南蛇藤提取物通过PI3K/Akt/mTOR抑制人胃癌MGC-803细胞侵袭转移的分子机制研究

发布时间：2024-06-01 02:24

　　南蛇藤(Celastrus oricultus Thunb.)系卫矛科南蛇藤属植物,始载于清代《植物名实图考》,在我国分布较为广泛,又名过山风、降龙草、黄藤等。主要有抗炎镇痛、行气活血、消肿、祛风解毒等作用。现代药理学研究发现南蛇藤具有抑制肿瘤细胞的增殖以及侵袭转移、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成等生物学活性。胃癌严重危害着人类的健康,发病率和死亡率高,预后差。胃癌是全球最常见的消化道肿瘤之一,每年约有70万人死于胃癌,该人数占消化系统肿瘤总死亡人数的一半以上,临床上治疗胃癌常以外科手术、化学疗法、放射疗法、免疫疗法、中医中药辅助治疗为主。但由于胃癌患者早期诊治率较低,同时胃癌细胞的侵袭转移能力较强,容易复发转移,因此患者的预后往往都比较差。因此,探索胃癌侵袭和转移的相关机制,发现胃癌的治疗靶点,对胃癌的诊治及预防复发转移均有重大意义。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)在胃癌细胞中的表达水平异常增高,是胃癌细胞增殖和侵袭转移的关键分子。上皮间质转化过程(epithelial mesenchymaltransition,EM...

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【学位级别】：硕士

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符号说明
前言
    参考文献
第一部分 人胃癌组织mTOR的表达以及人胃癌MGC-803/mTOR^-细胞的构建
    1 材料
        1.1 组织样本
        1.2 细胞株
        1.3 实验试剂
        1.4 仪器及耗材
        1.5 主要试剂的配制
    2 方法
        2.1 免疫组化
        2.2 细胞培养
        2.3 慢病毒感染细胞
        2.4 Western blot
        2.5 统计学处理
    3 结果
        3.1 胃癌样本中mTOR、p-mTOR以及EMT相关蛋白的表达水平
        3.2 倒置荧光显微镜下观察慢病毒感染后的荧光表达
        3.3 慢病毒感染后MGC-803细胞中mTOR蛋白的表达
    4 讨论
    参考文献
第二部分 南蛇藤提取物对人胃癌MGC-803/mTOR^-细胞增殖和侵袭转移能力的影响
    1 材料
        1.1 药物准备
        1.2 细胞株
        1.3 实验试剂
        1.4 耗材及仪器
        1.5 主要试剂的配制
    2 方法
        2.1 细胞培养
        2.2 MTT实验
        2.3 Transwell小室迁移实验
        2.4 Transwell小室侵袭实验
        2.5 细胞创伤-愈合实验
        2.6 统计学处理
    3 结果
        3.1 COE对人胃癌MGC-803/mTOR^-细胞增殖能力的影响
        3.2 COE对人胃癌MGC-803/mTOR^-细胞迁移能力的影响
        3.3 C OE对人胃癌MGC-803/mTOR^-细胞侵袭能力的影响
    4 讨论
    参考文献
第三部分 南蛇藤提取物抑制人胃癌MGC-803/mTOR^-细胞侵袭转移的分子机制
    1 材料
        1.1 药物准备
        1.2 细胞株
        1.3 实验试剂
        1.5 耗材及仪器
        1.6 主要试剂的配制
    2 方法
        2.1 细胞培养
        2.2 蛋白样品制备
        2.3 BCA蛋白定量
        2.4 Western blot
        2.5 统计学处理
    3 结果
        3.1 COE对EMT相关蛋白水平表达的影响
        3.2 COE对PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白水平表达的影响
    4 讨论
    参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
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本文编号：3985422