电针加艾灸对AD模型大鼠海马细胞周期调节因子cyclinD1、p16INK4a的影响

发布时间：2017-10-09 11:17

  本文关键词：电针加艾灸对AD模型大鼠海马细胞周期调节因子cyclinD1、p16INK4a的影响

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【摘要】：目的 通过观察电针加艾灸对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠学习记忆障碍及海马细胞周期调节因子CyclinD1和p16INK4a相关指标的影响，从细胞周期的角度探讨电针加艾灸改善AD模型大鼠学习记忆障碍和治疗该病的作用机制，为临床更有效防治阿尔茨海默病提供一定的实验依据。 方法 清洁级Wistar大鼠，雄性90只，适应性喂养一周后，进行Y型水迷宫筛选，剔除不合格者（即反应过于敏捷和过于迟钝的大鼠）。将合格的80只大鼠随机分为4组，即正常组、假手术组、模型组、电针加艾灸组，每组20只。以大鼠双侧海马分别注入Aβ1-42制备AD模型大鼠。造模完成后，电针加艾灸组大鼠针刺“百会”、“肾俞”穴，接韩氏疼痛治疗仪（HANS-100A），选用连续波，频率2Hz，留针15min，然后再于相同穴位上方2-3cm左右，采用直径为6mm的定制艾条施以温和灸，使穴位表皮温度保持在43℃±1℃左右，每穴持续5min，每日1次，6日为1疗程，疗程间休息1日，共2个疗程。治疗结束后第二天即开始进行Morris水迷宫实验测试电针加艾灸对AD模型大鼠学习和记忆能力的影响，免疫组化测定大鼠海马区CyclinD1和p16INK4a蛋白含量的变化，免疫印迹法检测大鼠海马区CyclinD1和p16INK4a蛋白表达强弱。 结果 1．行为学实验结果显示：模型组大鼠的学习记忆能力较正常组明显降低，与正常组、假手术组比较均有显著性差异(P0.05)；定位导航实验和空间探索实验结果来看，与模型组比较，，电针加艾灸组大鼠平均逃避潜伏期时间明显缩短，经过水下平台次数和有效停留时间有所增加，有显著性差异(P0.05)。 2．免疫组化检测结果显示：模型组大鼠海马区CyclinD1蛋白阳性细胞数表达明显增多，P16~(INK4a)蛋白的阳性细胞数表达明显减少,与正常组比较有显著差异（P0.05）；经电针加艾灸治疗后，CyclinD1蛋白阳性细胞数相应减少，P16~(INK4a)蛋白阳性细胞数相应增加，较模型组，有显著性差异（P0.05）。 3.免疫印迹检测结果显示：CyclinD1在模型组中的表达高于正常组和假手术组(P0.05)，而在电针加艾灸组中其表达量明显减弱，与模型组比较有显著差异(P0.05)；P16~(INK4a)在模型组的表达明显低于正常组和假手术组(P0.05)，电针加艾灸治疗后表达量明显增高，高于模型组（P0.05)。 结论 1．电针加艾灸能有效的改善AD模型大鼠的学习记忆功能。 2．电针加艾灸可调节细胞周期相关蛋白含量的变化，降低细胞周期正调控因子CyclinD1的表达，升高细胞周期负调控因子P16~(INK4a)的表达，从而达到抑制AD的病理改变的目的。 3．电针加艾灸防治AD的作用机制可能与其能够阻止细胞周期的异常进程来减少细胞凋亡有关。
【关键词】：电针加艾灸 阿尔茨海默病 CyclinD1 P16~(INK4a)
【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R245
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 缩略词表10-11
• 前言11-13
• 1 材料与方法13-21
• 1.1 主要实验仪器及试剂13-14
• 1.2 实验动物、分组及处理14-15
• 1.3 AD 大鼠模型制备15
• 1.4 行为学检测15-17
• 1.5 标本采集及检测方法17-20
• 1.6 统计方法20-21
• 2 结果与分析21-24
• 2.1 Morris 水迷宫行为学检测结果21
• 2.2 免疫组化法检测电针加艾灸对 AD 模型大鼠海马区 CyclinD1、p16~(INK4a)的影响21-22
• 2.3 免疫印记法检测电针加艾灸对 AD 模型大鼠海马区 cyclinD1、p16~(INK4a)的影响22-24
• 讨论24-36
• 1 现代医学对 AD 的认识24-27
• 1.1 AD 与细胞周期调控24-27
• 2 AD 动物模型的选择与评价27-30
• 2.1 以衰老为基础的 A D 动物模型27-28
• 2.2 以胆碱能学说为基础的 A D 动物模型28-29
• 2.3 转 A PP 基因动物模型29
• 2.4 铝中毒模型29-30
• 2.5 Aβ1 -42 海马注射制作模型30
• 3 电针加艾灸防治 AD 的中医学理论探讨30-36
• 3.1 中医学中老年性痴呆病的发病源流30-31
• 3.2 病因病机31-33
• 3.3 选穴依据33-34
• 3.4 电针加艾灸防治 AD 的独特优势34-36
• 结语36-37
• 参考文献37-41
• 附录 综述41-47
• 参考文献45-47
• 附图47-50
• 致谢50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 赵宁侠,郭瑞林,任秦有,张周良,李斌;温和灸对健康人甲皱微循环影响的研究[J];浙江中医学院学报;2004年01期

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3 朱舟,王伟,杨渝珍;胶质疤痕研究新进展[J];国外医学(物理医学与康复学分册);2004年03期

4 王伟;卜碧涛;谢敏杰;张e

本文编号：999877