负载耐受性乳腺癌抗原的DC在乳腺癌裸鼠中的研究初探
本文关键词:负载耐受性乳腺癌抗原的DC在乳腺癌裸鼠中的研究初探
【摘要】:目的探讨负载耐受性乳腺癌抗原的树突状细胞(dendritic cell,DC)对乳腺癌裸鼠的抑瘤效果。方法以原代乳腺癌组织制备单细胞悬液,体外药敏检测化疗药物,获取药物的IC50值,并渐次用其1/10IC50、1/5IC50、1/2IC50、1IC50、2IC50值浓度冲击处理肿瘤细胞,直至稳定生长于2IC50值的培养基中。使用白细胞单采术,从患者外周血中获取外周血单个核细胞(PBMCs),通过GM-CSF和IL-4诱导贴壁细胞产生DCs,并分别负载耐药株细胞裂解复合物和未经耐药处理的癌细胞裂解复合物,前者获得负载耐受性乳腺癌抗原的成熟DCs。建立耐受性乳腺癌裸鼠模型,随机分为三组:注射负载耐受性癌抗原的DC为实验组(a),注射负载未经耐受性乳腺癌抗原DC为对照组(b),注射同体积生理盐水的为空白组(c),观察荷瘤变化并绘制生长曲线。结果a组(实验组)小鼠癌瘤体积(v)在第0 d和第14 d已有统计学差异(t=3.35,p0.05);第28 d以及第35 d癌瘤体积(v)均明显小于第0 d小鼠癌瘤体积(t=5.21,6.37,P0.01);b组(对照组)小鼠癌瘤体积(v)在第28 d已明显小于第0 d(t=4.17,p0.01),第35差异更加明显(t=5.18,p0.01);c组(空白组)小鼠在第14 d、28 d与第0 d比较,癌瘤体积(v)增大(t=2.85,3.97),第35d显著增大(t=4.57,P0.01);治疗后第35d的癌瘤体积(v):a与c、b与c、a与b相比较,均有显著差异,a组最小,c组最大,abc(F=9.65,P0.01);治疗后第35d的癌瘤重量:a、b、c三组瘤质量,组间两两比较差异显著(F=8.95,P0.01)。结论负载耐受性乳腺癌抗原的DC对乳腺癌裸鼠模型的抑瘤效果显著,抑瘤能力最强。
【关键词】:树突状细胞 耐受性 乳腺癌 裸鼠
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R737.9;R730.43
【目录】:
- 摘要2-4
- Abstract4-8
- 引言8-10
- 第一章 实验材料和方法10-16
- 1.1 实验材料10-11
- 1.1.1 原代乳腺癌细胞10
- 1.1.2 实验试剂10
- 1.1.3 实验仪器10-11
- 1.1.4 选用药物11
- 1.1.5 实验动物11
- 1.2 研究方法11-15
- 1.2.1 乳腺肿瘤组织消化11-12
- 1.2.2 体外药敏检测12
- 1.2.3 耐受性乳腺肿瘤细胞制取12-13
- 1.2.4 DC体外诱导培养13
- 1.2.5 负载耐受性抗原13
- 1.2.6 流式细胞仪检测DC表型13-14
- 1.2.7 荷瘤裸鼠模型建立14-15
- 1.2.8 预实验15
- 1.2.9 荷瘤鼠体内杀瘤实验15
- 1.3 统计处理和分析15-16
- 第二章 结果16-20
- 2.1 药敏检测判定标准16
- 2.2 IC50值的测定及药物剂量曲线16-17
- 2.3 DC表型测定17
- 2.4 荷瘤鼠癌瘤体积变化及荷瘤质量17-20
- 第三章 讨论20-22
- 第四章 结论22-23
- 参考文献23-25
- 文献综述25-39
- 参考文献36-39
- 攻读学位期间的研究成果39-40
- 致谢40-41
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