表达CCL20的重组腺病毒联合热疗对大肠癌的免疫治疗及机制

发布时间：2017-10-10 20:37

  本文关键词：表达CCL20的重组腺病毒联合热疗对大肠癌的免疫治疗及机制

  更多相关文章： 腺病毒 树突状细胞 趋化因子CCL20 热疗 大肠癌

【摘要】：肿瘤的免疫治疗作为全球科技十大进展之首,近年来受到了广泛的关注,探索新的免疫治疗模式是肿瘤学研究的热点之一。近年来以树突状细胞为基础的肿瘤治疗性疫苗取得了较好的进展,但由于肿瘤抗原的易变性、需在体外致敏树突状细胞后回输等操作的复杂性,使得大部分树突状细胞疫苗仍处于实验和临床前期研究阶段。本研究拟探索采用体内致敏树突状细胞的方法,诱导抗肿瘤免疫应答。我们采用了重组腺病毒载体与趋化因子CCL20 cDNA进行重组,将表达CCL20的重组腺病毒Ad5-CCL20体外转染大肠癌细胞CT-26,Elisa检测转染后不同时间段CCL20的表达情况,结果发现已转染病毒的CT-26细胞可高表达趋化因子CCL20,并且表达含量与转染时间成正比,表达的CCL20可以显著地趋化未成熟树突状细胞。将CT-26细胞经42℃诱导后,检测休克蛋白表达情况,Western blot检测结果提示热诱导后的CT-26细胞中HSP70、Gp96表达明显增加,对热休克蛋白与树突状细胞、T淋巴细胞之间的生物学效应研究表明,热诱导后的CT-26可明显上调树突状细胞成熟表型MHC-II、CD80、CD86、CCR6的表达,并大量地分泌细胞因子TNF-α、IL-1α、IL-2、IL-6,诱导后的细胞上清也表现出对T淋巴细胞的明显趋化作用及促进其高分泌IFN-γ的能力。通过瘤内注射重组腺病毒Ad5-CCL20联合体外热疗,荷瘤小鼠的肿瘤生长明显受到抑制,且生存时间要显著延长。本实验证明了表达趋化因子CCL20的重组腺病毒与热疗相结合,可以有效抑制小鼠结肠癌的生长并延长生存时间,为后续的肿瘤治疗提供了一条新的途径。
【关键词】：腺病毒 树突状细胞 趋化因子CCL20 热疗 大肠癌
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.34
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-7
• 详细摘要7-14
• 缩略词表14-15
• 前言15-20
• 第一部分 重组腺病毒载体Ad5-CCL20的构建及鉴定20-39
• 一、材料和方法20-32
• 二、结果32-37
• 三、讨论37-39
• 第二部分 体外热疗对转染重组Ad5-CCL20小鼠结肠癌癌细胞株CT-26 的生物学功能影响的研究39-57
• 一、材料和方法39-48
• 二、结果48-54
• 三、讨论54-57
• 全文小结57-59
• 参考文献59-64
• 综述 树突状细胞诱导的肿瘤免疫治疗研究进展64-73
• 参考文献69-73
• 在读期间发表学术论文73-74
• 致谢74

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本文编号：1008522