沉默hARD1基因对5-Fu抑制大肠癌SW620细胞株增殖的影响

发布时间：2017-10-16 18:06

  本文关键词：沉默hARD1基因对5-Fu抑制大肠癌SW620细胞株增殖的影响

  更多相关文章： hARD1 RNA干扰 5-Fu 大肠癌 细胞增殖

【摘要】：研究目的：本研究探讨在人大肠癌细胞系SW620中,抑制hARD1的表达后,5-Fu抑制细胞增殖的效果是否受到影响,从而为基因治疗配合化疗的大肠癌治疗方法提供理论基础和实验依据。研究方法：1. SW620、siRNA-SW620和siCON-SW620三株细胞的复苏和培养。2.应用Q-PCR法检测siRNA干扰效率及用5-Fu刺激后的ARD 1表达情况。3.采用MTT法检测使用5-Fu刺激后细胞的增殖情况。4.应用流式细胞仪检测三株细胞使用5-Fu刺激后细胞周期变化情况。5.进行细胞划痕实验来观察三组细胞用5-Fu刺激后迁移能力的变化。6.进行Transwell侵袭实验来观察三组细胞用5-Fu刺激后侵袭能力的变化。7.应用SPSS20.0统计软件进行统计学处理,资料用均数±标准差(x±S)表示；两组均数的比较用t检验；多组均数的比较用单因素方差分析；方差不齐时先进行变量转换,再行分析。显著性水准α=0.05。实验结果：1. SW620、siRNA-SW620和siCON-SW620三株细胞培养成功且生长状态良好；2. Q-PCR法检测细胞ARD1表达水平,发现干扰稳定的siRNA-SW620细胞的mRNA水平降低,与原始细胞比较,差异有统计学意义。用不同浓度5-Fu刺激后并不影响siRNA对SW620细胞ARD1的沉默效果。3.采用MTT法检测5-Fu作用后细胞增殖的情况,发现沉默hARDl使5-Fu抑制SW620细胞增殖的效果增强。4.应用流式细胞仪检测三株细胞应用5-Fu刺激后细胞周期变化情况,发现当5-Fu低浓度时可使G0/G1细胞比例升高,高浓度时诱导凋亡。5.细胞划痕实验结果显示,RNA干扰后细胞迁移能力降低,用5-Fu刺激三株细胞后细胞的迁移能力较未用5-Fu刺激明显下降,抑制ARD1的表达可和5-Fu协同降低细胞的迁移能力。6. Transwell侵袭实验结果显示,RNA干扰SW620 ARD1表达后细胞的侵袭能力下降,5-Fu作用SW620细胞后细胞侵袭能力下降,5-Fu作用ARD1被沉默的SW620细胞后细胞的侵袭能力下降更明显。结论：1.5-Fu降低了大肠癌细胞ARD1 mRNA的表达量。2. shRNA沉默ARD1后可提高5-Fu抑制大肠癌SW620细胞增殖的效果,增加了大肠癌对化疗药物5-Fu的敏感性。3. shRNA沉默ARD1基因后,联合5-Fu低浓度作用可以阻滞大肠癌细胞的细胞周期于G0/G1期,而联合5-Fu高浓度则诱导了大肠癌细胞的凋亡。4. shRNA干扰ARD1后可以与5-Fu协同降低SW620细胞的迁移能力。5. shRNA干扰ARD1后可以与5-Fu协同降低SW620细胞的侵袭能力。
【关键词】：hARD1 RNA干扰 5-Fu 大肠癌 细胞增殖
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.34
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 英文缩略词9-11
• 引言11-14
• 实验材料及方法14-26
• 结果26-38
• 讨论38-42
• 结论42-43
• 参考文献43-46
• 文献综述46-53
• 参考文献50-53
• 攻读学位期间发表的文章情况53-54
• 致谢54

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 崔云,戴向丽;青光眼小梁切除术5-Fu的应用体会[J];长治医学院学报;2001年01期

2 欧阳诚军,李金保,柳志兰,谌曲庆;削切术加复方5-Fu软膏治疗肛周巨大尖锐湿疣9例[J];岭南皮肤性病科杂志;2002年04期

3 李瑛;马兰英;谢兰英;;便携式弹性输液泵持续输注5-FU治疗消化道肿瘤23例临床护理[J];齐鲁护理杂志;2008年07期

4 王素品,贾润英,刘少华;植物血细胞凝集素加5-Fu对小鼠肝癌生长抑制的探讨[J];白求恩医科大学学报;1986年02期

5 张立学，，杨明;浅静脉营养加5－Fu在治疗急性坏死性胰腺炎中的应用[J];吉林医学;1994年01期

6 张菱，张桂屏;宫旁注射5－Fu治疗恶性滋养细胞肿瘤[J];现代妇产科进展;1994年04期

7 ;青光眼滤过性手术中一次应用5－FU的近期效果[J];国外医学.眼科学分册;1995年03期

8 马德峰,尹树国;5-Fu在青光眼小梁切除术中的应用[J];眼外伤职业眼病杂志(附眼科手术);1997年06期

9 傅文亭,王军;青光眼滤过性手术中应用一次性5-Fu效果观察[J];眼外伤职业眼病杂志(附眼科手术);1997年06期

10 马巧荣,马莲芳,刘珂;改良式滤过术联合5-FU治疗新生血管性青光眼[J];眼科新进展;1997年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 方刚;;5-Fu湿敷加干扰素局封联合微波治疗肛周巨大尖锐湿疣5例[A];中南六省性学会第一次学术年会暨湖北省性学会第二届第一次学术年会论文集[C];2003年

2 俞春娣;;微量注射泵用5-FU持续化疗的观察及护理[A];全国静脉输液护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2002年

3 吴苏光;;艾力联合5-FU治疗晚期大肠癌患者的护理[A];中华护理学会全国肿瘤护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2010年

4 毕宏生;吴建峰;卢秀珍;解孝锋;王兴荣;宋继科;;汉防己甲素联合5-FU壳聚糖微球防治增殖性玻璃体视网膜病变的实验研究[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年

5 陈耀坤;;华蟾素加5-Fu治疗中、晚期癌的临床观察[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年

6 王和平;;两种途径行奥沙利铂联合5-FU化疗静脉炎临床观察[A];全国静脉治疗护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2006年

7 王景平;;低分子右旋糖酐加复方丹参与阿托品加5-Fu治疗急性水肿性胰腺炎疗效观察[A];2005年全国危重病急救医学学术会议学术论文集[C];2005年

8 严爱婷;钱晓萍;刘宝瑞;;食管癌5-Fu相关分子标记的研究进展[A];2010’全国肿瘤分子标志及应用学术研讨会暨第五届中国中青年肿瘤专家论坛论文汇编[C];2010年

9 王昌银;;5-FU+湿润烧伤膏治疗尖锐湿疣的临床观察[A];第六届全国烧伤创疡学术会议论文汇编[C];2000年

10 张波;孙静芳;;5-Fu联合KSM治疗恶性滋养细胞肿瘤的临床护理[A];中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会第六次全国学术会议论文汇编[C];2001年

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 付德明;曲安奈德联合5-Fu治瘢痕疙瘩[N];中国医药报;2004年

中国博士学位论文全文数据库 前4条

1 吴江宏;术前5-FU化疗对胃癌患者血液微转移及趋化因子的影响[D];复旦大学;2006年

2 林桂渺;Egr-hTERTC27联合5-FU治疗鼻咽癌及TCF3抑制小鼠胚胎癌生长的实验研究[D];吉林大学;2012年

3 吴全;免疫营养素DHA协同5-FU抑制胃癌的基础研究与肠内营养治疗改善胃癌术后预后的临床研究[D];中国协和医科大学;2009年

4 李晶晶;成纤维生长因子受体4在胃癌中作用的功能研究及其抑制剂和5-Fu作用机制[D];郑州大学;2015年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 吴申;IL-21及其联合5-Fu对人胃癌细胞抗肿瘤作用及其机制的初步研究[D];贵阳医学院;2015年

2 李津;氨肽酶N抑制剂与5-FU及其衍生物联合抗肿瘤活性研究[D];山东大学;2015年

3 姜飞;沉默hARD1基因对5-Fu抑制大肠癌SW620细胞株增殖的影响[D];昆明医科大学;2015年

4 李红瑜;5-FU局部注射逆转治疗下生殖道上皮内瘤样病变的临床与病理研究[D];吉林大学;2007年

5 孙婷;姜黄素联合5-FU对人胃癌SGC-7901细胞抑制作用及其机理的研究[D];湖北中医学院;2008年

6 徐皖湘;外周血二氢嘧啶脱氢酶活性在食管癌5-FU化疗中的应用价值[D];安徽医科大学;2007年

7 张艳;苦参碱联合5-Fu对人胃癌SGC-7901细胞体内外抑制作用及其机制研究[D];中南大学;2010年

8 贾翼;乳酸杆菌对5-Fu腹腔注射致肠屏障功能障碍的保护作用[D];大连医科大学;2010年

9 吴锟;中药人参黄芪复方联合5-FU对人胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响[D];广西医科大学;2012年

10 彭伟;溶瘤腺病毒KH901增强5-Fu对大肠癌LOVO细胞杀伤作用的研究[D];复旦大学;2008年

本文编号：1044119