5 参考文献
第五章 杨芽黄素对NF-κB和AP-1信号通路的影响
5.1 引言
5.2 实验材料和方法
5.2.1 主要试剂
5.2.2 溶液配制
5.2.3 主要仪器设备
5.2.4 实验方法
5.3 实验结果与分析
5.3.1 杨芽黄素对LPS刺激的NF-κB激活无明显抑制作用
5.3.2 杨芽黄素可抑制LPS刺激的ERK磷酸化水平
5.4 讨论
5.5 参考文献
第六章 杨芽黄素对MEK1/2磷酸化水平及酶活性的作用
6.1 引言
6.2 实验材料和方法
6.2.1 主要试剂
6.2.2 溶液配制
6.2.3 主要仪器设备
6.2.4 实验方法
6.3 实验结果与分析
6.3.1 Promega公司ADP-Glo试剂盒可以兼容SignalChem公司的激酶反应体系
6.3.2 ATP-ADP转化标准曲线的绘制
6.3.3 杨芽黄素对LPS刺激的MEK1/2磷酸化水平无明显影响
6.3.4 杨芽黄素抑制MEK1/2的活性
6.3.5 杨芽黄素与Human MEK1的分子对接模拟
6.4 讨论
6.5 参考文献
第七章 杨芽黄素对NO分泌的抑制作用的机制研究
7.1 引言
7.2 生物样本中尿素测定方法的摸索和建立
7.2.1 实验材料和方法
7.2.2 实验方法
7.2.3 实验结果与分析
7.3 杨芽黄素对精氨酸酶II表达的抑制作用源于其对NO分泌的抑制
7.3.1 实验材料和方法
7.3.2 实验方法
7.3.3 实验结果与分析
7.4 讨论
7.5 参考文献
第八章 杨芽黄素对LPS致小鼠内毒素血症的作用
8.1 引言
8.2 实验材料
8.2.1 主要试剂
8.2.2 溶液配制
8.2.3 实验动物来源及伦理许可
8.2.4 主要仪器设备
8.3 实验方法
8.3.1 小鼠内毒素血症模型
8.3.2 血清NO水平测定法
8.3.3 ELISA法测定血清与腹腔灌洗液中TNF-α,IL-6的水平
8.3.4 数据处理与分析
8.4 实验结果与分析
8.4.1 杨芽黄素可抑制LPS致内毒素血症小鼠血清中NO,TNF-α,IL-6的水平
8.4.2 杨芽黄素可抑制LPS致内毒素血症小鼠腹腔灌洗液中TNF-α、IL-6的水平
8.5 讨论
8.6 参考文献
第九章 总结
参考文献
本研究创新点
文献综述一: 杨芽黄素药理作用研究进展
参考文献
文献综述二: MEK-ERK信号通路研究进展
参考文献
致谢
参与发表的学术论文
个人简历
本文编号：3981902
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/3981902.html
