大鼠尿液中蝶呤类化合物及氨基酸分析新方法的研究

发布时间：2017-10-14 01:19

  本文关键词：大鼠尿液中蝶呤类化合物及氨基酸分析新方法的研究

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【摘要】：国内外文献表明,蝶呤类化合物及氨基酸对生物体新陈代谢有着重要的意义,人体体液中蝶呤类化合物或氨基酸含量的变化,有可能为癌症的早期诊断提供重要的参考价值。本文从生物体中蝶呤类化合物和氨基酸的分析技术、样品前处理以及两者与疾病相关性研究等方面进行了综述。在此基础上,建立了同时测定蝶呤类化合物和氨基酸的离子色谱荧光法和高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法,然后采用离子色谱荧光法对大鼠膀胱癌模型组和对照组进行尿液分析,寻找可能的膀胱癌肿瘤标志物。其主要研究成果如下:1.建立了大鼠尿液中的色氨酸、酪氨酸和蝶呤-6-羧酸的离子色谱荧光分析法。大鼠尿液利用三氯乙酸除蛋白后,采用MCX固相萃取小柱进行净化,然后用离子色谱荧光法进行测定。3种物质的仪器检出限分别为0.08,0.3和0.002μmol/L,加标回收率在71.2%~121.7%之间,RSD小于11.7%。2.建立了大鼠尿液中黄蝶呤、异黄蝶呤、蝶呤-6-羧酸、酪氨酸和色氨酸的高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(HPLC-MS/MS)的分析方法。大鼠尿液除去蛋白后,稀释50倍直接进样分析,采用基质标准曲线法消除基质的影响。5种物质的仪器检出限分别为1.6,1.5,2.2,0.9和1.0 ng/m L,加标回收率在89.0%~107.0%之间,RSD在0.30%~5.19%之间。3.将离子色谱荧光法应用于对照组和膀胱癌模型组大鼠尿液中色氨酸、酪氨酸和蝶呤-6-羧酸的同时测定。测定结果显示3种物质在膀胱癌发生发展过程中呈现出不同的发展趋势,其中色氨酸和蝶呤-6-羧酸有可能成为膀胱癌潜在的标志物。
【关键词】：黄蝶呤 异黄蝶呤 蝶呤-6-羧酸 酪氨酸 色氨酸 大鼠尿液 膀胱癌模型 离子色谱 高效液相色谱-串联质谱法
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R730.43
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-9
• 第一章 绪论9-28
• 1.1 前言9-10
• 1.2 蝶呤类化合物的研究现状10-20
• 1.2.1 蝶呤类化合物概述10-11
• 1.2.2 蝶呤类化合物分析方法研究进展11-18
• 1.2.3 临床应用18-20
• 1.3 氨基酸类化合物研究现状20-23
• 1.3.1 氨基酸类化合物概况20
• 1.3.2 氨基酸类化合物分析方法20-22
• 1.3.3 临床应用22-23
• 1.4 本文研究的主要内容23
• 参考文献23-28
• 第二章 离子色谱荧光法同时测定大鼠尿液中的色氨酸、酪氨酸和蝶呤6羧酸28-39
• 2.1 引言28
• 2.2 实验部分28-30
• 2.2.1 仪器与试剂28-29
• 2.2.2 标准溶液的配制29
• 2.2.3 色谱条件29
• 2.2.4 尿样前处理29-30
• 2.3 结果与讨论30-37
• 2.3.1 淋洗液的选择30-31
• 2.3.2 荧光检测波长的选择31
• 2.3.3 干扰实验31-32
• 2.3.4 净化方法的选择32
• 2.3.5 标准曲线和检出限32-33
• 2.3.6 回收率和精密度实验33-35
• 2.3.7 样品的测定35-37
• 2.4 结论37
• 参考文献37-39
• 第三章 高效液相色谱-串联质谱法同时测定大鼠尿液中可能的五种癌症标志物39-54
• 3.1 引言39
• 3.2 实验部分39-41
• 3.2.1 仪器与试剂39-40
• 3.2.2 标准溶液的配制40
• 3.2.3 样品前处理40
• 3.2.4 色谱条件40
• 3.2.5 质谱条件40-41
• 3.3 结果与讨论41-52
• 3.3.1 质谱条件的优化41-47
• 3.3.2 色谱条件的选择及优化47-48
• 3.3.3 基质标准曲线与检测限48-49
• 3.3.4 回收率与精密度试验49-51
• 3.3.5 样品的测定51-52
• 3.4 结论52
• 参考文献52-54
• 第四章 大鼠尿液中酪氨酸、色氨酸和蝶呤6羧酸含量随膀胱癌发展变化的研究54-65
• 4.1 引言54
• 4.2 实验部分54-56
• 4.2.1 仪器与试剂54-55
• 4.2.2 大鼠膀胱癌模型的建立55
• 4.2.3 MIR扫描检查55
• 4.2.4 色谱条件55
• 4.2.5 尿样前处理55-56
• 4.3 结果与讨论56-63
• 4.3.1 大鼠模型膀胱癌阶段的确定56-57
• 4.3.2 尿样分析57-63
• 4.4 结论63
• 参考文献63-65
• 致谢65-66
• 攻读硕士学位期间的研究成果66

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 万益群,张云伟,郭岚;纸色谱分离-荧光检测法测定人体尿液中的黄蝶呤[J];分析科学学报;2004年04期

2 王庆山;;肿瘤早期诊断方法与应用的进展[J];中国冶金工业医学杂志;2007年01期

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本文编号：1028181