毛兰素联合5-Fu对人胃癌细胞株MGC-803增殖凋亡的影响

发布时间：2017-10-12 04:52

  本文关键词：毛兰素联合5-Fu对人胃癌细胞株MGC-803增殖凋亡的影响

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【摘要】：目的:观察毛兰素(Erianin)与5-Fu单药及联合用药对胃癌细胞株MGC-803增殖、凋亡的影响,并探讨两药是否可通过调控Bax、Bcl-2、Caspase-3基因的表达诱导胃癌细胞凋亡,为寻找胃癌新药或优化5-Fu化疗方案提供新的理论依据。方法:(1)以胃癌细胞株MGC-803为研究对象,用不同浓度的Erianin(0.977-250ng/ml)及5-Fu(781.250-200000ng/ml)处理胃癌细胞不同时间(24h,48h,72h),CCK-8法检测吸光值并计算抑制率;(2)分别用五个不同浓度的Erianin和5-Fu单药及固定比例联合(Erianin0.977ng/ml+5-Fu 781.250ng/ml,Erianin 3.906ng/ml+5-Fu 3125ng/ml,Erianin15.625ng/ml+5-Fu 12500ng/ml,Erianin 62.500ng/ml+5-Fu 50000ng/ml,Erianin 250ng/ml+5-Fu 200000ng/ml)处理胃癌细胞48h,利用中效原理计算单药组与联合组IC50浓度及联合用药指数(CI);(3)根据中效原理计算出联合组IC50浓度为4329.044ng/ml(Erianin 5.404ng/ml+5-Fu4323.640ng/ml),用此浓度作为后续所有实验浓度且均处理48h,各实验设单药组(Erianin 5.404ng/ml、5-Fu 4323.640ng/ml)、联合组(Erianin5.404ng/ml+5-Fu 4.324ug/ml)、对照组;(4)流式技术检测细胞周期阻滞情况;(5)AO/EB染色观察细胞凋亡现象;(6)RT-PCR及Western Blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3基因表达情况。结果:(1)Erianin及5-Fu单药随药物浓度增大及作用时间延长抑制胃癌细胞增殖作用增强(p0.05)。由中效原理计算可知,两药小剂量联合时联合指数(CI)1,大剂量联合时联合指数(CI)1;(2)流式技术可知Erianin主要阻滞胃癌细胞于G2/M期,5-Fu主要阻滞胃癌细胞于S期,联合用药时被阻滞于S期的细胞较单用5-Fu时少,被阻滞于G2/M期的细胞较单用Erianin时少;(3)AO/EB染色发现,单药组细胞凋亡现象较对照组明显,而联合组细胞凋亡现象又较单药组明显;(4)RT-PCR证实两药均可使胃癌细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3的m RNA出现表达,Western Blot进一步证实两药可增加Bax、Caspase-3,减少Bcl-2蛋白的表达,联合用药时增加Bax、Caspase-3,减少Bcl-2蛋白表达的作用较单药组明显(p0.05)。结论:(1)一定浓度范围内Erianin及5-Fu对胃癌细胞的抑制作用呈时间及浓度依赖性;(2)两药小剂量联合时具有拮抗作用,大剂量联合时具有协同作用;(3)Erianin及5-Fu可通过调控Bax、Bcl-2、Caspase-3因子的表达促进胃癌细胞凋亡。
【关键词】：毛兰素 5-Fu 胃癌 增殖 凋亡
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 主要英文缩略语索引10-11
• 第1章 前言11-15
• 第2章 材料与方法15-27
• 2.1 实验材料15-17
• 2.2 实验方法17-25
• 2.3 实验数据分析25-27
• 第3章 实验结果27-37
• 第4章 讨论37-43
• 第5章 结论43-45
• 参考文献45-49
• 文献综述49-59
• 参考文献55-59
• 硕士在读期间发表的文章目录59-61
• 致谢61

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本文编号：1016755