自噬在红景天甙诱导胃癌细胞凋亡中的作用及机制

发布时间：2025-02-07 18:18

　　 目的:探讨自噬在红景天甙诱导人胃癌细胞凋亡中的作用及机制。方法:红景天甙处理人胃癌AGS细胞,Hoechst33342染色观察凋亡形态学变化,流式细胞术检测凋亡细胞数;透射电镜观察自噬体形成,mRFP-GFP-LC3转染观察荧光自噬斑点;Western blot观察凋亡蛋白、自噬蛋白及PI3K/AKT/mTOR通路蛋白表达;自噬抑制剂氯喹(CQ)预处理AGS细胞,流式细胞术检测凋亡细胞数,Western blot观察凋亡相关蛋白变化,Hoechst33342染色观察凋亡形态学变化;PI3K/AKT激动剂胰岛素样生长因子(IGF-1)预处理AGS细胞,mRFP-GFP-LC3转染和Western blot分别观察自噬变化。结果:红景天甙诱导人胃癌AGS细胞自噬体形成,荧光自噬斑点增多,抑制PI3K/AKT/mTOR通路蛋白活化;CQ预处理胃癌细胞后,细胞凋亡数量显著增加,细胞核固缩现象增强,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax、cleaved-Caspase3、cleaved-Caspase9表达上调;IGF-1预处理胃癌细胞明显减弱红景天甙诱导的自噬现象。结论:中药红景天甙可...

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【部分图文】：

图1 透射电镜观察红景天甙诱导胃癌细胞形成双膜自噬囊泡

Hoechst33342染色结果显示,红景天甙处理细胞后细胞核染色质固缩增加,自噬抑制剂氯喹预处理后,红景天甙诱导的核固缩显著增加,表明抑制自噬可促进红景天甙诱导的细胞凋亡(图3)。2.4氯喹促进红景天甙诱导的细胞凋亡

图2 激光扫描共聚焦显微镜观察红景天甙对荧光自噬斑点的影响

流式细胞分析结果表明,与对照组(4.5±0.7)%相比,红景天甙组细胞凋亡率(13.7±0.9)%明显提高,自噬抑制剂氯喹预处理后,红景天甙的促凋亡效应显著增强(图4),凋亡率由(13.7±0.9)%上升为(25.2±1.2)%。表明抑制自噬可增强红景天甙的促凋亡作用。图3Ho....

图3 Hoechst33342染色观察AGS细胞凋亡形态学变化

图2激光扫描共聚焦显微镜观察红景天甙对荧光自噬斑点的影响图4流式细胞检测胃癌细胞凋亡数量

图4 流式细胞检测胃癌细胞凋亡数量

图3Hoechst33342染色观察AGS细胞凋亡形态学变化2.5氯喹红景天甙对凋亡相关蛋白的表达影响

本文编号：4031105