百会、水沟穴不同时程电针预处理对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障MMP-9、VEGF的影响

发布时间:2017-03-19 16:08

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【摘要】:目的探讨不同时程电针预处理对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障MMP-9、VEGF的影响。 方法(1)实验分组与处理:将64只SD大鼠随机分为模型对照组(16只)、假手术组(16只)、电针预处理7天组(16只)、电针预处理15天组(16只)。各组进行处理如下:模型组参照Zea Longa改良线栓法行MCAO模型制备;假手术组仅予以颈总动脉分离,不插线栓;电针预处理7天组和15天组针刺“百会”、“水沟”穴,连接HANS-100电针仪,频率2/15Hz,电流1mA,,每天1次,每次30min,连续电针预处理7天和15天,均在最后一次电针预处理24h后进行MCAO模型制备,缺血90min后行再灌注。模型组与电针预处理组于再灌注24h后行组织取材,假手术组于干预后24h取材。(2)激光多普勒组织血流仪监控脑血流:参照Zea Longa改良线栓法行MCAO模型制备前、后均使用激光多普勒即刻监测大鼠局部大脑中动脉血流量(以即刻局部大脑中动脉血流量下降至基值的45±10%为造模标准)。(3)指标检测:①血脑屏障MMP-9的检测:采用免疫组化法检测血各组大鼠脑屏障MMP-9阳性细胞表达数;采用荧光定量PCR法检测各组大鼠血脑屏障MMP-9mRNA表达。②血脑屏障VEGF的检测:采用荧光定量PCR法检测各组大鼠血脑屏障VEGFmRNA表达。 结果(1)假手术组大鼠血脑屏障MMP-9阳性细胞呈弱阳性,模型组MMP-9阳性细胞较假手术组明显增多,差异显著(P0.001)。电针预处理各组较模型组明显减少,具有显著性差异(P0.01)。且电针预处理15天组与电针预处理7天组比较,差异有统计学意义(P0.01)。(2)模型组大鼠血脑屏障MMP-9mRNA表达较假手术组明显升高,具有显著性差异(P0.001)。电针预处理各组与模型组比较,差异显著(P0.01)。且电针预处理15天组与电针预处理7天组比较,差异显著(P0.01)。(3)模型组大鼠血脑屏障VEGFmRNA表达较手术组明显升高,差异显著(P0.001)。电针预处理各组与模型组比较,均具有显著性差异(P0.01),但电针预处理7天组与电针预处理15天组比较,有统计学意义(P0.05)。 结论(1)电针预处理7天组和15天组均可抑制脑缺血再灌注大鼠血脑屏障MMP-9阳性细胞及血脑屏障MMP-9mRNA、VEGFmRNA的表达,以电针预处理15天效果为佳。(2)电针预处理对脑缺血再灌注致血脑屏障损伤的保护作用可能是通过下调脑缺血再灌后血脑屏障MMP-9、VEGF表达实现的。
【关键词】:电针预处理 脑缺血再灌注 BBB MMP-9 VEGF
【学位授予单位】:浙江中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R245
【目录】:
  • 常用英文缩略词5-6
  • 中文摘要6-8
  • Abstract8-10
  • 前言10-12
  • 实验研究12-30
  • 一、材料与方法12-19
  • (一) 实验材料12-14
  • 1. 实验动物12
  • 2. 实验试剂与药物12-13
  • 3. 主要实验仪器与设备13-14
  • 4. 主要试剂配制14
  • (二) 实验方法14-18
  • 1. 动物模型的制备14-15
  • 2. 动物分组及处理15-16
  • 3. 预处理方法16
  • 4. 动物组织取材16
  • 5. 免疫组化检测血脑屏障VEGF、MMP-916-17
  • 6. 荧光定量PCR检测血脑屏障VEGFmRNA、MMP-9mRNA17-18
  • (三) 统计方法18-19
  • 二、结果19-22
  • (一) 不同时程电针预处理对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障MMP-9的影响19-21
  • 1. 不同时程电针预处理后脑缺血再灌注大鼠血脑屏障MMP-9阳性细胞的表达19-20
  • 2. 不同时程电针预处理后脑缺血再灌注大鼠血脑屏障MMP-9mRNA的表达20-21
  • (二) 不同时程电针预处理对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障VEGFmRNA的影响21-22
  • 三、分析与讨论22-30
  • (一) 缺血性脑血管病的治疗现状及难点22-23
  • (二) 针刺预处理对脑缺血再灌注损伤保护的可能机制23-25
  • 1. 针刺预处理在缺血性脑血管病中的应用23-24
  • 2. 针刺预处理对脑缺血再灌注损伤保护的可能机制24-25
  • (三) 针刺预处理对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响25-27
  • 1. 针刺预处理对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障MMP-9的影响25-26
  • 2. 针刺预处理对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障VEGF的影响26-27
  • (四) 血流监测下的MCAO模型制备说明27-28
  • (五) 选穴及电针参数依据28-30
  • 1. 选穴依据28
  • 2. 电针参数选取依据28-30
  • 结论30-31
  • 参考文献31-35
  • 附图35-39
  • 致谢39-40
  • 文献综述40-46
  • 参考文献44-46

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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