SIAH2在胃癌中的表达及其对胃癌细胞移行侵袭能力的影响研究

发布时间：2017-10-09 21:16

  本文关键词：SIAH2在胃癌中的表达及其对胃癌细胞移行侵袭能力的影响研究

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【摘要】：目的:测定SIAH2在胃癌组织中的表达情况,分析其相关的临床参数。通过干扰抑制胃癌AGS细胞中SIAH2的表达,研究其对胃癌细胞迁移侵袭能力的影响,进一步研究SIAH2作为胃癌早期诊断和治疗的靶基因的潜在可能性。方法:1.采取人胃癌标本,使用免疫组化检测胃癌组织及癌旁组织中SIAH2的表达。2.通过统计病例参数研究SIAH2表达与肿瘤各项参数的相关性。3.使用FAM荧光标记的siRNA配合脂质体(Lipofectamine)转染胃癌细胞,使用荧光显微镜以及流式细胞仪挑选转染率最高的细胞株。4.转染siRNA干扰SIAH2的表达,使用荧光定量PCR(qPCR)以及Western blot方法检测SIAH2及其下游PHD3以及HIF-1a的表达变化,研究及验证SIAH2影响移行、侵袭的机制。5.转染siRNA干扰SIAH2的表达,对转染后的细胞进行划痕实验以及Transwell侵袭实验,观察对AGS细胞株增殖、移行、侵袭的作用。结果:1.SIAH2在胃癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常组织(P0.001)。2.SIAH2在胃癌组织中的表达与肿瘤大小(P0.001)、淋巴结转移(P0.001)及TNM分期(P=0.034)呈正相关。3.选取AGS、SGC-7901、MGC-803、MKN-45胃癌细胞株,其中AGS细胞SIAH2表达最高。4.选取AGS细胞,转染荧光标记siRNA,转染后荧光显微镜可见绿色荧光,转染效率达95.7%。4.转染siRNA后AGS细胞SIAH2表达量显著下降,PHD3 mRNA及蛋白表达均上调,HIF-1αmRNA表达上调但HIF-1α蛋白表达量显著下降。5.干扰SIAH2表达后AGS细胞的移行和侵袭能力较阴性对照和空白组显著下降。结论:SIAH2在胃癌组织中的表达高于癌旁正常组织的表达。SIAH2在肿瘤中的阳性率与肿瘤的大小、分期、淋巴结转移情况呈正相关。转染siRNA后胃癌细胞的SIAH2表达量显著下降,且下游因子HIF-1α表达量显著下降。抑制SIAH2的表达可有效抑制胃癌细胞的移行和侵袭能力。以上结果均提示SIAH2在胃癌的发生中起到作用,SIAH2可成为胃癌早期检测或分子靶向治疗的新靶点。
【关键词】：胃癌 SIAH2 移行 侵袭 预后
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-8
• 前言8-9
• 材料和方法9-19
• 结果19-25
• 讨论25-28
• 结论28-29
• 参考文献29-31
• 综述31-36
• 参考文献33-36
• 中英文对照缩略词表36-37
• 致谢37-38

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本文编号：1002449