电针刺激足三里和肾俞穴对兔内毒素性急性肾损伤的影响

发布时间：2017-04-25 17:09

  本文关键词：电针刺激足三里和肾俞穴对兔内毒素性急性肾损伤的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：内毒素性急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)被认为是预测危重症患者病情发生发展及预后的独立危险因素。研究表明,电针刺(electro-acupuncture,EA)可减轻内毒素引起的脏器损伤程度,但具体机制尚不清楚。本研究拟通过电针刺激足三里和肾俞穴来探讨电针刺对内毒素性AKI肾脏的保护作用及其与肾脏HO-1表达的关系。 方法：健康雄性新西兰大白兔60只,2月龄,体重1.5-2.0kg,采用随机数字表法将其随机分为6组(n=10)：对照(C)组、血红素氧合酶.1(HO-1)抑制剂锌原卟啉-IX (ZnPP-IX)(Z)组、内毒素性急性肾损伤(AKI)组、电针刺激穴位+AKI(EA)组、电针刺激非穴位+AKI(SEA)组、电针刺激穴位+AKI+ZnPP-IX(EAZ)组。所有动物以20%乌拉坦(1.5g/kg)腹腔注射麻醉后气管切开插管,保持自主呼吸。右侧颈内动脉置管监测动脉压,耳缘静脉给予脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)5mg/kg建立兔内毒素性AKI模型。给予LPS后2h血压下降至基线值的75%及以下为内毒素性AKI模型制备成功的标准。EA组和EAZ组电针刺激双侧足三里和肾俞穴,疏密波,频率15Hz,刺激强度以兔出现轻微肌颤为宜,1次/d,15min/次,连续5天；SEA组刺激足三里和肾俞穴旁开0.5cm处；手术当天常规麻醉后持续给予电针刺激；AKI、EA、SEA、 EAZ组耳缘静脉注射LPS5mg/kg,C和Z组给予等容量生理盐水0.5ml。Z和EAZ组给予LPS后2h腹腔注射ZnPP-IX10μmol/kg,其它4组给予等容量NaHCO31ml。注射LPS后6h经心脏取血,经膀胱取尿液,全自动生化分析仪测定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和尿α1微球蛋白(α1-MG)浓度；ELISA法测定血清致炎因子TNF-α和抑炎因子IL-10浓度；放血处死兔取肾脏,采用苏木素伊红(HE)染色法,电镜下观察肾组织病理学改变并评分(HSK); TUNEL法检测肾组织细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数(AI)；硫代巴比妥酸法测定肾组织丙二醛(MDA)含量、黄嘌呤氧化酶法测定肾组织超氧化物岐化酶(SOD)活性；Western blot法检测肾组织HO-1蛋白的表达、RT-PCR法检测肾组织HO-1mRNA基因的表达情况。 结果：与C组比较,AKI、EA、SEA和EAZ组血清BUN、Cr、TNF-α、IL-10、尿α1-MG浓度、HSK评分、AI、MDA含量均升高,SOD活性降低,HO-1蛋白、HO-1mRNA基因的表达均上调(P0.05),Z组上述各项指标差异无统计学意义(P0.05)；与AKI组比较,EA组血清BUN、Cr、TNF-α、尿α1-MG浓度、HSK评分、AI、MDA含量均降低,血清IL-10浓度、SOD活性升高,HO.1蛋白、HO-1mRNA基因的表达均上调(P0.05),SEA和EAZ组上述各项指标差异无统计学意义(P0.05)；与EA组比较,SEA和EAZ组血清BUN、Cr、TNF-α、尿α1-MG浓度、HSK评分、AI、MDA含量均升高,血清IL-10浓度、肾组织SOD活性降低,HO.1蛋白、HO-1mRNA基因的表达均下调(P0.05)；而SEA和EAZ两组间上述各项指标差异无统计学意义(P0.05)。 结论：电针刺激足三里和肾俞穴可减轻内毒素性AKI兔肾脏损伤程度,其机制可能与其上调肾脏HO-1表达相关。
【关键词】：电针刺激疗法 穴 足三里 肾俞 内毒素 急性肾损伤 血红素氧合酶-1
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R245
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略语/符号说明10-12
• 前言12-15
• 研究现状、成果12-14
• 研究目的、方法14-15
• 对象和方法15-31
• 1. 实验材料15-18
• 1.1 实验动物15
• 1.2 实验药物15
• 1.3 主要试剂15-16
• 1.4 主要液体及其配置16-17
• 1.5 主要设备17-18
• 2. 实验方法18-31
• 2.1 兔内毒素性急性肾损伤模型的建立18-19
• 2.2 电针刺处理模型的建立19
• 2.3 实验分组19-20
• 2.4 标本采集及指标检测20-21
• 2.5 ELISA方法21-22
• 2.6 HE染色病理学检查22-23
• 2.7 TUNEL原位末端标记方法23-25
• 2.8 Western blot方法25-28
• 2.9 RT-PCR方法28-31
• 2.10 统计学处理31
• 结果31-44
• 1. 肾组织病理观察31-33
• 2. 肾组织中细胞凋亡情况33-35
• 3. 各组兔血清样本指标的比较35-39
• 4. 各组兔尿中α_1-MG浓度的比较39
• 5. 各组兔肾组织中MDA含量、SOD活性的比较39-41
• 6. 各组兔肾组织中HO-1蛋白表达情况41-43
• 7. 各组兔肾组织中HO-1mRNA表达情况43-44
• 讨论44-51
• 1. 兔内毒素性急性肾损伤模型的建立与评价44-45
• 2. 兔穴位确定45-46
• 3. 电针刺处理过程参数的确定46
• 4. 实验组的设置46-47
• 5. HO-1系统与内毒素性急性肾损伤47-49
• 6. 电针刺与内毒素性急性肾损伤49-51
• 结论、创新点及研究方向51-52
• 参考文献52-59
• 发表论文和参加科研情况说明59-60
• 综述 针刺对内毒素性急性肾损伤保护机制的实验研究进展60-70
• 综述参考文献65-70
• 致谢70

【参考文献】

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本文编号：326684