熟地黄促神经干细胞增殖的有效部位筛选

发布时间：2024-06-12 01:36

　　目的:研究中药熟地黄不同提取分离部位对体外培养的海马神经干细胞(NSCs)增殖活性的影响。方法:采用系统溶剂法以及柱色谱分离将熟地黄分成不同部位,采用CCK-8法测定熟地黄各部位对体外培养的海马NSCs增殖活性的影响,并筛选出最佳作用浓度。结果:熟地黄正丁醇部位(0.8、0.4μg/mL,P<0.01)、乙酸乙酯部位(0.8μg/mL,P<0.01)和剩余水部位(0.8、0.4、0.2μg/mL,P<0.01)对NSCs增殖活性有明显促进作用,且乙酸乙酯部位的二氯甲烷-甲醇20∶1洗脱样品(0.2μg/mL,P<0.01)及正丁醇部位的10%乙醇洗脱样品(0.4μg/mL,P<0.01)对NSCs增殖的促进效果最佳。结论:熟地黄乙酸乙酯部位、正丁醇部位和剩余水部位可能含有促NSCs增殖的潜在活性成分。

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【部分图文】：

图1熟地黄各部位的制备

见图1。熟地黄经75%乙醇回流提取，浓缩后制得熟地黄醇提物（SDE）。SDE部位依次经石油醚（60～90℃）、乙酸乙酯、正丁醇萃取，浓缩后得石油醚部位（SDE-Pe）、乙酸乙酯部位（SDE-Ea）、正丁醇部位（SDE-nB）、剩余水部位（SDE-W）。其中，SDE-Ea以硅胶柱层....

图2原代及传代神经干细胞状态（×100)

NSCs取材第1天，镜下观察可见大量分布均匀的悬浮生长的中心透亮小圆球；48h后，可见大部分NSCs聚集成形状不规则的小神经球，背景出现小黑点状的细胞碎片；72h后，可见NSCs聚集的神经球增大，形状规则呈圆形，折光性强；5～7d后，可见大量神经球，且部分神经球折光率降低，中心较....

本文编号：3993022